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转录组组装

作者:高考题库网
来源:https://www.bjmy2z.cn/gaokao
2021-02-27 21:43
tags:

-

2021年2月27日发(作者:setpoint)


目录



Next-generation transcriptome assembly


应用第二代测序技术的转录组组装


................ 2


第一部分:总体介绍挑战与机遇


............................................. ................................... 2


第 二部分:实验提取与数据分析


.......................... .................................................. .... 2


组装前:


................. .................................................. ......................................... 2


组装策略:


...................... .................................................. ................................ 3


选择策略


....................................... .................................................. .......................... 4


选择组装软件


........................................... .................................................. ............... 4


评价组装的质量


.. .................................................. .................................................. .. 5


总结和未来的展望


............... .................................................. .................................... 5


全文完


........................ .................................................. ............................................ 5


































Next-generation


transcriptome


assembly


应用第二代测


序技术的转录组组装




第一部分:总体介绍挑战与机遇



1.



现有的转录组组装技术主要有三 大方向:基于参考序列的组装,从头组装,两


者结合的组装方法



2.



第二代测序与

< br>Sanger


测序在转录组中的优势:高灵敏度,高精度,高深度,检

< p>
测范围广甚至包括起调节作用的稀有转录本,



3.



第二代测序与其他高通量技术如 基因芯片技术相比在转录本中的优势:能达到


单碱基水平的分辨率,能反应表达水平的动 态变化,能进行从头基因注释



4.



第二代测序在组装中的挑战:测序片段


(reads)


短,质量值偏低,数据量大,要


求大内存或者多核计算机。现在已经有一 些软件能解决这些问题如:


Velvet


ABYSS



ALLPATH


等< /p>



5.



转录本 组装与基因组组装的差别:


1.


测序深度问题:


各个转录本的深度不一致



2.


链特异性,组装软件需要考虑正义链和反义链之间的


overlap 3.


转录本变异:例


如可变剪切



第二部分:实验提取与数据分析




组装前




1.



文库构建:


A.


为了多的构建转录本,核糖体


RNA (rRNA)


和丰度过高的转


录本应该被移除,


但是如果实验 要研究转录本的丰度数值的话,


应该构建不


经过移除处理的文库 。



B.


是否取消文库构建的


PCR


过程,因为


PCR

导致高


GC


含量的转录本测序深度偏低。需要研发免扩增的 技术


(Amplification-free


protoc ols)



最新的单分子测序技术则不需要

PCR


扩增


,


尤其是


Helicos


甚至不


需要构建

cDNA


文库,


但是这种测序技术会大幅增加错误率。


应用免扩增的技


术使得转录本的测序深度更平均,更连续,有利于组 装。


C.


利用链特异性


< p>
RNA


测序技术则可以利用互补链的转录本信息来辅助组装。这在基因密度


较大的基因组如细菌,


古细菌和低等真核生物中尤为重要。


此外在检测高等


生物的


antisense transcription


中也有应用。


/bbs/topi c/20719610



/wiki/Antisense_RNA




需要看参考文献


27


:什么是链特异的


RNA


测序



2.



测序:


A.


测序平台的选择:


454 SOLiD Solexa B.


测序片段长度:越长越好


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本文更新与2021-02-27 21:43,由作者提供,不代表本网站立场,转载请注明出处:https://www.bjmy2z.cn/gaokao/676250.html

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