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流式细胞技术应用新进展
2006
年
9
月
27
日
杭州
多色分析荧光素首选
----Alexa Fluor
荧光染料
亮度
(Brightness) ---
高
光稳定性
(Photostability) ---
强
pH ---
不敏感
早期凋亡检测
--- Annexin V/PI
早期凋亡检测
--- Annexin V/PI
存在的问题
贴壁细胞–胰酶消化破坏
Annexin
V
结合位点
需高钙离子的结合缓冲液
需洗涤步骤
解决的方法
YO-PRO-1/PI
特别适合贴壁细胞检测–与
Annexin
V/PI
检测相关性极
无需特殊的结合缓冲液
无洗涤步骤
DNA
含量分析新宠
DyeCycle
——标本直接染色！
30
分钟即可上机检测！
生产商
膜通透性
细胞毒
激光器
检测通道
操作
价格
Vybrant DyeCycle
DRAQ5
Molecular Probes
Biostatus
通透，染色活细胞
通透
无毒性，可分选、再培养
毒性大
488nm
633/635nm
FL1
或
FL2
FL3(FC500)
，
FL4(BD)
简单、快速
适中
简单、快速
昂贵
PI(
碘化丙啶
)
多家
不通透
细胞已死亡
488nm
FL2
和
FL3
需固定，复杂，耗时
长
便宜或适中
活细胞
< br>/
死亡细胞鉴别——
SYTOX
替代
PI
，用于多色分析！
LIVE/DEAD
SYTOX
Fixable Dead Cell
Stain Kits
Molecular Probes
Molecular
PI(
碘化丙啶
)
7-AAD
生产商
多家
多家
染色后
固定
生物危
害性
检测通
道
激光器
可以，能延迟分析
无
FL1
或
FL3
Probes
不能
有
不能
有
不能
有
FL3(FC500)
，
FL4(BD)
633nm
UV,
405nm
或
488nm
存在的
问题
FL2
和
FL3
FL1,FL2,
FL3(FC500)
，
FL4(BD)
405nm, 488nm,
488nm
532nm
或
633nm
多通道检测
,
不
适合多色分析
分群不好
CFSE
细胞示踪技术
原理：
CFSE
存留于细胞整个发育和有丝分裂过程中，可用于体内
(in
vivo)
和体外
(in
vitro)
的细胞示踪。
特点：
目前应用范围最广的细胞示踪试剂
为流式细胞术检测调试
示踪时间长：
标记有
CFSE
的淋巴细胞注射入小鼠后，
8
周之内均可检测到
CFSE[1]
；
< br>
小鼠活的肝细胞标记
CFSE
，肝内移植
20
天后仍可检测到
CFS
E[2]
[1] J Immnol Methods. 1990,
133: 87
[2 ] Transplant Proc. 1992, 24:
2820
细胞增殖研究
CFSE Cell
Proliferation Kit
细胞分裂次数
多参数分析
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同时标记其它表面或内部分子，
以分析各细胞分裂相抗原的表
达情况。
Ca2+
测定
产品名称
激发波长
(nm)
发射波长
(nm)
Ca2+
升高
时的发射
变化
比率改变
备
注
Ratiometric dyes
（比率法测定染料）
UV
401/475
Indo-1
<
/p>
经典的
Ca2+
染料，
< br>需
UV
激发