-
实验室常用染色液配方
1
、吕氏
(Loeffler)
美蓝染色液
< br>
A
液：美蓝
(Methylene
blue) 0.3
克
95%
酒精
毫升
B
液：氢氧化钾
(KOH) 0.01
克蒸馏水
100
< br>毫升分别配制
A
液和
B
液，然后混合即成。
2
、齐氏
(Ziehl)
石炭酸复红染色液
A
液：碱性复红
(Basic
fuchsin) 0.3
克
95%
酒精
10.O
毫升
B
液：石炭酸
(
苯酚
) 5.0
克蒸馏水
95
毫升
将碱性复红溶于
95%
酒精中，
配成<
/p>
A
液。
将石炭酸溶于蒸馏水中，
配成
B
液。
将两者混合
即成。
3
、结晶紫染色液
(Huclker
改订
)
A
液：结晶紫
(Crystai
violet) 2.5
克
95%
酒精
25.0
毫升
B
液：草酸铵
(NH4)2C2O4H2O 1.0
克蒸馏水
100
毫升
将结晶紫研细后，加入
95%
酒精，使之溶解，配成
A
液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成
B
液。两
液混合即成。
4
、路戈氏
(LugoI)
碘液
(
革氏鉴别染色用
)
碘
1.0
克碘化钾
2.0
克蒸馏水
300
毫升
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。
< br>
5
、番红染色液
(
革氏鉴别染色用
)
番红
O(Safranin O)
2.0
克
蒸馏水
100
毫升
6
、孔雀绿染色液
(
芽孢染色用
)
孔雀绿
(Malachite green)
5.0
克蒸馏水
100
毫升先将孔雀绿研细，加少许
95%
酒精溶解，
再加蒸馏水。
7
、
Dorner
黑素液
(
英膜染色用
)
黑素
(Nigrosin)
10.0
克蒸馏水
< br>100
毫升福尔马林
(40%
甲
醛
)
0.5
毫升将黑素在蒸馏水中煮
沸
5
分钟，加入福尔马林作为防腐剂，
用玻璃棉过滤。
8
、刚果红染色液刚果红
(Congo
red)
2.0
克蒸馏水
100
毫升
9
、稀释结晶紫染液
(
放线菌染色用<
/p>
)
结晶紫染色液
(
同
3) 5.0
毫升蒸馏水
95.0
10
、乳酸石碳酸棉蓝染色
液（真菌制片，短期保存）
石炭酸
10.0
克
甘油
20.0
毫升乳酸
(
比重
l.21)
10.0
毫升
棉蓝
0.02
克蒸馏水
< br>10.0
毫升将
碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和
甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。
11
动物组织石蜡切片染色方法
苏木精
-
伊红
(H
E)
染色：二甲苯Ⅰ
,
Ⅱ各
10
min
，依次进入无水乙醇、
950 mL/L, 900
mL/L,
800
mL/L
及
700
mL/L
的酒精各
5
min
，蒸馏水洗；入苏木精染液
10
min
，盐酸酒精分色
4
s
，自来水洗
10
min
；依次入
700 mL/L, 800
mL/L
及
900
mL/L
酒精各
5
min
，入伊红染
液染色
10
min
；入
950
mL/L
及无水乙醇Ⅰ
,
Ⅱ各
5 min,
以二甲苯透明，中性树脂封片
.
一、常用染色液的配制
⒈
碘
-
碘化钾（
I2-KI
）溶液
能将淀粉染成蓝紫色，
蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方：碘化钾
2g
；
蒸馏水
300ml
；
碘
1g
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解
后稀释至
300mL
，保存在棕色玻
璃
瓶内。用时可将其稀释
2-10
倍，这样染色不致过深，效果更
佳。
⒉
苏丹Ⅲ（
sudan
Ⅲ或Ⅳ）
能使木栓化、
角质
化的细胞壁及脂肪、
挥发油、
树脂等染成红色或淡红色，
是著名的脂肪染色剂。
< br>配方：
（
1
）苏丹
III
或苏丹Ⅳ干粉
0.1g
；
95
％酒精
10ml
；
过滤后再加入
10ml
甘油
（
2
）先将
0.1g
苏丹
III
或
IV
溶解在
50ml
丙酮中，再加入
70%
酒精
50ml
。<
/p>
（
3
）苏丹
III
70%
乙醇的饱和溶液。
⒊
1
％醋酸洋红（
aceto
carmine
）
酸性染料，
适用于压碎涂抹制片，能
使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。
配方：洋红
1g
；
45
％醋酸
100ml
煮沸
2h
左
右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入
4
％铁明矾溶液
1
～
2
滴（不能多加，否则会发生沉淀）
，放入棕色瓶中备用。
⒋
改良苯芬品红染色液（
Carbol
fuchsine
）
核染色剂。
配制步骤：
先配成三种原液，再配成染色液。
原液
A
：
3g
碱性品红溶于
100ml
70
％酒精中。
< br>原液
B
：取原液
A10ml
加入到
90ml
5
％石炭酸水溶液中。
原液
C
：取原液
B 55
ml
，加入
6ml
冰醋酸和
6ml
福尔马林（
38
％
的甲醛）
。
（原液
A
和原液
C
< br>可长期保存，原液
B
限两周内使用）
染色液：取
C
液
10
～
20ml
，加
45
％冰醋酸
80<
/p>
～
90ml
，再加山梨醇
1~1.8g
，配成
10
％～
20
％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立
即用，则着色能力差）
。
适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用
2
～
3
年不变质。
山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。
⒌
中性红（
neutral
red
）溶液
用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。
配方：中性红
0.1g
；
蒸馏水
100ml
使用时再稀释
10
倍左右。
⒍
曙红<
/p>
Y
（伊红，
eosin
Y
）酒精溶液
常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。
配方：曙红
0.25g
；
95
％酒清
100ml
也常用于
95
％酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识
别材
料。
⒎
钌红（
ruthenium
red
）染液
钌红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。
配方：钌红
5
～
10mg
；
蒸馏水
25-50ml
⒏
龙胆紫（
gentian
violet
）
为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。
配方：龙胆紫
0.2~1 g
；
蒸馏水
100ml
⒐
苯胺兰（
aniline
blue
）溶液
< br>为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于
< p>与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。
配方：苯胺兰
1 g
；
35
％或
95
％酒精
100ml
⒑
间苯三
酚（
phloroglucin
）溶液
用于测定木质素。
配方：间苯三酚
5g
；
95
％酒精
100ml
注：此溶液呈黄褐色即失效。
⒒
橘红<
/p>
G
（
orange
G
）酒精溶液
为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。
配方：橘红
G 1g
；
95
％酒精
100ml
⒓
番红（
safranin
O
）
为碱性染料
适用于染木化、角化、栓
化的细胞壁，对细胞核中染色质、
染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的
< br>红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红
G
、结
晶紫作三重染色。
配方：
（
1
）番红水溶液
<
/p>
番红
0.1
或
1
g
；蒸馏水
100ml
（
2
）番红酒精溶液
番红
0.5
或
1 g
；
50
％（或
95
％）酒精
100ml
（
3
）苯胺番红酒精染色液
甲液
番红
5 g
+95
％酒精
50ml
乙液
苯胺油
20ml
+
蒸馏水
450ml
将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。
⒔
固绿（
fast
green
）
又称快绿溶液。
为酸性染料，能将细
胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。
配方：
（
1
）固绿酒精液
固绿
0.1 g
；
95
％酒精
100ml
（
2
）苯胺
固绿酒精液
固绿
1 g
；无水酒精
100ml
；苯胺油
4ml
配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。
⒕
苏木精
（
hematoxylin
）染液
苏木精是植物组织制片中应用最广的染料，
< br>是苏木科植物苏木的心材提取出来的。
它是很强的细
胞核
染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏（
Heidenhain's
）苏木精染色
液，又称铁矾苏木精染色液。
配方：甲液（媒染剂）
：
硫酸铁铵（铁明矾）
2-4g
；蒸馏水
100ml
（必须保持新鲜，最好临用之前配制）
乙液（染色剂）
：苏木精
0.5-1g
；
95
％酒精
10ml
；蒸馏水
90ml
配制步骤：
（
1
）将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，
使其充分氧化（通常在室内放置
两个月后方可使用）
。
（
2
）加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期
保存。
切片需先经甲液媒染，
并充分水洗后才能以乙液染色，
染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色
至适
度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，
但要注意甲液与乙液在任何
情况下
决不能混合。
⒖亚甲基蓝染液
常用于细菌、活体细胞等的染色。
取
0.1g
亚甲基蓝，溶于
100ml
蒸馏水中即成。