-
Waters
e2695
高效液相色谱仪操作规程
1
目的
指导和规范
Waters e
2695
高效液相色谱仪的操作。
2
适用范围
该操作规程适用于
Water e
2695
高效液相色谱仪的操作。
3
职责
检验员
应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。
4
操作
4.1
仪器组成和开机
4.1.1
仪器组成
本仪器由
Waters e
2695
分离单元、
Waters
2998
二极管阵列检测器、
Waters ELSD
2424
蒸发光散射检测器、
Empower3
色谱工作站和打印机组成。
Waters e2695
分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输
送系统，四通道在线真空脱气，可
容纳
120
个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘
；
显示器，键盘用户界面。
4.1.2
开机
4.1.2.1
依次接通
Waters
e 2695
分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
4.1.2.2
接通
Waters e
2695
分离单元后，约
20s
仪器开
始自检，约
3mn
内各部件的
初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“
Idle
”时，仪器进入待命状态。
4.2
溶剂管路系统的准备
4.2.1
流动相脱气
确认所有溶剂管路都充满溶剂，按
[Menu
／
Status
】
，进入“
Status(1)
”屏幕，光标选
“
Degasser
”
，按
[Enter
】
。
4.2.2
灌注
当色谱仪流路没有溶剂或系统中有
空气时，需进行干灌注
(DryPrime)
，注入流动相。<
/p>
否则，进行湿灌注
(Wet Prim
e)
以驱除气泡。干灌注：按主机面板上
[Menu
／
Status
】
，进入
“
Status(1)
”显示，按
[Direct
Function
】
，选择“
Dry
Prime
”
，选溶剂通道，如
Ope
n A
，选
“
DurationIIi
按数字键输入
5
分钟，按”
COntinue
”
，
待限定时间结束后，重复操作，使所需
的溶剂通道注满流动相
。
湿灌注：
进入
“
Status(1)
”
显示，
选溶
剂通道，
输入
100
％，
按
[Direct
Function]
，选“
Wet P
rime
”
，按【
OK
】
，根据面板提示设置流速及时间
(
< br>默认流速为
7
．
5ml
／
min
，一般不用更改，时间可设置为
5min)
，按【
0K
】
。
4.3
样品管理系统的准备
4.3.1
冲洗自动进样器
在“
status(1)
”
，屏幕下，光标选“
Composition
”
，输入流动相的组成。按【
Direct
Function]
，
光标选
“
Purge Injecto
r
”
，
按
【<
/p>
Enter]
，
显示
“
Purge Injector
”
屏幕，
输入
“
Sample
Loop Volumes
6
．
0<
/p>
”
，光标下移“
Compression
Check
”
，按任意数字键，按【
O
K]
。
4.3.2
冲洗进样针
在主屏幕下，按【
Diag]
，显示“
Diagnostics
”屏幕，按【
Pr
ime Ndl
Wash
】
，显示“
Prime
Needle Wash
”屏幕，按
[
Start]
，
30s
内应见溶剂从废
液排放口流出。按【
Close
】
、<
/p>
【
Exit
】
。
4.3.3
冲洗柱塞杆密封垫
在主屏幕下，按【
Diag]
，显示”
Diagnostics
”屏幕，按【
Pr
ime Seal
Wash
】
，显示“
Prime
Seal
Wash
”屏幕，按
[Start]
，
30s
内应见溶剂从废液排放口流出。按【
Close
】
、
【
Exit
】
。待
排放口有水流出，按【
Half
】
、
【
Close
】
、
【
Exit
】
。
4.3.4
装入样品与转盘
打开样
品舱门，
显示
屏幕，
< br>将样品盘取出，
把样品瓶插入样品盘后，
装
入样品
盘，按【
Next
】直至所有样品盘装毕，关好舱门。
4.4
色谱柱平衡
换上检
验所需的色谱柱和流动相，进入
”显示，选择流路、设定流速、
柱温，
按
【
Enter
】
开始注入流动相，
通常情
况下约
1 5
～
30
< br>分钟色谱柱可达到平衡，
可以开始进样，
采集数据。
5 Empower
3
软件的应用
5.1
建数据采集方法
5.1.1
双击电脑屏幕上的
快捷图标，出现
Empower
登录界面，输入用户名
和密码。
5.1.2
单击高级键，选择用户类型和
QuickStart
界面。
5.1.3
选择
QuickStart
界面，点击“确定”
，然后选择选定
的操作项目以及色谱系统
(
仅
查看数据可选择色谱系统中的“没有系统”
)
，单击“确定”
。
5.1.4
登录
Empower
的
QuickStarlt
界面。
5.2
编辑仪器方法和方法组（以
e
2695_2998
为例）
。
5.2.1
．采集栏单击“方法组编辑向导”
：
5.2.2
选择“新建”选项。
5.2.3
弹出仪器方法编辑器。
5.2.4
单击“
2695
”
，弹出
2695
编辑界面。
5.2.4.1 Aliance
系
统
(
包括
2695
、
2795
和
2695D)
通用编辑页面中，可选择“单次输送
体积”
，请针对不同的流速选定适当的单次输送体积，以确保最佳的流速精度与准度。
5.2.4.2
查看脱气选项，确认设置正确。
5.2.4.3
流量选项中设置“泵
模式”
、
“总流量”以及流动相配比。
5.2.5
单击
2998
，弹出
2998
编辑界面。
5.2.5.1
3D
数据采集：在通用栏中选择启用
3D
数据，输入检测
波长的范围；
< br>5.2.5.2
采集
2D
数据，
点击“
2D
通道”
，最多可同时采集<
/p>
8
个不同波长的通道的数据。
5.2.6
点击“文件”
，选择“另存为”
：输入仪器方法名称，点击“
保存”
；点击“文件”
，
选择“退出”
。
5.2.7
在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步
(N)
”
。
5.2.8
在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有
合适的方法选择“无处
理”
、
“无报告”
)
，点击下一步。
5.2.9
输入方法组名称，单击“完成”
。
5.3
进样
点击进入“平衡系统／监视基线”界面，选择相应的仪器方法
，点击“平衡／监视器，
在监视窗口监视基线至系统平衡，停
止系统监视状态，点击“进样”
。
5.3.1
．单进样：点击，进入“
定义单进样参数”编辑界面，输入样品名、功能、方法组
等参数，点击“进样”
。
5.3.2
使用向导建立样品组和样品组方法。
5.3.2.1
选择“运行样品”<
/p>
，然后单击“样品队列”
，进入样品列表。
5.3.2.2
单击“新建样品组向导”
，建立样品组。
5.3.2.3
< br>选择创建样品组方法类型为“
Lc
或
PDA
”
，然后点击“定义样品板”
。
5
.3.2.4
在“选择标准进样在那里开始”中选择合适的选项。检查开始加载样品瓶的
位置
是否正确，点击“下一步”
。
5.3.2.5
< br>在描述标样中需要设置一下内容：
样品组中的标样数：
×
；
每瓶标样进样次数：
X
；
进样体积：
x
；运行时间：
XX
；方法组
XXX
；点击“选项”
：输入下一进样延迟时间
X
；点击
下一步。
5.3.2.6
样品数：
X
；每瓶样品进样次数：
X
；进样体积：
X
；运行时间：
X
；方法组
X
；点
击选项：输入下一进样延迟时间
X
；点
击下一步。
5.3.2.7
在识别标准样界面中，输入标样名称，增量后缀使用
1
．在识别样品界面中，输入
样品名称，增量后缀使用
a
。点击下一步。
5.3.2.8
< br>运行模式选项中选择“只测试”
。查看摘要，点击下一步。
【注：弹出组分编辑器，
输入标样中每个组分的名称
(
内标不需要输入含量
)
。可以直接关闭该窗口
，在处理数据的时
候再添加】
。
5.3.2.9
< br>点击完成，在菜单栏中选择文件。
5.3.2.10
为方法组命名并保
存样品组方法。
5.3.2.11
单击“样品队列”
，打开运行样品窗
口，点击运行当前样品组方法键，选择运行。
5.3.2.11
选择需运行的样品
组名称，点击运行。
5.3.2.13
样品组运行过程中，在“正在运行”栏中正在运行以及运
行完毕的样品以红色
显示。
(
注：以向导建立的样品组首行功能一般为清除校正，一般在运行样品前删除该行或
改为“平衡”
。
)
5.4
建立数据处理方法
5.4.1
2D
数据处理方法
5.4.1.1
< br>单击“浏览项目”键，在“样品组”中选择目标样品组。
5.4.1.2
< br>在样品组上点击鼠标右键选择“查看相关→通道”
，样品组在单个通道中显示。<
/p>
5.4.
1.3
选择定最低浓度的标样，点击鼠标右键，选择下拉菜单中的查看，会显示未处
理的色谱图形。
5.4.1.4
< br>点击处理方法向导快捷键，选择创建新处理方法，点击确定。
5.4.1.5
< br>确认处理类型为
LC
，积分方式可选择为传统，再点击使
用处理方法向导，选择
确定。
5.4.1.6
< br>常按鼠标左键，选择色谱图上最窄峰。
(
注：在色谱图区
域方可以放大某个需
要监测的峰。点击鼠标右键全视图可以还原色谱图。
)
5.4.1.7
< br>在色谱图的积分界面选择一段典型基线作为积分的阈值，点击下一步。
5.4.1.8
< br>常按鼠标左键，在基线上选取积分的起止时间点。
5.4.1.9
建议选择最小峰高，
选择所要积分的高度最小峰
(
或键入相应数值
< br>)
。小于此
峰高
90
％的峰将不被积分。点击下一步。
5.4.1.10
定量方法选择面积，组分信息选择含量，校正类型选择线性。点击下一步。
5.4.1.11
跨通道内标样界面点击否。
5.4.1.12
因为选择的是标样
，点击峰
1
可以看到一个下拉菜单选择相应的组分名称或
者键入运行样品相应的名称。添加组分名称相匹配的标准含量，然后
点击下一步。
< br>5.4.1.13
如果是多点校正样品，跳过添加含量的窗口直接点击下一步。<
/p>
(
单点校正可在
这里添加含量
)
。
5.4.1.14
选择外标法：
5.4.1.15
选择单一内标样，需要在下拉菜单中选择或键入内标相应的名称，然后点击
下一步。
5.4.1.16
选择多重内标需要输入所有内标的名称。
5.4.1
.17
为处理方法命名，点击完成。色谱图界面会显示该处理方法应用后的色谱结
果，包括积分。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
上一篇：工程造价咨询服务方案94275
下一篇：写好英语作文三步走