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荧光素酶报告实验
1
扩增目的片段
扩增包含靶基因与
miRNA
互补位点的
3
< br>’
UTR
序列以及
mutant
序列，上下游引物
5
’
端各含
有不同的酶切位点和保护碱基（如
Pme
I
，
Spe I
）
；电泳检测目的条带，看大小是否正确，
然后用试剂盒纯化
PCR
产物备用。
主要采用了
2
种方法进行序列突变及扩增，
如下图所示：
第一种方法：
第二种方法：
1.2
取
1-2
μ
g
纯化的目的片段或
pMIR-REPORT
< br>载体，
按酶切反应体系配制混合液进行酶切
（加
0.01% BSA
）
，酶切
< br>3h
后，
80
℃灭活
5 min
，冰上降温。酶切产物进行胶回收。
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本文更新与2021-02-27 21:45，由作者提供，不代表本网站立场，转载请注明出处：https://www.bjmy2z.cn/gaokao/676273.html