双向电泳技术研究进展

双向电泳的应用及研究进展

摘

要

:

双向电 泳是蛋白质组学研究中最常用的技术

,

具有简便、快速、高分辨

率和重复性等优点。

本文重点介绍了双向电泳的基本原理及其应 用。

同时对当前

双向电泳技术面临的挑战和发展前景进行了讨论 。

关键词

:

双向电泳，应用，前景

Abstract:

Two-

dimensional

electrophoresis

is

now

the

key

technique

in

proteome

research

，

have the advantage of simple and convenient

、

quick

、

high resolution and

good

repeatability.

This

article

introduced

the

technical

principle

and

research

application

，

delivered

the

prospect

of

the

two-

dimensional

electrophoresis

technique .

Key worlds:

Two- dimensional electrophoresis,application

，

prospect

1

双向电泳基本原理

1975

年

,

意大利生化学家

O

’

Farrell

发明了双向电泳技术

[1]

,

双向电泳是指利

用蛋白质的带电性和分子量大小的差异

,

通过两次凝 胶电泳达到分离蛋白质群的

技术。

双向电泳技术依据两个不同的 物理化学原理分离蛋白质。

第一向电泳依据

蛋白质的等电点不同

,

通过等电聚焦将带不同净电荷的蛋白质进行分离。在此基

础上进行第二向的

SDS

聚丙烯酰胺凝胶电 泳

,

它依据蛋白质分子量的不同将之分

离。

双向电泳所得结果的斑点序列都对应着样品中的单一蛋白。

因此，

上千种蛋

白质均能被分离开来，

并且各种蛋白质的等电点，

分子量和含量的信息都能得到。

2

双向电泳的应用

双向电泳的分辨率较高，自第一次应用该技术以来，

其分辨率已从

15

个

蛋白质点发展到

10 000

多个蛋白质点。

一般的双向电泳也能分辨

1 000

～

3000

个蛋白质点

。

因此

，

近年来

，

双向电泳被广泛应用于农业、

医学等研究领域。

2.1

在动物科学中的应用

在动物科学研究 方面，双向电泳被广泛应用于小鼠血清蛋白、卵巢蛋白、兔

晶状体蛋白质、

昆虫离体细胞膜蛋白、

户尘螨蛋白、

家蚕雌性附腺及 其

Ng

突变

体蛋白质、

大腹园蛛毒素蛋白质、

家蚕蛋白质、

牛精液蛋白、

猪巨噬细胞蛋白等

方面的研究。

如钟小兰等

[2]

利 用双向电泳技术分析肝郁症模型大鼠血清蛋白质

组的差异表达。

王治东等

[3]

采用蛋白质组学的双向电泳和蛋白质氨基酸序列 分析

技术研究了

8Gy

γ

射线照射后

24 h

小鼠血清蛋白质的变化。

马翔等

[4]

通过双

向电泳和质谱技术分析性成熟小鼠卵巢蛋白质组，

并对其中的一种蛋白质进行免

疫组化研究。

刘奕志等

[5]

通过双向电泳和质谱鉴定有效分离和 分析兔晶状体蛋

白质组的特性，为白内障的防治带来新的前景。

柳亦松等

[6]

以大腹园蛛粗毒为

材料利用双向电泳技术获得蛋白质组双向电泳图谱，检测到

500

个左右的蛋白

质点，并对其中 部分蛋白质点进行了质谱分析。

靳远祥等

[7]

采用双向凝胶电泳

和计算机辅助分析方法，