-
各种
blast
的定义:
1
)
、
B
LAST
P
是蛋白序列到蛋白库中的一种查询。库中存在的每条
已知序列
将逐一地同每条所查序列作一对一的序列比对。
<
/p>
2
)
、
BLAS
T
X
是核酸序列到蛋白库中的一种查询。先将核酸序列翻译成蛋
白
序列(一条核酸序列会被翻译成可能的六条蛋白)
,再对每一
条作一对一的蛋白
序列比对。
3<
/p>
)
、
BLAST
N
是核酸序列到核酸库中的一种查询。库中存在的每条已知序列
都将同所查序列作一对一地核酸序列比对。
4
)
、
T
BLAST
N
是蛋白序列到核酸库中的一种查询。与
BLA
STX
相反,它是将
库中的核酸序列翻译成蛋白序列,再同所查
序列作蛋白与蛋白的比对。
5
)<
/p>
、
T
BLAST
X
是核酸序列到核酸库中的一种查询。此种查询将库中的核酸序
列和所查的核酸序列都翻译成蛋白
(每条核酸序列会产生
6
p>
条可能的蛋白序列)
,
这样每次比对会产生
36
种比对阵列。
双向
BLAST:
< br>用物种
A
的基因序列搜索
(BL
AST)
物种
B
的基因序列,
搜到的最高
相似的序列反过来再
BLAST
p>
物种
A
的基因组
(
阈值
E
小于
1
e
一
20)
。如果两条
序列在这两个
BLAST
中均是最相似的,称为“双向
BLAST
最高相似蛋白”
,则
认为是直系同源关系。
双向
BLAST
(
基因组
)
获得直系同源序列
Gene B
E.
coli
O157
Blast, E value
cutoff=1e-20
E. coli
K12
Gene A
A.
B
为候选
直系同源基因
Mega-Blast
:
可用于搜索近似完全的匹配
,
可以处理一批核苷
酸查询,比标准
BLAST
查询速度快,
NCBI
进行
基因组
BLAST
p>
查询时的默认程序。
PSI-BLAST
:位置特定的迭代
BLAST(Position Specific Iterated BLAST)
,
搜
索数据库以找出与查询序列同一蛋白质家族的成员,
揭示亲缘关系较远的蛋白质
间的关系。
两个序列间的查询
?
?
?
?
比较两个序列的相似性,不需要传统
BLAST
的数据库查询
BLAST2
局部对位排列,获得结构域或序列内重复信息
建议不超过
150 kb
Blast
流程
Blast---
Basic Local Alignment Search Tool
在浏览器中
输入
NCBI
网址即可进入
BLAST
的主页,根据目的选用相应的
blast
类别进行搜索。进入搜索页面后,把查询序列粘贴到“
search
< br>”编辑框中。在
database
选择项中,
有若干数据库可以选择,
BLAST
的缺省数据库
是
nr
数据库,
如果有特别需要可以选
别的数据库。点击
BLAST
之后,程序就会把序列提交给
p>
BLAST
服务器,服务器会返回给用户一个
requestID
,用于搜索
BLAST
结果。
输入
ID
,点击相应按
钮,浏览器就会弹出新的窗口显示
BLAST
结果。
BLAST
结果通常包括三个部分:
1
、序列在数据库中搜索得到的
Hit
s
分布图,把用户序列在数据库中能找到的匹
配序列从高到底用
不同颜色的线条图形表示出来。
2
、
在数据库中检索到的匹配序列的从高到低的排序,
BLAST
显
示所有
E
值小于
设定的
E
值的匹配序列。这个部分包括三个数据:
------
第一列:序列的名称
---
---
第二列:
Score
(分值)<
/p>
,用户序列和数据库序列中命中序列比对之后的
相似性打分,打分
越高则序列相似性越高。
------
第三列:
E
值,是随机产生一个比所得分值高的对位排列的概
率。是衡
量分值可靠性的测度,
E
值越
小
,
所得相似序列的可靠性越高。
如果用户有大量的数据,则需要将
BLAST
< br>程序下载到用户本地的计算机中,进
行本地化分析。
<
/p>
BLAST
系列程序选择流程
查询序列<
/p>
蛋白质序列?
是
蛋白质数据库?
否
否
蛋白质数据库?
否
是
数据库翻译?
是
否
是
blastp
tblastn
blastx
tblastx
blas
tn
举例:
恐龙蛋化石中的
18s rDNA
对从恐龙蛋提取出来的
18S
rDN
A
进行
BLAST
,得出多个分值较高
同时
E
值很
小的结果,根据此值做出与
恐龙蛋基因的遗传树
发现
DA18s1
类似于真菌
DA18s7
类似于被子植物
DA18s1
、
DA18s7
与鸭、人、鳄鱼和其他动物的序列差异很大
鸟类与爬行类是恐龙现存的最近的物种
;
DA18s1/7
都不是真正的恐龙
DNA
麻黄碱类化合物的起源假说
背景介绍:
Dopamine
能神经元与学习
,记忆,运动及药物成瘾有关
麻黄碱与人体内肾上腺素受体<
/p>
(AD)
及多巴胺转运蛋白(
DAT
p>
)结合
解释:
?
麻黄碱是麻黄的一种防御物质,其作用之一是抵抗镰孢菌的侵染
?
麻黄碱对镰孢菌的防御与麻黄碱和
镰孢菌中的
FG07634
蛋白结合有关
?
FG07634
蛋白与人体神经系统中主管奖励机制的一种蛋白
----Dopamine
transporter
(DAT)
具有同源性
(
由于这种同
源性,使麻黄碱类化合物能
够干扰人体
“奖励系统”的正常运转,从而发生毒品效应
)
。
推测:
?
推测
FG
07634
蛋白的功能,因同源同功,推测其为“转运蛋白”
?
推测被
F
G07634
蛋白转运的物质
---
与
Dopamine
、
Serotonin
、
Adrenaline
、
GABA
、
Prol
ine
等神经介
质的功能及结构相似
---
可能与镰孢菌对植物的侵害有关
进一步得出:
Fusaric Acid
—可能被
FG07634
转运的物质
?
Fusaric Acid
与
Dopamine
的相似性
?
Fusaric
Acid
能抑制
Dopamine
I
型受体活性
(
中国抗生素杂志,
2001)
?
Fusaric
Acid
能抑制植物
Dopamine
代谢途径中的
Tyrosine Hydroxylase
,人
Dopamine
代谢途径中的
Dop
amine
?
-Hydroxylase
?
Fusaric
Acid
是镰孢
菌分泌的一种非特异性的毒素,在对植物侵染过程中
与其他毒素有协同作用;同时在镰孢
菌的不同生长时期也有不同的生理作用
植物
Dopamine
代谢途径
:
Tyrosine
Decarboxylase
Tyramine
Hydroxylase
Dopamine
Tyrosine
人类
Dopamine
代谢途径
:
Tyrosine
Tyrosine
Hydroxylase
N
oradrenaline
L-Dopa
Decarboxyl
ase
?
-Hydroxylase
D
opamine
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