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ss
琼脂
S
S
培养基用于用于沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养
SS
平板的原理
:SS
为
强
选择性培养基
.
其成分除了有必要的
胨、
牛肉
膏
等氮、碳源外，其他则为选
择性抑制剂和缓冲剂。
柠檬酸钠、
胆
盐、
硫代硫酸钠
的协同作用及煌绿共同来抑制肠道非病
原性细菌及部分大肠杆菌的生长。对志贺菌属及沙门
菌属相对抑制
性较弱。
硫代硫酸钠
有助于大肠菌的着色，
<
/p>
柠檬酸铁
能缓解某些药物对病原菌的毒副作用，
< br>同时与细菌产物起反
应呈黑色菌落。
< br>中性红
指示剂可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌鉴别开，
前者为红色
菌落，
后者为无色菌落。
碱
性变黄，
酸性变红
变色范围
pH
值
6.8(
红
)
～
8.0(
橙黄
)
；
酚红酸性变黄，碱性变红
pH:6.
8
（黄）
-8.4
（红）
Xld
琼脂
酵母膏粉
提供氮源、维生素、生长因子
;
氯化钠维持均衡的渗透压
;
木糖、乳糖、蔗糖
为可发酵糖类，产酸使酚红指示剂变黄
;
去氧胆酸
钠
抑制革兰氏阳性菌，但不影响沙门氏菌的生长
;
硫代硫酸钠
可被某些细菌还原硫化氢，
与柠檬酸铁
铵中的铁盐生成黑
色硫化铁
;
琼脂是培养基的凝固剂
;
酚红
为
pH
指示剂。
GN
增菌液
胰蛋白胨
提供碳源、氮源、维生素和矿物质；
< br>
葡萄糖和甘露醇
提供糖类；
柠檬酸钠和去氧胆酸钠
抑制革兰氏阳性细菌，
< br>但不影响沙门氏菌和志
贺氏菌（阴性菌）的生长；
磷酸二氢钾和磷酸氢二钾
是缓冲剂；
氯化钠
维持均衡的渗透压。
高盐察氏培养基
硝酸钠
提供氮源；
磷酸二氢钾
是缓冲剂；
硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁
提供必须的离子；
含量较高的
氯化钠
具有抑制细菌和减缓生长
速度快的毛霉科菌种的
作用；
蔗糖<
/p>
提供碳源；
琼脂
是培养基的凝固剂。
三糖铁琼脂（
TSI
）
1.
原理分析
本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的
利用和硫化氢（变黑）的产生。
该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为
10:10:1
，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被
分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸
，因接触空气而氧化，
加之细菌利用培
养基中含氮物质，生成碱
性产物
(K)
，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下
，酸
类不被氧化，所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌
()
，则产生大量的酸（
A
），使整个
培养基呈现黄色。
如培养基接种后产生黑色沉淀，
是因为某些细菌能分解含硫氨基酸，
生成
硫化氢，硫化氢和培
养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。
2.
试验方法
以接种针挑取待试菌可疑菌落或者纯造就物穿刺接种并
涂布于斜面置
36±
1
℃造就
18-24h
观察结果
3.
化学性质
粉红色粉末，一种鉴别培养基，由牛肉膏、酵母菌膏、卵白胨、
胨、葡萄糖、乳糖、
蔗糖、硫酸亚铁、氯化钠、硫代硫酸钠、酚
红、琼脂等配合制造而成。易吸湿，加水煮沸熔
解后成橘红色半透明液体，
pH
约
7.5
，冷至
45
℃开始凝固。
4.
结果
志贺氏菌都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生
H2S
。
< br>大肠杆菌，能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产生
H2S
。
沙门氏菌，能
分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生
H2S
，多数产气。
2
——
志贺氏菌
3
——
沙门氏菌
4
——
大肠杆菌
<
/p>
KIA
和
TSI
常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力，
只用
KIA
一种就可以把肠杆菌科细
菌和其他科细菌区别出来。
< br>
KIA
成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为
1
：
10
，
指示剂为酚红，其在
PH<6.8
时变为
黄色，而
KIA<
/p>
的
PH
为
7.4
，产少量的酸就可导致颜色变化。
生化原理：
斜面部分暴露于空气中，
为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配
KIA
或
TSI
时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长
度，两者均为
3cm
，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。
< br>用针穿刺时，取单个菌落，穿刺至底部
3-5mm
处，然
后在斜面上往复划线。放
35
度培养
1
8-24
小时。
观察结果：有三种类型
A.
非发酵型：无碳氢化合物发酵，
所以无酸产生，
斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致
斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。
B.
非乳糖发酵型
:
如果接种的是发酵葡萄
糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有
0.1%
葡萄糖
可以产酸
A
。开始阶段，培养
8-12h
时，产生的酸
足以引
起斜面和底部颜色变成黄色。
在接下来的时间里，
葡萄糖被完全
消耗，
斜面部分的细
菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸，产生
的
胺类很快就中和斜面上存在的酸；
到
18-24h
，
整个斜面又转换成碱
性
PH
，
颜色有变成红色。
深部（厌氧区域）
，氨基酸降解不足以中和形
成的酸，培养基仍为黄色。
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