-
一、常用染色液的配制
⒈
碘
-
碘化钾（
I2-KI
）溶液
能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测
定的重要试剂。
配方：碘化钾
2g
；蒸馏水
300ml
；
碘
1g
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，
待全
溶解后再加碘，
振荡溶解后稀释至
300mL
< br>，
保存在棕色
玻璃瓶内。用时可将其稀释
2-10
倍，这样染色不致过深，效果更佳。
⒉
苏丹Ⅲ
（
sudan
Ⅲ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥
发油、树脂等染成红色
或淡红色，是著名的脂肪染色剂。
配方：
（
1
）苏丹
III
或苏丹Ⅳ干粉
；
95
％酒精
10ml
；
过滤后再加入
10ml
甘油
（
2
）先将苏丹
III
或
IV
溶解在
50m
l
丙酮中，再加入
70%
酒精
50ml
。
（
3
）苏丹
III
70%
乙醇的饱和溶液。
⒊
1
％醋酸洋红（
aceto
carmine
）
< br>酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红
色，细胞质成浅红色。
配方：洋红
1g
；
45
％醋酸
100ml
煮沸
2h
左
右，
并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，
然后冷却过滤，
加入
4
％铁明矾溶液
1
～
2
滴（不能多加，否则会发生沉
淀）
，放入棕色瓶中备用。
⒋
改良苯芬品红染色液（
Carbol
fuchsine
）
核染色剂。
配制步骤：
先配成三种原液，再配成染色液。
原液
A
：
3g
碱性品红溶于
100ml
70
％酒精中。
< br>原液
B
：取原液
A10ml
加入到
90ml
5
％石炭酸水溶液中。
原液
C
：取原液
B 55
ml
，加入
6ml
冰醋酸和
6ml
福尔马林（
38
％
的甲醛）
。
（原液
A
和原液
C
< br>可长期保存，原液
B
限两周内使用）
染色液：取
C
液
10
～
20ml
，加
45
％冰醋酸
80<
/p>
～
90ml
，再加山梨醇
1~
，配成
10
％～
20
％浓
度的石炭酸品红液，放置两周后使用，
效果显著（若立即用，则着色能力差）
。
适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，
保存性好，使用
2
～
3
年不变
质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色
，但效果较差。
⒌
中性红（
neutral
red
）溶液
用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。
配方：中性红
；蒸馏水
100ml
使用时再稀释
10
倍左右。
⒍
曙红<
/p>
Y
（伊红，
eosin
Y
）酒精溶液
常与苏木精对染，能使
细胞质染成浅红色，起衬染作
用。
配方：曙红
；
95
％酒清
100ml
也常用于
95
％酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便
于识别材
料。
⒎
钌红
（
ruthenium
red
）
染液
钌红是细胞胞间层专性染料，
其配后不易保存，
应现用现配。
配方：钌红
5
～
10mg
；
蒸馏水
25-50ml
⒏
龙胆紫（
gentian
violet
）
为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。
配方：龙胆紫
0.2~1 g
；蒸馏水
100ml
⒐
苯胺兰（
aniline
blue
）溶液
为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，
尤其是染丝状藻类效果好
。
还多用于与真曙红作双重染色，
对于高等植物多用于与番红作
双
重染色。
配方：苯胺兰
1 g
；
35
％或
95
％酒精
100ml
⒑
间苯三
酚（
phloroglucin
）溶液用于测定木质素。
配方：间苯三酚
5g
；
95
％酒精
100ml
注：此溶液呈黄褐色即失效。
⒒
橘红<
/p>
G
（
orange
G
）酒精溶液
为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。
配方：橘红
G 1g
；
95
％酒精
100ml
⒓
番红（
safranin O
）为碱性
染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁，对细胞核中染色
质、染色体和花粉外壁等都
可染成鲜艳的红色。并能与固绿、
苯胺兰等作双重染色，与橘红
G
、结晶紫作三重染色。
配方：
（
1
）番红水溶
液番红
0.1
或
1 g
；蒸馏水
100ml
（
2
）番红酒精溶液番红
0
.5
或
1 g
；
50
％（或
95
％）酒精
100ml
（
3<
/p>
）苯胺番红酒精染色液
甲液
番红
5
g +95
％酒精
50ml
乙液
苯胺油
20ml
+
蒸馏水
450ml
将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。
⒔
固绿（
fast green
）又称快
绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿
色，着色很快，故要很好的
掌握着色时间。
配方：
（
1
）固绿酒精液固绿
0
.1 g
；
95
％酒精
100ml
（
2
）苯胺
固绿酒精液固绿
1 g
；无水酒精
100ml
；苯胺油
4ml
配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。
⒕
苏木精
（
hematoxylin
）染液苏木精是植物组织制片中应用
最广的染料，是苏木科植物苏
木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分
化出不同颜色。
配方很多，
现举
海登汉
氏（
Heidenhain's
）苏木精染色液，又称铁矾苏木
精染色液。
配方：甲液（媒染剂）
：
硫酸铁铵（铁明矾）
2-4g
；蒸馏水
100ml
（必须保持新鲜，最好临用之前配制）
乙液（染色剂）
：苏木精
0.5-1g
；
95
％酒精
10ml
；蒸馏水
90ml
配制步骤：
（
1
）将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，
使其充分氧化（通常在室内放
置两个月后方可使用）
。
（
2
）加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期
保存。
切片需先经甲液媒染，
并充分水洗后才能以乙液染色，
染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色
至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，
但要注意甲液与乙液在任何
情
况下决不能混合。
⒖亚甲基蓝染液
常用于细菌、活体细胞等的染色。
取亚甲基蓝，溶于
100ml
蒸馏水中
即成。
⒗詹纳斯绿
B
（
Janus green
B
）染液
将
绿溶于
1
00ml
蒸馏水，配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。
⒘硫堇染液
取克硫堇
(
也称劳氏青莲或劳氏紫
)
粉末，溶于
1
00ml
蒸馏水中，即可使用。使用此液时，需
要用微碱性自来
水封片或用
1%NaHCO3
水溶液封片，能成多色反应。
18.
黑色素液
水溶性黑素
10g
< br>，蒸馏水
100mL
，甲醛
(<
/p>
福尔马林
)
。可用作荚膜的背景染色。<
/p>
19.
墨汁染色液
< br>国产绘图墨汁
40mL
，甘油
2
mL
，液体石炭酸
2mL
。先将墨汁用
多层纱布过
滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背
景染色。
20.
< br>吕氏
(Loeffier)
美蓝染色液
< br>
A
液：美蓝
(methylene b
lue,
又名甲烯蓝
)
，
95%
乙醇
30mL;
B
液：
。
混合
A
液和
B
液即成，
用于细菌单染色，
可长期保存。
根据需要可配制成稀释美蓝液，
按
1
∶
10
或<
/p>
1
∶
100
稀释
均可。
21.
革兰氏染色液
(1)
结晶紫
(cristal
violet)
液：结晶紫乙醇饱和液
(<
/p>
结晶紫
2g
溶于
20mL95%
乙醇中
)20mL
，<
/p>
1%
草
酸铵水溶液
80mL
。将两液混匀置
24h
后过
滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新
配制。
(2)
芦戈
(Lugol)
氏碘液：碘
1g
，
KI
2g
，蒸馏水
300mL
。先将
KI
溶于少量蒸馏
水中，然后加入
碘使之完全溶解，再加蒸馏水至
300mL
，即成。配成后贮于棕色瓶内备用，
如变为浅黄色能
使用。
(3)95%
乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下
(4)
或
(5)
的其中一项复染即可。
(4)
稀释石炭酸复红溶液：碱性复
红乙醇饱液
(
碱性复红
1g
，
95%
乙醇
10mL<
/p>
，
5%
石炭酸
9
0mL)10mL
，加蒸馏水
90mL
。
(5)
番红溶液：番红
O(safranine O
，又称沙黄
O)
，
95%
乙醇<
/p>
100mL
，溶解后可贮存于密闭的棕
色
瓶中，用时取
20mL
与
80mL
蒸馏水混匀即可。
以上染色液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性
(G+
)
或阴性
(G-
)
细菌，前者蓝紫色，后者淡
红色。
22.
齐氏
(Ziehl)
石炭酸复红液：碱性复红溶于
95%
乙醇
10mL
中为
A
液；溶液
100mL
为
B
液。
混合
A
、
B
液即成。
23.
姬姆萨
(Giemsa)
染液
(1)
贮存液：称取姬姆萨粉，甘油
33mL<
/p>
，甲醇
33mL
。先将姬姆萨粉研细，再
逐滴加入甘油，
继续研磨，最后加入甲醇，在
56
℃放置
1-24h
后即可使用。
(2)
应用液
(
临用时配制
)
：取
1mL
贮存液加
19mLpH7.4
磷酸缓冲液即成。也可以贮存液∶甲
醇
=1
∶
4
的比例配制成染色液。
< br>
24. 1%
瑞氏
(Wright's)
染色液
称取瑞氏染色粉
6g
，放研钵内磨细，不断滴加甲醇
(
共
< br>600mL)
并继续研磨使溶解。经过滤后
染液须贮存一
年以上才可使用，保存时间愈久，则染色色泽愈佳。
二、常用试剂的配制
(
一
)
显微镜镜头清洁剂<
/p>
将乙醚和乙醇按
7
∶
3
混合，装入滴瓶备用。用于
擦拭显微镜镜头上油迹和污垢等（注意瓶
口必须塞紧，以免挥发）
。
(
二
)
固定液
1.
福尔马林
-
乙酸
-
酒精固定液（
FAA
，又称万能固定剂）
福尔马林（
38
％甲醛）
5ml
＋冰乙酸
5ml
＋
70
％酒精
90 ml
，可用于固定植
物的一般组织，但
不适用于单细胞及丝状藻类。幼嫩材料用
50
％酒精代替
70
％酒精，可防止材料收
缩；还可
加入
5ml
甘油（丙三醇）以
防蒸发和材料变硬。
FAA
可兼作保存剂。
< br>2.
福尔马林
-
丙酸
-
酒精固定液（
FPA
）
福尔马林
5ml
＋丙酸
5ml
＋
70
％酒精
90ml
，用于固
定一般的植物材料，通常固定
24h
，效果
比
FAA
好，并可长期保存。
3.
福尔马林
-
丙酸
-
氯仿固定液（卡诺固定液）
配方一：无水酒精
3
份＋冰乙酸
1
份。
配方二：无水酒精
6
份＋冰乙酸
1
份＋氯仿
3
份。
是研究植物细胞分裂和染色的优良固定液，材料固定后，用
95
％和
85
％的酒精浸洗，清洗
2-3
次，也可转入
70
％酒精中保存
备用。
4.
甘油
-
酒精软化剂
甘油
1
份＋
50
％或
70
％酒精
1
份，适用于木材的软化，将木质化根、茎等材料排除空
气后
-
-
-
-
-
-
-
-
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