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He
染色介绍
苏木精
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伊红染色法
( hematoxylin-eosin
staining )
，简称
HE
染
色法
，石蜡切片技术里常用的染色法之一
。苏木精染液为碱性
，主要
使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色
；伊红为酸性染料
，主要
使细胞质和细胞外基质中的成分着红色
。
染色分类
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性
(
basophilia )
和嗜酸性
(
acidophilia )
。
组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同
的等电
点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为
pH6
左右，细胞内的酸性物质如细
胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面
内质网及透明软骨基质等均被碱
性染料染色，这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋
白质如红细胞中的
血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，
这些
物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，
pH
值升高时，则原来被酸性染
料染色的物质可变为嗜碱性；
pH
值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可
变为嗜
酸性。所以说染色液的
pH
值可以影响染色的反应。
去氧核糖核酸<
/p>
（
DNA
）两条链上的磷酸基向外，带<
/p>
负电荷
，呈酸性，很
容易与带正电荷的苏
木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶
液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝
色。伊红
Y
是一种化学合成的酸性染料，
在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞
浆染色，细
胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度
的红色或粉红色，
与蓝色的细胞核形成鲜明对比。
伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞
的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。
经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘
液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性
溶液显蓝，
如处理适宜
，
可使细胞核着清楚的深蓝色，
胞浆等其它成分脱色。
再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉
红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。
染色结果
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液
< br>呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗
粒呈反
光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球
呈橘红色，蛋白性液
体呈粉红色。
着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改
变。例如，
很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老
时或发生退行性变则呈现
嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，
伊红着色由浅变深。
< br>
常规
HE
< br>染色步骤
（
1
）二甲苯（Ⅰ）
5-10 min
(2)
二甲苯（Ⅱ）
5-10 min
(3)
95%
乙醇（Ⅰ）
1-3 min
（
4
）
95%
乙醇（Ⅱ）
1-3 min
（
5
）
80%
乙醇
1 min
（
6
）蒸馏水
（
7
）苏木精液染色
(8 )
流水稍洗去苏木精液
(9) 1%
盐酸乙醇
(10)
稍水洗
(11)
促蓝液返蓝
(12)
流水冲洗
（
13
）蒸馏水过洗
(14) 0.5%
曙红液染色
(15)
蒸馏水稍洗
(16) 80%
乙醇稍洗
(17) 95%
乙醇（Ⅰ）
(18)
95%
乙醇（Ⅱ）
(19)
无水乙醇
(20)
无水乙醇
(21)
二甲苯（Ⅰ）
(22)
二甲苯（Ⅱ）
(23)
二甲苯（Ⅲ）
1 min
5-15 min
1-3 s
1-3 s
10-30 s
10-30 s
10-15 min
1-2 s
1-3 min
1-2 s
1-2 s
3-5min
3-5 min
5-10 min
5-10 min
3-5 min
2-5
min
3-5 min
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