-
区别：参考区间和
cutoff
值
cutoff
即临界值
，是判断检测结果的标准
。检测标本吸光度（
OD
值）
≥cutoff
即判为阳性，
<
br> <
br>s/co <
br>的设置因试剂厂家不同， 亦为定值。 <
br>血清 <
br>：
第一 <
br>
起到重要作用。 胶冻
<
br>如凝血酶原变
<
br>。
判为阴性。
现在一般用
，
≥1
为阳性，
<1
为阴性。
cutoff
方法不同而设置不同，
试剂说明
书都会有
cutoff
的设置。
厂家<
/p>
cutoff
的设置是经过检测大量
的标
本（包括正常人、病人）
，通过统计学分析来设置的。由于国产试剂的质量尚需提高，<
/p>
某些实验的阴性对照经常成为定值（因为阴性对照
<0.05
按
0.05
计算，
cutoff
＝
0.05×
某个常
数或阴性对照＋某个常数，如
HBsAg
的
cutoff
＝
2.1×0.05
）
，造成
cutoff
参考区间：
解释检验结果是正常还是异常的依据
区别血清和血浆
，
指
血液凝固后，
在血浆中
除去
纤维蛋白
分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除
去的
血浆
。
其主要作用是提供基本
营养物质
、
提供
激素
和各种生长
因子
、提供结合蛋白、提
供促接触和伸展因
子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用
血清的主要成分
血清是由血浆去除
纤维
蛋白原
而形成的一种很复杂的
混合物
，其组
成
成份虽大部分已知，
但还有一部分尚不清楚，
且血清组成及含量
常随供血动物的
性别
、
年
龄
、
生理
条件和营养条件不
同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体
,
具有维持血
液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成
,
这些化学成分包
括白蛋白、
α1
、
α2
、
β
、
γ
-
球蛋
白
,
甘油三酯
,
总胆固醇
,
谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆
蛋白
、
多肽
、
脂肪
、
碳水化合物
、
生长因子
、
激素
、<
/p>
无机物
等，这些物质对促进细胞生长或
抑
制生长活性是达到生理平衡的。
对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，
但仍存在一些
问题。主要是：
:
血清的成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份
、含量及其作用机制仍不清
楚，
尤其是对其中一些多肽类生长因
子、
激素和脂类等尚未充分认识，
这给研究工作带来许
多困难；
第二
:
血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要
保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制；
第三
:
不能排除血清中含有易变物质，
这被认为是
“
瓶中恶化
”
的原因之一。
主要作用
●
提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生<
/p>
长必须的物质。
1
●
提供激素和各种生长因子：胰岛素
、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类
固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。
生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血
小板生长因子等。
●
提供结合蛋白：
结合蛋白作
用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、
脂
肪、以
及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。
●
提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。
●
对培养中的细胞起到某些保护作用：
有一些细胞，
如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放
蛋白酶，血清中
含有抗蛋白酶成分，
起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的
的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。
因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细
胞的消化传代。
血清蛋白形成了血清的粘度，
可以保护细胞免受
机械损伤，
特别是在悬浮培养搅拌时，
粘度
血清还含有一些微量元素和离子，
他们在代
谢解毒中起重要作用，
如
SeO3,
硒
等
鉴别方法
血清
血液
凝
固析出的淡黄色透明液体。
如将血液自血管内抽出，
放入试管中
，
不加
抗凝剂
，
则凝血反应被激活，
血液迅速凝固，
形成
。凝血块收缩，
其周围所析出之淡黄色透明液
体即为血清，也可于凝血后经离心取得。
在凝血过程中，
纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所
以血清中无
纤维蛋白
原
，
这一点是与血浆最大的区别。
而在
凝血反应中，
血小板释放出许多
物质，
各凝血因子也都发生了变化。
这些成分都留在血清中并继续发生变化，
成凝血酶，
并随血清存放时间逐渐减少以至
消失。
这些也都是与血浆区别之处。
但大量未参
加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，
都以血清为样品。
血浆
相当于
结缔组织的细胞间质。
是血液的
重要组成分，
呈淡黄色液体
（因含有胆红素）
血浆的化学成分中，水分占
90
～
92
％，溶质以血浆蛋白为主
<
/p>
血浆是血液的液体成分，
血细胞
悬浊于其
中。人体含有
2750-3300
毫升血浆，约占血
液总体积的
55%
。
血浆
的绝大部分是水
（体积的
90%
）
，
其中溶解的物质主要是血浆蛋白，
还包括
葡萄糖、无机盐
离子
、激素以及二氧化碳。
血浆的主要功能是运载血细胞，同时也
是运输分泌产物的主要媒介。
2
血液成分（加入抗凝剂）
将新鲜血液
离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血
清中不含纤维蛋
白原等凝血因子。
血浆是由抗凝的血液中分离出来的液体，
其中含有纤维蛋白原，
若向血浆中加入
Ca
2+
，
血浆会发生再凝固，因此血浆中不含游离的
< br>Ca
2+
。血清是由凝固的血中分离出来的液体，
其中已无纤维蛋白原，但含有游离的
Ca<
/p>
2+
若向其中再加入
< br>Ca
2+
，血清也不会再凝固。此
，
外，血浆与血清的另一个区别是：血清中少了很多的凝血因子，以及多了很多的凝血
产物。
常见问题
保存方法
血清应保存在
-5
℃至
-2
℃。然而，若
存放于
4
℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用
完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。
如何解冻血清才不会使产品质量受损？
将血清从冷冻箱取出后，
先置于
2-8C
冰箱使之溶解，
然后在室温下使之全溶。
但必须
注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
避免产生沉淀物
1
< br>、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法
(-2
℃至<
/p>
4
℃至室温
)
，
若血清解冻时改变
的温度太大
(
如
-20
℃至
37
℃
，实验显示非常容易产生沉淀物。
2
、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生
3
、请勿将血清置于
37
℃太久。若在
37
℃放置太久，血清会变得混浊，
同时血清中许
多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。
4
、
血清的热灭
活
非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
3
5
、若
必须做血清的热灭活，请遵守
56
℃，
30
分钟的原则
，并且随时摇晃均匀。
温度
过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出
现，该如何处理
?
欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离
心管内，以
400g
稍
微离心，
上清液即可接着加入培养基内一起过滤。
但不建议以过滤的方法去除这
些絮状沉淀
物，因为它可能会阻塞过滤膜。
何谓热灭活
?
一般是以
56
℃，
30
分钟来处理已
解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，
而补体所参与的反应有
:
溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强
吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
有必要做热灭活吗
?
实验显示，经过
正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理
过的血清对细胞的生
长只有微小的促进，
或完全没有任何作用，
甚至通常因为高温处
理影响
了血清的质量，
而造成细胞生长速率的降低。
而经过热处理的血清，
沉淀物的形成会显著的
增多
，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是
小黑点
，常常会让研究者误以为是血清遭
< br>受污染，而把血清放在
37C
环境中，又会使此沉淀物更
增多，使研究者误认为是微生物的
分裂扩增。
购买的时候注意询问厂家是否是已灭活血清。
保存注意事项
血清的保存应该注意以下几点：
<
/p>
(1)
需要长期保存的血清必须储存于
-
20
℃
-
70
℃
低温冰箱中
< br>.4
℃冰箱中保存时间切勿
超过
1
个月
.
由于血清结冰时体积会增加约
10%,
因此
,
血清在冻入低温冰箱前
,
必须预留一定
体积空间
,
否则易发生污染或玻璃瓶冻裂
.
(2)
热灭活是指
56
℃
, 30
分钟加热已完全解冻的血清
.
加热过程中须规则摇晃均匀
.
此热
处理的目的是使血清中的补体成分
(compl
ement)
灭活
.
除非必须
,
一般不建议作此热处理
,
因
为热处理会造成血清沉淀物显著增多
,
< br>而且还会影响血清的质量
.
补体参与反应有
:
细胞毒作
用
,
平滑肌细胞收缩
,
肥大细胞和血小板释放组胺
,
增强吞噬作用
,
促进淋巴细胞和巨噬
细
胞发生化学趋化和活化
.
(3)<
/p>
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法
:-20
℃
至
-70
℃
低
温冰箱中的血清放入
4
℃冰箱
中溶解<
/p>
1
天
.
然后移入
室温
,
待全部溶解后再分装
.
在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀
(
小心勿
造成气泡
),
使温度与成分均一
,
减少沉淀的发生
.
切勿
直接将血清从
-20
℃进入
37
℃解冻
,
这样
因温度
改变太大
,
容易造成蛋白质凝集而出现沉淀
.
4
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