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CRISPR-CAS9
基因敲除原理
CRISPR/Cas9
（
Clustered Regularly Interspaced Short
Palindromic Repeats
）是最新出现的
一种
由
RNA
指导
Cas
< br>核酸酶对靶向基因进行特定
DNA
修饰的技术。
CRISPR
是细菌
和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这一系统中，
crRNA
（
CRISPR-derived RNA
）通过碱基配对与
tracrRNA
（
trans-activating RNA
）结合
形成双链
RNA
，此
tracrR
NA/crRNA
二元复合体指导
Cas9
蛋白在
crRNA
引导序列靶定
位
点剪切双链
DNA
达到对基因组
DNA
进行修饰的目的。
Cas9
结合
gRNA
，
gRN
A
的长度约为
80
个核苷酸，包含两
个区域：
gRNA 5'
端前
20<
/p>
个
核苷酸对应于靶标
DNA
，
能
结合在靶
DNA
上的约
60
个核苷酸
（
gRNA
长度取决于表
达
gRNA
的质粒）形成一个发夹结构，这个结构能帮助
gRNA
与
Cas9
结合，并由此
指导与
DNA
的结合。
通过
gRNA
上的靶点序列，在目标基因组上找到靶点序列，并揭开双螺旋，
Cas9
将剪
切
DNA
双链，造成
DNA
双链断裂。
Cas9
使用简单，可满足多个靶点同时操作。
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本文更新与2021-03-02 13:01，由作者提供，不代表本网站立场，转载请注明出处：https://www.bjmy2z.cn/gaokao/689712.html
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