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各个染色具体步骤终极版

作者:高考题库网
来源:https://www.bjmy2z.cn/gaokao
2021-02-28 03:06
tags:

-

2021年2月28日发(作者:either是什么意思)


HE


染色



Hematoxylin-Eosin stains


1




脱蜡至水(


30min




流水冲洗

< p>


2




苏木精染核


20min


左右



流水冲洗



镜观


3




盐酸酒精分化


10



15s



流水冲洗



4




弱氨水返蓝


10



15s


流水冲洗



5




伊红染色


20min


左右



流水冲洗



6




系列酒精脱水



7




二甲苯


I



II


分别透明


10min


左右



8




树胶封固



结果:细胞核呈紫蓝色,细胞浆、基底膜、胶原纤维、肌纤维成粉红

色,可观察细胞的种类和数量。









HE


染色可充分显示肾小球的细胞增 生,


但不能区分内皮细胞、


系膜细胞和上皮细胞的种类。可显示 中性多核和嗜酸性粒细胞浸润。


由于上皮细胞的被覆,


肾小球基 底膜呈略厚的假象。


苏木素小体呈淡


紫红色。纤维素样坏死呈深 粉红色。碎核呈深蓝色细胞核碎片。微血


栓呈粉色。


HE


染色可以很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质


水肿以及炎细胞浸 润。











PAS


染色



Periodic acid-Schiff reaction


1




脱蜡 至水



流水冲洗



2




1%


过碘酸溶液


10min



流水冲洗



吹干



3




雪夫 试剂


37


度孵浴


镜观



流水冲洗



4




苏木 精染核


5min



流水冲洗

< p>


5




盐酸酒精分化


10



15s



流水冲洗



6




弱氨 水返蓝


10



15s

< br>→


流水冲洗



7




系列酒精脱水



8




二甲苯


I



II


分别透明


10min


左右



9




树胶封固



结果:细胞核呈蓝色,肾小球和肾小管基底膜、细胞浆、肾小球系膜

基质、胶原纤维和肌纤维等呈红色。









PAS



H E


染色一样可显示肾小球内的细胞增生和浸润,


因其

< p>
可很好的显示基底膜,


可依细胞的位置区分内皮细胞、

系膜细胞和上


皮细胞。尚可观察基底膜是否增厚、皱缩和毛细血管塌陷。可观察肾< /p>


小囊和肾小管基底膜是否增厚。


尚可观察肾小球硬化、

< p>
系膜基质增生、


系膜溶解。


PAS


阳性的蛋白滴可见于蛋白尿患者的肾小球和肾小管


上皮细胞浆内。


可显示细动脉硬化时的玻璃样变。


细胞性排异反应的


肾小管炎在


PAS


染色中也可很好显示。



注意:第四步染色时间过长容易,颜色过深不容易分辨,所以一定要


把握时间!












PAs M


染色(六胺银套马松三色混合染色)



1




脱蜡 至水



流水冲洗



2




1%


过碘酸溶液


10min



流水冲洗



3




六胺银溶液


65


1h



镜观

(注:


如果六胺银溶液染色过深就要


用氯化金分化)



4




3%


硫代硫酸钠定影



水洗



5




苏木精染核


20min


左右

< p>


流水冲洗



6




盐酸酒精分化

10



15s


< br>流水冲洗



7




弱氨水返蓝


10


15s



流水冲洗



8




Masson


染色:
















?


Masson

溶液染色


1min


左右



1%


冰醋酸洗



镜观< /p>
















?


亮绿橘 黄剂溶液染色


10S


左右


< p>


1%


冰醋酸洗



9




高浓度系列酒精脱水



10



二甲苯


I



II


分别透明


10min


左右



11



树胶封固



结果:基底膜、网状纤维和


IV


型胶原呈黑色,细胞核呈蓝黑色,背


景呈粉红色,免疫复合物呈红色,


III


型胶原呈蓝色或者绿 色。









由于基 底膜可清楚而精确显示,


所以免疫复合物定位精确,



对于肾小球内增生的胶原成分可区分


III


型< /p>


(蓝色或者绿色)



IV



(黑色)













Masson


染色



Masson's trichrome stains


1




脱蜡至水



流水冲洗




2




媒染 剂染


30min



媒染剂配方:


10%


重铬酸钾


+10%

三氯醋酸。




者等量混合,有色融



入无色里)



流水冲洗



3




苏木 精染核


20min


左右



流水冲洗



4




盐酸酒精分化


10

< br>—


15s



流水冲洗

< p>


5




弱氨水返蓝


10



15s< /p>



流水冲洗



6




Masson


染色:

















?


Mas son


溶液染色


1min


左右



1%


冰醋酸洗



镜观

















?


亮绿橘黄剂溶液染色


10S


左右




1%


冰醋酸洗



7




高浓度系列酒精脱水



8




二甲 苯


I



II


分 别透明


10min


左右



9




树胶封固



结果:细胞核呈红色,免疫 复合物呈红色,基底膜、胶原纤维呈蓝或


者绿色(染色液


III


中若为甲苯胺蓝则显蓝色,若为亮绿则显绿色)









该方法优点是显示各部位的免疫复 合物,


呈红色或者嗜复红蛋


白。


可区分 肾间质水肿和肾间质纤维化



III


型 胶原)



前者呈淡蓝色,


后者显深蓝色 并可见蓝色胶原纤维。














直接免疫荧光



1




冰冻 切片(


3um




2




风扇 吹干


2h



4


度冷藏过夜



风扇吹干


1h

< p>
左右


(或者


4


度冷藏


过夜



风扇吹干


2 h




3




加稀释抗体









[Antibody



PBS



(A=1



30



M=1



90



C


3


=1



80



C


4


=1



30



C


1


q=1



60




F=1:10



G=1



80)]


4




37


度孵浴


1h


左右



5




生理盐水


I



II

各洗片


5min


6




甘油稀释液封片



7




4


度冷储



结果:异硫氰荧光素显绿色,罗丹明显红色












-


-


-


-


-


-


-


-



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