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在口腔种植领域中,由于各种原因造成的种植牙局部牙槽突骨量不足或种植体
周围骨缺损的修复在种植外科的研究中已经取得了重大突破。新一代的血浆提
取物<
/p>
--
浓缩生长因子(
CGF
,
Concentrate Growth Factors
)能够明显缩短术区
成骨的时间,提高成骨质量,促进成骨及组织的愈合。
p>
CGF
是一种修补生物材
料,其中含有浓缩
生长因子及纤维蛋白,具有改善并增强组织再生的独特性质,
是再生医疗领域中组织刺激
的新技术。
CGF
技术是以患者自身静脉血为原料,
通过特殊的离心方法分离制备,再单独或联合其他生物材料注入硬组织缺损或
软组织创伤处,从而修补缺损,诱导生长,加速局部创伤的愈合并提高愈合质
量。
p>
1
CGF
技术的发展历史
1984
p>
年,
Assoion[1]
等发现了人血浆
中提取的
富血小板血浆
(platelet
—
rich
plasma
,
p>
PRP)
中含有多种生长因子,
当
PRP
与氯化钙以及牛凝血酶混合后,
各种生长
因子即从血小板中的
α
颗粒中释放出来。但是牛凝血酶的使用往
往伴
随着凝血因子Ⅴ、Ⅺ抗体的形成,并且存在着威胁生命的凝血紊乱发生的可能
性
[2]
。作为第二代浓缩血小板,
富血小板纤维蛋白(
PRF
)
< br>是由
Choukroun
首
先引
入的
[3]
。
PRF
< br>是富纤维蛋白凝胶,由患者静脉中抽取的新鲜血液制作而成,
属于新一代的血小板
浓缩物,它制备简单无需任何生物添加剂的处理。在
PRF
通过
离心分离的制备过程中,血小板被激活同时大量脱颗粒细胞中蕴含的重要
的生长因子释放
出来
[4]
。浓缩生长因子
(CGF
)
是
Sacco
首先研发的
[5]
,与
PRF
一样,
CGF
由静脉血分离制备而成。不过,两项技术的离心速度有所
不同。
与
PRF
不同,
CGF
技术采用的速度从
2400
到
2700rpm
不等
,
这是为了分离
静脉血中的细胞
,
因此
CGF
中富含纤维蛋白凝块比
PRF
中的大得多,而且更
粘稠,纤维蛋白的含量也更多。
使用富含纤维蛋白凝块时,将显示更强的再生
力和更好的多样性
。
CGF
比
PRF
具有更高的抗张强度、更多的生长因子、更
好的粘性和更高的粘合强度。
因此,外科医生可以将
CGF
作为隔膜来加速软组
织愈合或与骨移植物混合,以加快新骨重建。
CGF
无需添加任何化学或过敏性
添加剂(例如凝血酶或抗凝剂),因此不会引起
病毒性传染病。
2
CGF
的制备方法
首先采集
10ml
患者的静脉血,注入试管中,注满后勿摇动,立即放入
Medifuge
(
Silfradent <
/p>
意大利)离心加速机的转筒中。设定制备
CGF
< br>程序,旋
转
12
分钟后,可见试
管中分为三层(
最上层为血清,中间纤维蛋白层,底层为
红细胞
及血小板
),将血清分离出来,并存储在特定的存储器皿中。
C
GF
被分
离出来,并存储在稀释的抗菌溶液中(
Lincocin 600mg
)。底层的红细胞部分
及血小板立即存储在器皿中,其中富含红细胞、血小板以及铁、钙和其他基本
元素、可以
用来制备截骨术中的填料,以便混合生物材料及自体骨。将
CGF
切
割成
1-2mm
的微粒,随后依次
与收集的红细胞部分和骨代材料混合,为增加混
合物的柔软度,可添加一些血清。使用特
定的收集设备(
Silfradent
意大利)旋
转
6
秒钟左右将其混合并搅匀,将这种密度大的糊
状粘结剂嵌入骨缺损处。另
外
CGF
具
有极大的可模制性,通过压缩,这种凝结物可能表现为薄膜的形式,
或是凝结物本身破碎
而产生的碎片,通过用手术钳压制获得
CGF
隔膜,然后在
p>
受损区域敷上
CGF
隔膜,由于隔膜具有一
定的粘附力与弹性,使这些区域得以
粘结愈合,手术结束时可以用少许血清来清洗伤口。
3
CGF
的主要成分及生物学特性
CG
F
作用的发挥有赖于其高浓度的各类生长因子及纤维蛋白原所形成的纤维网
状支架。制备
CGF
过程中特殊的变速离心使得血小
板被激活,其中的血小板
α
颗粒释放出各种生长因子,他们能促
进细胞增殖、基质合成和血管生成,而纤
维网状支架又能支持生长因子所诱导生成的新生
组织。其中的浓缩生长因子包
括血小板衍生生长因子
(PDGF
)
、转移生长因子
-
β
(TGF-
β
)
、类胰岛素生
长因
子
(IGF)
、血管内皮生长因子
(VEGF)
、表皮生长因子
(EGF
)
以及成纤维细胞生长
因子(
FGF<
/p>
、骨形成蛋白
(BMPs)
等。他们各自作用分别为:
(1)<
/p>
血小板衍生生长因子—
PDGF
是一种相
对分子量大约为
30kD
的糖蛋白,首
先在血小板的
α
颗粒中发现.也可由巨噬细胞、上皮细胞等合成
和分泌,是最
早出现在伤口的生长因子,可促进结缔组织的修复和再生
< br>[6]
。
PDGF
在血小板
p>
中有
3
种同分异构体:
PDGF
α
α
、
< br>PDGF
β
β
和
PDG
α
β
,在人类主要以<
/p>
PDGF
α
β
杂
二聚体存在。在机体遭受损伤时。
PDGF
从脱颗粒的血小板中
释
放.激活其靶细胞
(
如巨噬细胞、成
纤维细胞、骨髓干细胞等
)
的细胞膜受体,
细胞浆内的信号蛋白获得高能磷酸键,信号蛋白活化后诱发一系列反应。包括
促进伤
口处细胞的有丝分裂,形成功能性毛细血管.巨噬细胞发挥吞噬作用并
释放生长因子等。
PDGF
主要具有丝裂原作用,作为一种促有丝分裂因子,在<
/p>
损伤部位表达较高,促进细胞趋化、增殖,并且可增加胶原蛋白的合成能力
[7]
。
(2)
转移生长因子
-
β
(TG
F-
β
)
有两种形式,即
TGF-
β
1
和
TGF-
β
2
,相对分
子
量大约为
25 kD
。在血小板、巨
噬细胞等内合成。由血小板脱颗粒释放或活化
巨噬细胞分泌,以旁分泌形式作用于成纤维
细胞、骨髓干细胞和前体成骨细胞。
这些细胞又可合成和分泌
T
GF-
β
,以旁分泌或自分泌形式发挥作用
[6]
。因此,
Marx
等认为<
/p>
TGF-
β
是能支持长期组织愈合的骨再
生因子。
TGF
的主要功能是
促进前体
成骨细胞趋化和有丝分裂。促使伤口处胶原基质中的成骨细胞聚集。
此外,
TGF
可以抑制破骨细胞形成和骨吸收,使得骨形成大于骨吸收。
(3)
类胰岛素生长因子
(IGF)
是具有多种生理功能的生长因子,它对多种细胞具有
促进有丝分裂的作用,包括成骨细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、角质细胞等。
作为促
进细胞增殖的另一种表现,
IGF
可以抑制许多细胞在成熟之前
的凋亡。
此外,它还参与皮肤、骨骼和神经系统的发育和分化
[
8]
。其作用机制是:
IGF