电泳拖尾原因

电泳出现拖尾现象，英文成为

smear

，就是 弥散。其原因，主要从以下两个方面考虑：

1

、

PCR

产物自身原因：

往往由于酶量过多或 酶的质量差，

dNTP

浓度过高，

Mg 2+

浓度过高，退火温度过低，循环次

数过多，而造成

PCR

的非特异性产物过多。

对策：①减少

Taq

酶的量，或调换另一来源的酶。② 减少

dNTP

的浓度。③适当降低

Mg 2+

浓

度。④增加模板量，减少引物的用量，减少循环次数，提 高退火温度。

2

、电泳体系的问题：

（

1

）电泳缓冲液

TAE< /p>

或者

TBE

的污染，建议更换缓冲液。< /p>

（

2

）上样时样品漂了，建议增加

上样缓冲液的用量，以及小心加样。（

3

）电 压太高。（

4

）适当把你的胶的浓度加大。（根

据你的片断大小而定）（

5

）观察你的

marker

是否也存在拖尾现象，作为对照。

PCR

拖尾及假阳性的原因及对策

拖尾

< /p>

现象：产物在凝胶上呈

Smear

状态。

原因：

1.

模板不纯

不合适

3.

退火温度偏低

4.

酶量过多

、

Mg2+

浓度偏高

6.

循环次数过多

对策：

1.

纯化模板

2.

更换

Buffer

3.

适当提高退火温度

4.

适量用酶

5.

适当 降低

dNTP

和镁离子的浓度

6.

减少循环次数

假阳性

现象：空白对照出现目的扩增产物

原因：