subdivision-右手无名指
大鼠行为学实验评价汇总
大鼠行为学评定方法比较
大鼠进行行为学评定
(behavior test)
的十分重要,
对其评定的方法也颇多,
但究竟那
种方法更
适用,目前未有人进行过比较。为了合理选择
MCAO
后的评定方法,如下对目前常用的几
种行为学评定方法进行比较
。
行为学检查方法
:
由
3
位参加试验的人员分别以单盲法对试验的大鼠进行
打分和记录
.
然后将
3
组的记分结果进行平均后的得分进行统计计算。
(国内)
由一个对试验实施过程不了解的观察者对大鼠进行行为学评测。
评测续贯进行。
如果大鼠在
一次评测中出现恰当的行为,而
以后却未出现,按前者记分。
(
国外
)
1.
神经行为学检查
Longa
评分法
< br>2
.
Berderson
评分法
姿势反射测验(
postural
reflex test
)
3.
攀绳实验
4
.网屏测验(
screen
test
)
5
.肢体放置测验(
limb-
placement test
)
Elicited
Forelimb Placing
6
.开野试验(
Open
-
Field
法)测定行为
7
.
MNSS
8.
转动杆测验(
rotating
pole test
)
9
.
Rotation
10
.肢体对称试验评分法
11. rotarod test
12.
adhesive-removal somatosensory test
13
.
Spontaneous
Activity
14
.
Symmetry in
the Movement of Four Limbs
15
.
Forepaw
Outstretching
16
.
Climbing
17
.
Body
Proprioception
18. Response to
Vibrissae Touch
改善记忆作用
1.
跳台试验
2.
避暗试验
3.
穿梭箱试验
4.
水迷宫试验
Motor behavior
(1) observation of spontaneous
ipsilateral circling,
(2) contralateral
hindlimb retraction,
(3) beam walking
ability,
平衡木测验(
balance beam
test
)
(4)
bilateral forepaw grasp,
Skilled
forelimb function
(1)staircase feeding
apparatus
nociception
(1)
plantar test
1
.神经行为学检查
:
Longa
评分法
< br>神经学检查分
5
个等级:
0
分:正常,无神经功能缺损;
p>
1
分:左侧前爪不能完全伸展,轻度神经功能缺损;
2
分:行走时,大鼠向左侧(瘫痪侧)转圈,中度神
经功能缺损;
3
分:行走时,大鼠身
体向左侧(瘫痪侧)倾倒。重度神经功能缺损;
4
分:不能自发行走,有意识丧失。
2
.
Berderson
评分法
姿势反射测验(
postural reflex
test
)
提
尾悬空试验
大鼠提尾悬空一米,
观察前肢屈曲情况。
正常大鼠向地面伸展
双上肢。
可伸展双上肢向地面
并无其它神经缺陷大鼠得
0
分。
梗死后大鼠持续屈曲损伤半球对测患肢;
各种不同姿势,
从
轻度腕屈曲、肩内收
、肘伸展到严重姿势,完全腕、肘屈曲,肩内旋转并内收。有任何持续
前肢屈曲和其它不
正常得
1
分。
大鼠被放于大的软垫子上
,
表面有大鼠可用爪子牢牢抓住的
塑料压膜纸。
用手抓其尾巴,
缓慢在鼠肩后给予侧压直至前肢滑动几英寸。
< br>此手法在每个方
向重复几次。
正常或轻度功能损伤大鼠两
侧抵抗滑动力相同。
严重功能损伤大鼠瘫痪侧始终
抵抗力下降,
得
2
分。然后让大鼠自由活动,观察转圈行为。大鼠持续向瘫痪
侧转圈得
3
分。
前肢屈曲带有侧推抵抗
力下降经常见到;
双上肢屈曲并侧推抵抗力下降大鼠经常有转圈
行为。神经检查在
3
-
5
分钟内完成。
正常
0
分
未见行为缺陷
中度
1
分
前肢屈曲
(
即提尾悬空实验阳性
)
重度
2
分
侧推抵抗力下降
(
即侧向推力实验阳性
).
伴前肢屈曲
.
无转圈行为
3
分
同
2
级行为
.
伴自发性旋转。
提起鼠尾
.
使其离地
0.
33 m
高
.
观察前肢情况。正常大鼠两前肢对称向前伸开
;
如果有肩部内
旋、前肢内收现象发生者
.
根据其严重程度
.
最
高评分为
4
分
.
正常评分为
0
分。将动物置于平
滑地
板上
.
分别推其左、右肩向对侧移动,此时检查动物抵抗推动时
的阻力,正常大鼠两侧
推动的阻力明显对称。
如一侧阻力下降者
.
可根据下降程度评
1
-
3
分
.
正常评分为
0
分。
观察
两前肢肌力。将动物两前肢置于一金属网上
.
然后
轻提起大鼠
.
检查两前肢肌力。正常左右对
称
.
如有一侧前肢肌力下降者
.<
/p>
根据下降程度评为
1
-
< br>3
分
.
正常评分为
0
分。根据上述行为检
查的情况
.
积分值为
0
一
< br>10
分。积分越高说明动物行为障碍越严重。
此测验对皮层和纹状体的损伤较敏感。
3
攀绳实验
:
本实验主要检查大鼠双前肢和双后肢的协调配合能力。取直径
1. 5
cm
的麻绳从高
1 m
、长
和宽分别为
15
、
50
cm
的平台上垂下,
手术前
1d
训练每只大鼠
.
使之能够爬到绳子的上
1/ 3
。
每个测试日测试
< br>3
次。评分的标准如下
:0
分<
/p>
.
不需任何刺激在
10s
内爬上平台
;1
分
.
不需任何
刺激在
15 s
内爬上平台
;2
分
.
刺激次数小于
5
次
.
在
30 s
内爬上平台
;3
分
.
刺激次数小于
5
次
.
在
60
s
内爬上平台
;4
分
.
刺激次数大于
5<
/p>
次
.
在
60 <
/p>
s
内爬上平台或是刺激小于
5
次
.
但爬上平
台时间超过
60 s; 5
分
.
< br>大鼠不能爬上平台。
4
.网屏测验(
screen
test
)
网屏训练
:
网屏为
50cm X 40cm
网带
.
网眼为
lcm X lcm
.
网板的左右和上方都用
25cm
高的
木
板框边
.
网屏距地面高度为
80cm.
下方铺以
12cm
< br>厚的海绵。
先将网屏水平放置
.
将老鼠放在其
上
.
然后缓缓地将其一端
抬高
.
在
2s
内将此屏风变成垂直位
.
保持
5s.<
/p>
观察大鼠是否会从网屏上
下来或用前爪抓握住网屏,从而评价前爪
抓握能力及肌力情况。
网屏实验
:<
/p>
评分标准分为
4
个等级。
0
分
:
前爪握住网屏达
5s
之久,
不会掉下来
;1
分
:
暂时握住
< br>网屏,滑落一段距离,但没有掉下来
;2
分
:
在
5s
内掉下来
;3
分
:
网屏转动时,
鼠即刻掉下来。
5
.
肢体放置测验
(
limb-placement
test
)
Elicited
Forelimb
Placing
肢体放置于三种独立刺激(视觉、触觉、本体感觉)以评测运动感觉完整性。参照Kawa
mata等
[2]
采用的动物行为测试评分方法。
具体实验有
:
前肢放置实验
,
包括
(1)
视觉亚实验
,
即前方刺激
———
实验
者将动物握于手中
,
使其前爪悬空
,<
/p>
自桌面上方
10
cm处向桌面缓慢
斜线靠近
(
此时桌子位于大鼠前方
),
大鼠正常反应为前肢即刻抓向桌面
,
损伤大鼠则表现为肢
体反应延迟。
0
分
———
动物肢体放置反应正常
< br>;1
分
———
反应延迟但不超过
2
s
;2
分<
/p>
———
反应延迟且超过
2
s。侧方刺激
,
此时桌子位于动物侧方
,
其余实验方法及评分标准同
前方刺激。
(2)
触觉亚实验
,
将动物
置于桶状凹陷实验器内
,
使其前爪悬空
,
此时大鼠应该既看不
见
,
也不能用胡须触及桌面
,
用其前爪背侧轻触桌面<
/p>
,
刺激深度仅达皮肤和毛发
,
动物反应及评
分同视觉亚实验
,
< br>触觉刺激同样分前方及侧方刺激。
(3)
本体觉亚实验<
/p>
,
操作及评分同触觉亚实
验
,
仅刺激深度不同
,
本体觉
亚实验给予前爪较大压力
,
刺激深达肌肉及关节。
该亚实验只有前
方刺激。动物前肢放置实验总分范围为
0
~
10
分
,
功能损伤越重
,
得分越高。
6
.开野试验(
Op
en
-
Field
法)测定行为
方法:本实验所用敞箱为正方形
,
长、宽各
80cm,
高
40cm,
底面由面积相等边长
16cm
的正方
形
25
块组成
,
以动物穿越底面的块数为水平活动
(crossin
g)
得分
,
以直立次数为垂直活动
p>
(rearing)
得分
,
每只动物共进行
7
次测定
,<
/p>
每次
3min
Open2Field<
/p>
法是测定抑郁症大鼠行为学的经典方法
,
分水平运动和垂直运动
2
个观察面
,<
/p>
以观
察得分为评分计算单位,记各组大鼠的水平运动评分及垂直运
动评分。
Elevated open field
activity is characteristic of hippocampally
damaged animals19 20 21 22 and
has been
observed in animals with striatal/cortical damage
as well.23 Rats are placed in a novel
environment
(3x3
ft)
with
3-inch-
square
grid
markings
on
the
base.
The
number
of
times
a
rat
crosses a grid line is recorded for a
5-minute period.
7
.肢体对称试验评分法
将大鼠置于网中,
网眼大小为
2.3
x2.3cm,
当大鼠在网络中行走时,
计数在
2
分钟内其前爪漏
到网眼中的次数。计算公式为:
p>
(脑病变对侧前爪的错步数-病变同侧前爪的错步数)
/
总步
数。其分值如为正数表明脑病变对侧功能缺损;如为负数表明脑病变同
侧功能缺损。
8
.
mNSS
mNSS
体系的设计原理
,
评分越低
表示功能越健全,
0
分表示功能完全健全的大鼠。
modified Neurological Severity
Scores
见附件
1
9.
转动杆测验(
rotating
pole test
)
转棒上行走测
评
:
评分标准分为
4
< br>个等级。
0
分
:
转动过程中
.
鼠可在棒上行走
;1
分
:
转动过程
中
.60s
以上时间
.
鼠不会掉下来
;2
分
:<
/p>
转动开始后
.
鼠从棒上掉下来
;3
分
:
转动开始前
p>
.
鼠从棒上
掉下来。
10
.
The
detection was operated at 1 week after surgery by
injecting 0. 5 mg/kg of apomorphine
into
abdominal
cavity
for
observation
of
the
changes
in
The
behaviours
for
once
a
week
and
continuous detected for 6 weeks. If
constant right-side rotation occurred and The
numbers of The
circles
rotated
were
more
than
210
r
per
30
minutes,
those
rats
were
considered
as
successful
models: if no
rotation occurred or The direction of rotation was
not constant or constant right-side
or
lell-side
rotation
but
The
speed
was
slower
than
210
r
per
30
minutes,
those
animals
were
considered
as
unsuccessful
models.
In
additional
to
rotation,
other
companioned
abnormal
behaviours also should be observed,
such as, tremor, sluggish, grab, and smell
exploring, etc.
11. rotarod test
rats
were
placed
on
an
accelerating
rotarod
cylinder,
and
the
time
the
animals
remained
on
the
rotarod was measured. The speed was
slowly increased from 4 to 40 rpm within 5
minutes. A trial
ended
if
the
animal
fell
off
the
rungs
or
gripped
the
device
and
spun
around
for
2
consecutive
revolutions
without
attempting
to
walk
on
the
rungs.
The
animals
were
trained
3
days
before
MCAO. The mean
duration (in seconds) on the device was recorded
with 3 rotarod measurements
1 day
before surgery. Motor test data are presented as
percentage of mean duration (3 trials) on the
rotarod compared with the internal
baseline control (before surgery).
12.
adhesive-removal somatosensory test
somatosensory deficit was measured both
before and after surgery. All rats were
familiarized with
the testing
environment. In the initial test, 2 small pieces
of adhesive-backed paper dots (of equal
size, 113.1 mm2) were used as bilateral
tactile stimuli occupying the distal-radial region
on the
wrist of each forelimb. The rat
was then returned to its cage. The time to remove
each stimulus
from
forelimbs
was
recorded
on
5
trials
per
day.
Individual
trials
were
separated
by
at
least
5
minutes.
Before surgery, the animals were trained for 3
days. Once the rats were able to remove
the dots within 10 seconds, they were
subjected to MCAO.
13
.
Spontaneous
Activity
The animal was observed for 5
minutes in its normal environment (cage). The
rat's activity was
assessed by its
ability to approach all four walls of the cage.
Scores indicate the following: 3, rat
moved
around,
explored
the
environment,
and
approached
at
least
three
walls
of
the
cage;
2,
slightly affected rat
moved about in the cage but did not approach all
sides and hesitated to move,
although
it eventually reached at least one upper rim of
the cage; 1, severely affected rat did not
rise up at all and barely moved in the
cage; and 0, rat did not move at all.
14
.
Symmetry in
the Movement of Four Limbs
The rat was
held in the air by the tail to observe symmetry in
the movement of the four limbs.
Scores
indicate
the
following:
3,
all
four
limbs
extended
symmetrically;
2,
limbs
on
left
side
extended
less
or
more
slowly
than
those
on
the
right;
1,
limbs
on
left
side
showed
minimal
movement; and 0, forelimb on left side
did not move at all.
Julio
H.
Garcia,
MD;
Simone
Wagner,
MD;
Kai-Feng
Liu,
MD;
Xiao-jiang
Hu,
MD,
PhD
。
Neurological
Deficit
and
Extent
of
Neuronal
Necrosis
Attributable
to
Middle
Cerebral
Artery
Occlusion in
Rats
。
Stroke.
1995;26:627-635
。
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
subdivision-右手无名指
-
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