-
第一篇：
JM109
，
DH5a
，
BL21
这些感受态有何区
别
1
：
DH
5a
菌株
DH5a
< br>是一种常用于质粒克隆的菌株。
DH5a
在使用
pUC
系列质粒载体转化
时，
可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴
别重组菌株。
基因型：
F-
，φ
80dlacZ
Δ
M15
，Δ
(lacZYA-argF)U169
，
d
eoR
，
recA1
，
endA1
，
hsdR17(rk-
< br>，
mk+)
，
phoA
，
supE44
，λ
-
，
thi-1
，
gyrA96
，
relA1
2
：
BL21(DE3)
菌株
该菌
株用于高效表达克隆于含有噬菌体
T7
启动子的表达载体（如<
/p>
pET
系列）的
基因。
< br>T7
噬菌体
RNA
聚合酶位于λ
噬菌体
DE3
区，该区整合于
BL21
的染色体
上
。该菌适合表达非毒性蛋白。
基因
型：
F-
，
ompT
< br>，
hsdS
（
rBB-mB<
/p>
－）
，
gal
，
dcm
（
DE3
）
3
：
BL21(DE3)
pLysS
菌株
< br>该菌株含有质粒
pLysS
，
因
此具有氯霉素抗性。
PLysS
含有表达
T7
溶菌酶的基因，
能够降低目的基因的背景表达水平，
但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒
性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：<
/p>
F-
，
ompT
hsdS
（
rBB-mB
－）
，
gal
，
dcm<
/p>
（
DE3
，
pL
ysS
，
Camr
4
：
JM109
菌株
该菌株在使用
p
UC
系列质粒载体进行
DNA
转化或用
M13 phage
载体进行转染时，
由于载体
DNA
产生的
LacZa
多肽和
JM09
编码的
LacZ
Δ
M15
进行α－互补，
从而
显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株
基因型：
recA1
，
endA1
，
gyrA96
，
thi
－
1
，
hsdR17
，
supE44
，
relA1
，Δ（
lac
－
proAB
< br>）
/F
’
[traD36
，
proAB+
，
l
acIq
，
lacZ
Δ
M15]
5
：
TOP10
菌株
该菌株适用于高效的
DNA
克隆和质粒扩增
，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：
F-
，
mcrA
Δ
(mrr-hsd RMS-
mcrBC)
，
φ
80
，
l
acZ
Δ
M15
，△
< br>lac
Ⅹ
74
，
recA1
，
ara
Δ
139
Δ
(ar
a-leu)7697
，
galU
，
galK
，
rps
，
(Strr)
endA1
，
nupG
6
：
HB101
菌株
该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验
基因型：
supE44
，
hsdS20
（
rB-m
B
－）
，
recA13
，
ara
－
14
，
proA2
，
lacY1
，
galK2
，
rpsL20
，
xyl-5
，
mtl-1
，
leuB6
，
thi-1
第二篇：
JM110
或
SCS110
大多数大肠杆菌菌株中含有
Dam
甲基化酶和
Dcm
甲基化酶，前者可以在
GATC
序
列中腺嘌呤
N-6
位上引入甲基，后者在
CCA/TGC
序列的第一个胞嘧啶
C-5
位置
上引入甲基。
常用的菌株都会产生
dam,dcm
，从而受到甲
基化的影响
.
部分限制性内切酶对
甲基化的
DNA
不能切割，
如
FbaI
和
MboI
等
，
一般生物公司
提供的内切酶说明中均有说明。
大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影
响，如
XbaI, BclI
等。而且
甲基化只发生在特定序列，以
XbaI
为例，只有在位点序列旁
出现
GA
或
TC
，该
XbaI
位才会被甲基化。
而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：
（
1
）选用上述酶的同功酶，如
Sau3AI
，
DNA
识别切割位点
与
MboI
相同；但不受
甲基化影响；
（
2
）利用甲基化酶缺失的受体细胞进行
DNA
的制备，如
JM110
和链霉菌
等，
前者
Dam
和
Dcm
甲基化酶已敲出，
而后者细胞内
本就没有甲基化酶，
从这些
细胞中抽提的
DNA
就能被上述酶切割。
JM110
要排除
dam,dcm
甲基化的影响，需要用特定的
dam-,dcm-
的菌株，如
JM110
如果由
JM110
或
SCS110<
/p>
等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化
.
第三篇：各种感受态细胞的区别
用途
特征
Xl1-Blue
菌株
基因型：
endA1
gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44
F
‘
[Tn10 proAB+
lacIq
Δ
(lacZ)M15]
hsdR17(rK- mK+)
。
特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。
用途：分子克隆和质粒提取。
BL21(DE3)
菌株
基因型：
F
–
ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-)
λ
(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene
1 ind1 sam7
nin5])
。
特点：
该菌株用于以
T7
RNA
聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。
T7
噬菌体
RNA
聚合酶基因
的表达受控于λ噬菌体
DE3
区的
la
cUV5
启动子，
该区
整合于
BL21
的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。
< br>
用途：蛋白质表达。
BL21(DE3)ply
菌株
基因型：
F- ompT gal
dcm lon hsdSB(rB- mB-)
λ
(DE3)
pLysS(cmR)
。
特点：该菌
株带有
pLysS
，具有氯霉素抗性。此质粒还有表达
T7
溶菌酶的基因，
T7
溶菌酶能够降低目的基
因的背景表达水平，
但不干扰
IPTG
诱导的表达。
适合于毒性蛋白和非毒性蛋白
的表达。
用途：蛋白质表达
DH5
α菌株
基因型：
F- endA1
glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG
< br>Φ
80dlacZ
Δ
M15
Δ
(lacZYA-argF)U169,
hsdR17(rK-,
λ–
特点
：一种常用于质粒克隆的菌株。其Φ
80dlacZ
Δ
M15
基因的表达产物与
pUC
载体编码的β
-
半乳糖苷酶氨基端实现α互补，可用于
蓝白斑筛选。
recA1
和
endA1
的突变有利于克隆
DNA
的稳定和高纯度质粒
DNA
的提取。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
JM109
菌株
基因型：
endA1 glnV44
thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+
Δ
(lac-proA e14-
[F
‘
traD36 proAB+ lacIq
lacZ
Δ
M15]hsdR17(rK-
mK+)
。
特点：
< br>部分抗性缺陷，
适合重复基因表达
,
< br>可用于
M13
克隆序列测定和蓝白斑筛
< br>选。
用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。
第四篇：
Electro-Cells
Electro-Cell JM109
制品名
TaKaRa Code
包装量
价格
(
人民币元
)
Electro-
Cell JM109 D9022 1 Set (50
μ
l
×
10
支
)
300
■
Genotype
JM109
recA1, endA1, gyrA96, thi-1,
hsdR17, supE44, relA1,
Δ
(la
c-
proA/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ
ΔM15]
■
细胞浓度
1
～
2
×
1010 Bacteria/ml
■
保存
-80
℃
■制品说明
用高电压脉冲电流瞬间
击穿大肠杆菌，
从而导致
DNA
转入大
肠杆菌内的转化方法
称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一，比
Ca2+
处理
的感受态细胞的转化效率
高，在转化少量
DNA
时，特别能发挥其特有的威力。
TaKaRa
使用独自开发的菌体培养法，
制作出了效果极佳的
Electro-Cell
JM109
。
■细胞种类
α
-
互补性选择宿主
JM109
JM109
在使用
pUC
系列质粒载体进行
DNA
转化或用
M13
phage
载体进行
转染时
,
由于载体
DNA
产生的
LacZ
α多肽和
JM109
F'
编码的
lacZ
Δ
M15
的结合，
显示β
-
半乳糖苷酶活性
(
α
-
互补性
)
。利用这一特性，可以很容
易鉴别重组体
菌株。因为具有
F'
质粒
，除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外，也可作为
M13
载
体
DNA
的宿主，调制单链
DNA
。
■质量标准
使用
10 pg
的质粒
DNA
进行转化时：
50
μ
l JM109 Electro-Cell/10 pg
pUC19
plasmid
转化时产生的菌落
数
>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid
F'
质粒的稳定性检测
对
JM109
使用
pUC19
DNA
进行电穿孔法转化后，在含有
100
< br>μ
g/ml
的
Ampicill
in
、
0.2
mM
的
IPTG, 40
μ
g/ml
的
X-Gal
的
L-
琼脂平板培养基上，产
生的白色
菌落在
1%
以下。
50
μ
l
的
JM109 Electro-Cell
在含有
100
μ
g/ml
的
Amp
icillin
L-
琼
脂平板培养基上不产生菌落。
--------------------------------
BL21
（
DE3
）
pLysS
细菌菌株
BL21
（
DE3
）
pLysS
细菌菌株可以表达
T7
控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。
< br>BL21
（
DE3
）
pLysS
对λ
DE3
（
1
）是溶源性的。λ
DE3
含有
T7
噬菌体基因
I<
/p>
，编
码的
T7
RNA
聚合酶受
lac UV5
启动子
的控制。
BL21
（
DE3
）
pLysS
含有
pLy
sS
质
粒，他携带编码
T7
溶菌酶基因。在
T7
启动子控制下，
T7
溶菌酶降低靶基因的
背景表达但并不干扰由
IPTG
诱导的表达水平。
包装：
P9811 500μl
/tbs/tb095/
第五篇
：
JM109
，
DH5a
，
BL21
感受态有何区别
1
：
DH5a
菌株
DH5a
是一种常用于质粒克隆
的菌株。
DH5a
在使用
pUC
系列质粒载体转化
时，
可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。
可用于蓝白斑筛选鉴
别重组菌株。
基因
型：
F-
，φ
80dlacZ
Δ
M15
，Δ
(lac
ZYA-argF)U169
，
deoR
，
recA1
，
endA1
，
hsdR17(rk-
，
mk+)
，
phoA
，
supE44
，λ
-
，<
/p>
thi-1
，
gyrA96
，
relA1
2
：
BL21(DE3)
菌株
该菌
株用于高效表达克隆于含有噬菌体
T7
启动子的表达载体（如<
/p>
pET
系列）的
基因。
< br>T7
噬菌体
RNA
聚合酶位于λ
噬菌体
DE3
区，该区整合于
BL21
的染色体
上
。该菌适合表达非毒性蛋白。
基因
型：
F-
，
ompT
< br>，
hsdS
（
rBB-mB<
/p>
－）
，
gal
，
dcm
（
DE3
）
3
：
BL21(DE3)
pLysS
菌株
< br>该菌株含有质粒
pLysS
，
因
此具有氯霉素抗性。
PLysS
含有表达
T7
溶菌酶的基因，
能够降低目的基因的背景表达水平，
但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒
性蛋白和非毒性蛋白。
基因型：<
/p>
F-
，
ompT
hsdS
（
rBB-mB
－）
，
gal
，
dcm<
/p>
（
DE3
，
pL
ysS
，
Camr
4
：
JM109
菌株
该菌株在使用
p
UC
系列质粒载体进行
DNA
转化或用
M13 phage
载体进行转染时，
由于载体
DNA
产生的
LacZa
多肽和
JM09
编码的
LacZ
Δ
M15
进行α－互补，
从而
显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株
基因型：
recA1
，
endA1
，
gyrA96
，
thi
－
1
，
hsdR17
，
supE44
，
relA1
，Δ（
lac
－
proAB
< br>）
/F
’
[traD36
，
proAB+
，
l
acIq
，
lacZ
Δ
M15]
5
：
TOP10
菌株
<
/p>
该菌株适用于高效的
DNA
克隆和质粒扩
增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型：
F-
，
mcrA
Δ
(mrr-hsd RMS-
mcrBC)
，
φ
80
，
l
acZ
Δ
M15
，△
< br>lac
Ⅹ
74
，
recA1
，
ara
Δ
139
Δ
(ar
a-leu)7697
，
galU
，
galK
，
rps
，
(Strr)
endA1
，
nupG
6
：
HB101
菌株
该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验
基因型：
supE44
，
hsdS20
（
rB-m
B
－）
，
recA13
，
ara
－
14
，
proA2
，
lacY1
，
galK2
，
rpsL20
，
xyl-5
，
mtl-1
，
leuB6
，
thi-1