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肌肉冰冻切片常用组织学及酶组织化学染色技术
（—）苏木精和伊红染色（
Hematoxylin and
Eosin, HE
）
1
．
苏木精
溶液染色
10
分钟
2
．流水冲洗
10
< br>分钟
2
．
伊红溶
液染色
3
分钟
4
．流水冲洗
1
分钟
5
．梯度酒精脱水，透明树胶封固
骨骼肌
HE
染色（肌膜核蓝色，肌纤维粉红色，结缔组织淡
红色）
（二）改良
Gomori
三色染色方法（
Modified
Gomori Trichrome, MGT
）
1
．
Har
ris
苏木精
10
分钟
2
．
水冲洗
10
分钟
3
．
Gom
ori
氏溶液
30
分钟
～
60
分钟
4
．
0
．
2%
醋酸浸洗
1
分
钟
5
．酒精脱水，二甲苯透明，树
胶封固。
骨骼肌
MGT
染色（核紫红
,
肌纤维暗绿色
,
胶原亮绿色
,
线粒体红色）
（三）
PAS
反应法
(Per
iodic Acid Schiffs reaction, PAS)
1
．
固定于
Carnoiy
氏固定液
10
分钟
2
．流水
冲洗
2
分钟
3
．
0
．
5
%
过碘酸
5
分钟
4
．蒸溜水洗
1
～
2
分钟
5
．
Schiff
氏溶液<
/p>
15
～
30
分钟
6
．流水洗
5
～
10
分钟
7
．
Harris
苏木精溶液
2
分钟
<
/p>
8
．流水洗
5
分
钟
9
．脱水、透明、封固（合成树胶）
骨骼肌
PAS
染色结果：糖原红色，肌
内肌原纤维用清晰可见ⅡA
纤维染色反应强，ⅡB、
ⅡC、Ⅰ型
纤维呈中间型。
（四）苏丹黑<
/p>
B
染色
1.
苏丹黑溶液
20
分钟（加盖防气
化）
2
．
流水洗
1
．
过滤的
苏木精染
1
分钟
4
．
流水洗
2
分钟
5
．
甘油明胶封固
结果：脂类物质染成黑色，。
（五）四氮唑还原酶
(NADH
—
tetrarolium redutase,
NADH
—
TR )
1.
孵育于下列基质内
30
分钟，37℃
0
.05M
（或
0.2M
）
Tric
缓冲液（
PH7.4
）
30ml
硝基四氮唑
（
BNT
）
30mg
NADH 24mg
2.
蒸馏水洗。
3.
甘油明胶封固。
骨骼肌
NADH
－
TR
染色
(Ⅰ型肌纤维紫兰色，Ⅱ型肌纤维淡灰色
)
。
< br>
（六）琥铂酸脱氢酶（
Succinate dehydrog
enase
，
SDH
）
染色步骤
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