-
激光共聚焦显微镜
FV1000
(
倒置显
-
光谱扫描型
微
镜
IX
-
81)
简易使用说明
书
1
1
内
启动系
统显微镜镜下观
察
3
容
微分干涉差观察
4
荧光观察
5
取
图的操作界面
6
如何取图
XY
平面单标
7
XY
平面双标
同步扫描方式
10
序列扫
描方式
13
XY
平面
单标
+
微分干涉差
16
XYZ
扫描双标
19
XYL
光谱扫描
21
2D
操作界面
24
图像分析
打开文件
24
3
D
图
像的叠加
25
比例尺的使用
26
3
D
图
像的重建
27
3
D
图
像的旋转
29
Unmixing
31
保存图像
35
2
2
保
存
到
CD-R<
/p>
1
36
关
闭
系
统
37
附
录
38
开启系统
3
2
5
1.
打开计算机
.
2.
打开激光器
.
(
打开钥匙开
关
.)
2-1.
多线氩离子
(458
nm, 488 nm,
514 nm) ON
2-2.
氦氖绿
(543 nm)
ON
2-3.
氦氖红
(633 nm)
ON
3.
打开汞灯电源开关
.
4.
登陆
Windows
XP
系统
.
3
3
User ID:
Administrator
Password: fluoview
5.
打开
FV10-ASW
应用软件
.
显微镜镜下观察
??
微分干涉差观察
??
4
双击快捷方式：
User
ID:
Administrator
Password: Administrator
*
系统软件的启动需要等待一定时间
.
4
1
手控面板
元
件
*DIC
1.
使用手控面板选择物镜
.
(
参照
?<
/p>
Memo
?
.)
2
3
2.
插入起偏镜
.
3.
插入微分干涉滑块
.
4.
点击
FV10-ASW
软件中的
图标
.
Note 1.
使用
TD
滑块控制卤素灯的光强
.
用此旋钮进行微分干
涉法对比度的调节
.
Note 2.
检查滤色片转盘的位置是否为
“” .
如果不是
,
用手柄按下
DICT
图标
.
4
?
Memo
?
按照
的
操作转换物镜的倍率之后，对：
7
-1
●
物
镜
●
各
物镜对应的
元
件
D
IC
*
进行操作
.
5
5
1
2
Hand switch
Note
2
Notes 1 & 3
3
6
5.
标本聚焦
.
Note 1
显微镜镜下观察
??
荧光观察
??
1.
使用手控面板选择物镜
.
2.
点击
FV10-ASW
软件中
Note 1.
选择第
3
步后
,
显微镜进入荧光观察
状态
.
注意此时汞灯的机械快门要打开
.
(
建议通
常机械快门要放在关闭的位置
(
?
) .)
Note 2.
检查
DIC
滑块是否拉出
.
?
Memo
?
关于荧光滤色片
NIBA
：
蓝
色激发
/
绿
色荧光
（例：
F
ITC
、
E
GFP
等
）
Note
WIG
3.
观察之前，检查汞灯
的机械快门要放在
：
绿
色激发
/
红
色
荧
光
开启的位置
（例：
R
hodamine
(
?
).
、
< br>
D
sRed
等
）
6
取图的操作界面
7
的图标
.
3.
使用手控面板选择荧光滤色片
.
(
参照
?
Memo
?
.)
4.
标本聚焦
.
7
Lambda
扫
描的设定
激光输出的调节
物镜
聚焦
时间间隔和时间计数
(
用
于
X
YT
或
X
T
扫
描
)
明场观察
(
显
微镜镜下观察
)
荧光观察
扫描的按钮
(
显
微镜镜下观察
)
选择
X
YZ
,XYT
或
X
YL
染料选择
每个通道的调节
光路图
共聚焦的孔径大小
λ
扫
描带宽选择
卤素灯的光强调节
TwinScanner
Kalman
方
式
设定
取图条件的保存
调出取图条件
图像显示窗口
图像的拇指索引
内存中所显示的文件
8
扫描模式扫描速
8
度像素数缩放
和平移
9
9
如何取图
(XY
平面
-
单标
)
??
获取单张图像
< br>（
XY
平面）（
荧光图像
）
???
例：
绿色荧
光
染色（
FITC
）
1
1.
点击
FV10-ASW
软件中的
2
3
染料选择后的显示界面
10
按钮
关闭汞灯快门
.
同时
,
点击按钮
关闭卤素灯快门
.
2.
点击染料选择按钮
.
在染料
列表中
,
双击用于观察的荧光染料
.
*
取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双
击已指定的荧光染料，并重复步骤
2.
3.
点击
Apply
按钮
.
(
< br>关闭染料选择面板可以用
Close
按钮
.)
10
如何取图
(XY
平面
-
单标
)
4.
点击
X
Y Repeat
按
钮开始扫描
.
4
5.
调节
绿色
(
FITC
)
图像
.
(
图
像调节的略述如下
.
更多的信息
参
照附录
1.)
,
5
6.
点击
S
top
按
钮停止扫描
.
?
(
参
照
?
Memo
.)
6
?
Memo
?
扫描控制面板
:
连续扫描
:
停止
扫
描
:
快速扫描
隔
行扫描
(
)
图像调节略述
[1]
[2]
[1]
探测器的灵敏度调节
(
HV
)
[2]
共聚焦的孔径大小调节
(
C
.A.
)
[3]
激光输出的调节
(
L
aser
)
调节方法
调
节
(
例
:
HV
)
:
点击滑块
,
HV
直
接提高
(
或
降低
)
到
指定的
位置
.
点击此按钮
或者使用鼠标转轮进行
微调
.
[3]
11
11
如何取图
(XY
平面
-
单标
)
7
7.
选择
AutoHV,
并选择扫描
速度
.
8
9
10
12
*
随着扫描速度变慢
,
在保持同等亮度的前提下
,
背景噪音就会消除
.
(
也可以使用
Kalman
accumulation
方式
.
更多的信息，参照附录
2.)
8.
点击
XY
按钮取得一幅图像
.
9.
点击
SeriesDone
按钮
, “2D
View-
LiveImage(x)”
2D
界面就出现
.
10.
保存该幅图像
:
右击图像管理器中显示的图像图
标，选择另存为保存该幅图像
.
(
保存为
“xml”
类型是
FV10-AS
W
软件专用的图
像格式
.)
?
Memo
?
FV10-ASW
专
用的图形格式
OIF
格
式
:
创建
“
一
个含
(16-
b
it TIFF
)
的
图像
”
和
“
一
个附属
文件
,
”
不
能单独分割
.
OIB
格
式
:
创建单个的
O
IF
格
式的文件
,
方
便进行移动和进
行其它的操作
.
12
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
??
获取单张图像
（
XY
平面）（
荧光图
像
）
??
例
：
绿色荧光
（
Alexa 488
）＋
同步扫描
红色荧光
（
Alexa 546
）二重染
色
1
2
3
染料选择后的显示界面
13
1.
击
FV10-ASW
软件中的按钮
关闭汞灯快门
.
同时
,
点击按钮
关闭卤素灯快门
2.
击染料选择按钮
.
在染料列表中
,
双击用于观察的荧光染料
.
*
取消当前荧光染料，选择另外荧光染
料，要双
击已指定的荧光染料，并重
复步骤
2.
3.
击
Apply
< br>按钮
.
(
关闭染料选择面板可以用
Close
按钮
< br>.)
13
.
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
4
4.
点击
X
Y Repeat
按
钮开始扫描
.
5.
<
/p>
调节绿色
(
Alexa
< br>
Fluor
488)
图
像和红色
(
A
lexa Fluor
546)
图
像
.
5
图
像调节的略述如下
(
.
更多的信息
参
照附录
1.)
,
6.
点击
S
top
按
钮停止扫描
.
6
?
.)
(
参
照
?
Memo
?
Memo
?
扫描控制面板
:
连续扫描
:
停止
扫
描
:
快速扫描
隔
行扫描
(
)
图像调节略述
[1]
[2]
[1]
探测器的灵敏度调节
(
H
V
)
[2]
共聚焦的孔径大小调节
(
C
.A.
)
[3]
激光输出的调节
(
L
aser)
调节方法
(
例
:
HV
调
节
)
:
点击滑块
到
指定的
,
HV
直
接提高
(
或
降低
)
位置
.
点击此按钮
或者使用鼠标转轮进行
微调
.
[3]
14
14
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
7
7.
选择
AutoHV,
并选择扫描
速度
.
8
9
10
15
*
随着扫描速度变慢
,
在保持同等亮度的前提下
,
背景噪音就会消除
.
(
也可以使用
Kalman
accumulation
方式
.
更多的信息，参照附录
2.)
8.
点击
XY
按钮取得一幅图像
.
9.
点击
SeriesDone
按钮
, “2D
View-
LiveImage(x)”
2D
界面就出现
.
10.
保存该幅图像
:
右击图像管理器中显示的图像图
标，选择另存为保存该幅图像
.
(
保存为
“xml”
类型是
FV10-AS
W
软件专用的图
像格式
.)
??
获取单张图像
（<
/p>
XY
平面）
（
荧
光图像
）
??
?
Memo
?
FV10-ASW
专
用的图形格式
OIF
格
式
:
创建
“
一
个含
(16-
b
it TIFF
)
的
图像
”
和
“
一
个附属
文件
,
”
不
能单独分割
.
OIB
格
式
:
创建单个的
O
IF
格
式的文件
,
方
便进行移动和进
行其它的操作
.
例：
绿色荧光
（
Alexa 488
）＋
红色荧光
15
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
（
Alexa 546
）二重染色
序列扫描
(
这里介绍线序列扫
描
.)<
/p>
1
1.
点击
FV10-ASW
软件中的
2
3
染料选择后的显示界面
16
按钮
关闭汞灯快门
.
同时
,
点击按钮
关闭卤素灯快门
.
2.
点击染料选择按钮
.
在染料
列表中
,
双击用于观察的荧光染料
.
*
取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双
击已指定的荧光染料，并重复步骤
2.
3.
点击
Apply
按钮
.
(
< br>关闭染料选择面板可以用
Close
按钮
.)
16
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
4
5
6
7
4.
点击序列扫描
,
并
选择线序列方式
.
5.
点击
X
Y Repeat
按
钮开始扫描
.
6.
调节
绿色
(
A
lexa
Fluor
488)
图
像和红色
(
A
lexa
Fluor
546)
图
像
.
(
图
像调节的略述如下
.
更多的信息
参
照附录
1.)
,
7.
点击
S
top
按
钮停止扫描
.
?
(
参
照
?
Memo
.)
图像调节略述
[1]
[2]
[1]
探测器的灵敏度调节
(
H
V
)
[2]
共聚焦的孔径大小调节
(
C
.A.
)
[3]
激光输出的调节
(
Laser)
调节方法
(
例
:
HV
调
节
)
:
点击滑块
到
指定的
,
HV
直
接提高
(
或
降低
)
位置
.
点击此按钮
或者使用鼠标转轮进行
微调
.
[3]
17
17
如何取图
(XY
平面
-
双标
)
8
8.
选择
AutoHV,
并选择扫描
速度
.
9
10
11
18
*
随着扫描速度变慢
,
在保持同等亮度的前提下
,
背景噪音就会消除
.
(
也可以使用
Kalman
accumulation
方式
.
更多的信息，参照附录
2.)
9.
点击
XY
按钮取得一幅图像
.
10.
点击
SeriesDone
按钮
, “2D
View-
LiveImage(x)”
2D
界面就出现
.
11.
保存该幅图像
:
右击图像管理器中显示的图像图
标，选择另存为保存该幅图像
.
(
保存为
“xml”
类型是
FV10-AS
W
软件专用的图
像格式
.)
?
Memo
?
FV10-ASW
专
用的图形格式
OIF
格
式
:
创建
“
一
个含
(16-
b
it TIFF
)
的
图像
”
和
“
一
个附属
文件
,
”
不
能单独分割
.
OIB
格
式
:
创建单个的
O
IF
格
式的文件
,
方
便进行移动和进
行其它的操作
.
18
如何取图
(XY
平面
-
单标
+
微分干涉差
)
??
获取单张图像
（
XY
平面）
（
荧光图
像
＋
微分干涉
）
???
例：
绿色荧光
（
FITC
）
1
2
3
4
染料选择后的显示界面
19
+DIC
图像
1.
点击
FV10-ASW
软件中的
按钮
关闭汞灯快门
.
同时
,
点击按钮
关闭卤素灯快门
.
2.
点击染料选择按钮
.
在染料
列表中
,
双击用于观察的荧光染料
.
*
取消当前荧光染料，选择另外荧光染料，要双
击已指定的荧光染料，并重复步骤
2.
3.
点击
Apply
按钮
.
(
< br>关闭染料选择面板可以用
Close
按钮
.)
4.
选择
TD1.
19
如何取图
(
X
Y
平面
-
单标
+
微分干涉差
)
5
5.
点击
X
Y
Repeat
按
钮开始扫描
.
6.
调节绿色
(
FITC
)
图像和微分干涉差的
6
图像
.
(
图
像调节的略述如下
.
更多的信息
,
参
照附录
1.)
7.
点击
S
top
按
钮停止扫描
.
(
参
照
?
Memo
?
.)
7
?
Memo
?
扫描控制面板
:
连续扫描
:
停止
扫
描
:
快速扫描
(
隔
行扫描
)
图像调节略述
[1]
[2]
[1]
探测器的灵敏度调节
(
H
V
)
[2]
共聚焦的孔径大小调节
(
C.A.
)
[3]
激光输出的调节
(
L
aser)
调节方法
(
例
:
HV
调
节
)
:
点击滑块
,
HV
直
接提高
(
或
降低
)
到
指定的
位置
.
点击此按钮
或者使用鼠标转轮进行
[3]
微调
.
20
20
如何取图
(XY
平面
-
单标
+
微分干涉差
)
8
8.
选择
AutoHV,
并选择扫描速度
.
*
随着扫描速度变慢
,
在保持同等亮度的前提下
,
背景噪音就会消除
.
(
也可以使用
Kalman
accumulation
方式
.
更多的信息，参照附录
2.)
9
9.
点击
XY
按钮取得一幅图像
.
10.
点击
SeriesDone
按钮
, “2D
View
-
LiveImage(x)”
2D
界面就出现
.
10
11
11.
保存该幅图像
:
右击图像管理器中显示的图像图
标，选择另存为保存该幅图像
.
(
保存为
“xml”
类型是
FV10-AS
W
软件专用的图
像格式
.)
(XYZ
扫描
-
双标
)
??
获取<
/p>
3D
图像
(XYZ)
?
Memo
?
FV10-ASW
专
用的图形格式
OIF
格
式
:
创建
一
个含
(16-
的
图像
一
个附属
“
b
it
TIFF
)
”
和
“
文件
,
”
不
能单独分割
.
OIB
格
式
:
创建单个的
O
IF
格
式的文件
,
方
便进行移动和进
行其它的操作
.
21
21
如何取图
(
荧光图像
)
??
例
:
绿色荧光
(FITC)
和红色荧光
(Rhodamine)
双标这里介绍线
序列
1
4
5
6
7
2
8
?
Memo
?
和按钮
:
点击移动
1
.0
?
m
.
:
点
击移动
0
.1
?
m
.
22
扫描取图的过程
.
1.
采用
13
和
14
页步骤
1
到
7.
确定
Z
轴的上限和下限如下
.
2. <
/p>
输入
StepSize
大小
(
点击
OP
按钮可以使用推
荐的值
),
并选择
.
3.
点击
XY Repeat
按钮开始
扫描
.
4.
点击
和
<
/p>
按钮上移焦
点位置
.
(
参照
?
Memo
?
.)
5.
当图像显示到达上限时
,
点
击
Set
按钮确定
.
6.
点击
和
按钮下移焦
点位置
< br>.
22
如何取图
(
参照
?
Memo
?
.)
9
10
7.
当图像显示到达下限时
,
点
击
Set
按钮确定
.
8.
点击
Stop
< br>按钮停止扫描
.
(XYZ
扫描
-
双标
)
9.
选择
AutoHV,
并选择扫描速度
.
*
随着扫描速度变慢
,
在保持同等亮度的前提下
,
背景噪音就会消除
.
(
也可以使用
Kalman
accumulation
方式
.
更多的信息，参照附录
2.)
11
10.
选择
Depth
按钮
.
11.
点击
XYZ
按钮取得图像
.
12.
点击
SeriesDone<
/p>
按钮
, “2D
View
-
LiveImage(x)”
2D
界面就出现
.
12
13
13.
保存该幅图像
:
右击图像管理器中显示的图像图
标，选择另存为保存该幅图像
.
(
保存为
“xml”
类型是
FV10-AS
W
软件专用的图
?
Memo
?
FV10-ASW
专
用的图形格式
格
式
:
OIF
创建
一
个含
(16-
的
图像
一
个附属
“
b
it
TIFF
)
”
和
“
文件
不
能单独分割
,
”
.
OIB
格
式
:
创建单个的
O
IF
格
式的文件
,
方
便进行移动和进
行其它的操作
.
23
23
如何取图
像格式
.)
24
24
如何取图
(XYL
< br>光谱扫描
)
??
获取光谱图像
(XYL)
???
例
:
绿色荧光
(Alexa Fluor
488)
和
25
25