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实验室常用菌株及特性

作者:高考题库网
来源:https://www.bjmy2z.cn/gaokao
2021-02-28 03:24
tags:

-

2021年2月28日发(作者:gentleman是什么意思)


一、实验室常见菌株简介



Xl1-Blue


菌株



基因型:


endA1 gyrA96(nalR) thi-


1 recA1 relA1 lac glnV44 F?[Tn10 proAB+ lacIq


Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK


- mK+)




特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。



用途:分子克隆和质粒提取。




BL21(DE3)


菌株



基因型:


F



ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-


) λ(DE3 [lacI lacUV5


-T7 gene 1 ind1


sam7 nin5])




特点:


该菌株用于以


T7 RNA


聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。


T7

< p>
噬菌体


RNA


聚合酶基因的表达受控于

< p>
λ


噬菌体


DE3


区的


lacUV5


启动子,


< br>区整合于


BL21


的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的 表达。



用途:蛋白质表达。




BL21(DE3)ply


菌株



基因型:


F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-


) λ(DE3) pLysS(cm


R)



< p>
特点:


该菌株带有


pLysS


具有氯霉素抗性。


此质粒还有表达


T7


溶菌酶的基因,


T7


溶菌酶能够 降低目的基因的背景表达水平,但不干扰


IPTG


诱导的表达。




合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。



用途:蛋白质表达




DH5α


菌株



基因型:


F- endA1 glnV44 thi-


1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15


Δ(lacZYA


-argF)U169, hsdR17(rK-


, λ–



特点:一种常用于质粒克隆的菌株。




Φ80dlacZΔM15


基因的表达产物与


pUC


载体编码的


β


-


半乳糖苷酶氨基端实现


α


互补,


可用于蓝白斑筛选。


recA1


< br>


endA1


的突变有利于克隆


DNA


的稳定和高纯度质粒


DNA


的提 取。



用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。




JM109


菌株



基因型:


endA1 glnV44 thi-


1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac


-proAB) e14-


[F? traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK


-mK+)




特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达


,

< br>可用于


M13


克隆序列测定和蓝白斑

筛选。



用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。




DH10B


菌株



基因型:



F-


mcrA Δ(mrr


-hsdRMS-


mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 endA1 recA1 deoR


Δ(ara,leu)7697 araD139 galU galK nupG rpsL λ


-


The most widely used E. coli strain for BAC cloning is DH10B




host for pUC and other α


-complementation vectors; pBR322


useful for generating genomic libraries containing methylated cytosine or adenine


residues



useful for plasmid rescue procedures




ELECTROMAX DH10B T1 CELLS



说明:



DH10B


细胞是高转化效率的


E. coli


,可以完美应用于大多数实验应用。



DH10B


基因型具有以下特点:




lacZΔM15


用于重组克隆的 蓝


/


白斑筛选



消除了


mcrA



mcrBC



mrr



hsdR MS


限制系统,允许构建更多具有代表性的


基因组文库


(1,2)


endA1


突变,可以增加质粒产 量和数量



?


高效率转化大小为


150 kb


的质粒 ,用于产生


cDNA


或基因组文库


< /p>


DH10B?


可以表达


tonA


的基因型,


tonA


能够提供对


T1



T5


噬菌体感染的抗性


(DH10B? T1R)




DH10B


的基因型:


F · mcrA Δ(mrr


-hsdRMS-


mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1


endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ · rpsL (StrR) nupG



DH10B T1R


的基因型:


F · mcrA Δ(mrr


-hsdRMS-


mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74


recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU



galK λ · rpsL (StrR) nupG tonA



Rosetta(DE3)


菌株






首先来 一些大肠杆菌表达的基本概念:


一个完整的表达系统通常包括配套的表达载体和表达


菌株,如果是特殊的诱导表达还包括诱导剂,如果是融合表达还包括纯化系统或者

< p>
Tag



测等等。选择表达系统通常要根据实验目 的来考虑,比如表达量高低,


目标蛋白的活性,表


达产物的纯化 方法等等。主要归结在表达载体的选择上。



-


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