红笛鲷高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-B1,HMGB1)基因的克隆与序列分析

.

............................... .................................................. ................ 2

1.1.1

（这是第三层标题）

.. .................................................. ...................................... 2

1.2

（这是第二层标题）

.................. .................................................. ............................. 2

2

材料与方法（第一层标题）

............... .................................................. ........................... 2

2.1

鱼（这是第二层标题）

................. .................................................. .......................... 2

2.1.1

（这是第三层标题）

.. .................................................. ...................................... 2

2.2

隔离和互补脱氧核糖核酸的合成（这是第二层标题）

......................................... 3

2.3

放大的

Ls-HMGB1

片段（

这是第二层标题）

......... ..............................

3

< br>

2.3.1

放大的

Ls- HMGB1

片段

（这是第三层标题）

................

............ .....

3

2.3.2

快速放大

Ls-HMGB1 cDNA cDNA< /p>

结束

(

种族

)< /p>

（这是第三层标题）

..............

3

2.4

生物信息学分析

Ls-HMGB1

（第一层标题）

............................... ...........

2

3

（第一层标题）

........ .................................................. .................................................. ..... 3

3.1Ls- HMGB1

的克隆和序列分析（这是第二层标题）

................................ ................ 3

3.1.1

（这是第三层标题）

.. .................................................. ...................................... 4

3.2

（这是第二层标题）

.................. .................................................. ............................. 4

鸣

谢

.......................... .................................................. .................................................. ..... 6

参考文献

.... .................................................. .................................................. ....................... 7

摘

要

摘

要

摘要< /p>

:

高迁移率族蛋白

B-1(HMGB1)

是一种

chromatin-associated

质重要的核小体的形成

,

转录调控和炎症。然而

,

报道

< br>HMGB1

的海洋鱼仍有限。在这里

,

< br>我们从驼头鲷鱼

HMGB1

基因克隆和鉴定

,Lutjanus sanguineus(Ls- HMGB1)

。

Ls-HMGB1

c DNA

由

1199

个基点和

个基点的

5

‘

-UTR,630

年英国石油公司开放阅读框

(ORF),499

个基点

3

' < /p>

-UTR,

编码

210

< br>个氨基酸的多肽

(

加入基因库没有

:)

。

系统发育分析

Ls-HMGB 1

显示最高

91%

的相似性与

Sciaenops ocellatus HMGB1

蛋白。定量实时

PCR(

二者

)

分析

显示

,Ls-HMGB1

相对较 高的表达水平在皮肤、肾脏和心脏。弧菌后海水养殖与保利我

:C

语言刺激

,

记录

Ls-HMGB1< /p>

显著增加

,

达到峰值在

< br>18 h

皮。这些结果表明

Ls-HMGB1

发挥重要作用在免疫反应的驼头鲷鱼在细菌或病毒的挑战。

(

宋体，小四号，

1. 25

倍行距

)

关键词 ：

驼头鲷鱼；

HMGB1

；免疫反应； 海水养殖；多聚肌苷酸；

（关键词

3

到

5

个，关键词之间用“；

I

ABSTRACT

ABSTRACT

Abstract:

High

mobility

group

box1

(HMGB1)

is

a

kind

of

chromatin-associated

nonhistone

protein

important

for

nucleosome

formation,

transcriptional

regulation

and

r,

the

reports

about

HMGB1

of

marine

fish

were

still

limit.

Here,

we

cloned

and

characterized

a

HMGB1

gene

from

humphead

snapper,

Lutjanus

sanguineus

(Ls-HMGB1).The Ls-HMGB1 cDNA composed of 1199 bp with a 70 bp of 5'-UTR, 630 bp

open

reading

frame

(ORF)

and

499bp

3'-UTR,

encoded

a

polypeptide

of

210

amino

acids

(GenBank Accession No: ).Phylogenetic analysis of Ls-HMGB1 showed highest similarity of

91%

with

Sciaenops

ocellatus

HMGB1

tative

real-time

PCR

(qRT-PCR)

analysis

revealed

that

Ls- HMGB1

had

relatively

high

expression

level

in

skin,

kidney

and

Vibrio

harveyi

and

poly

I:C

stimulation,

transcripts

of

Ls-HMGB1

significantly

increased and reached to peak at 18h results indicated that Ls- HMGB1 may play an

important role in immune response of humphead snapper during bacterial or viral challenged.

（此处为英文摘要，字体：

Time New Roman

，小四号，

1.25

倍行距）

KEYWORDS:

humphead snapper; HMGB1; immune response; V

. harveyi; poly I:C

II

广东海洋大学

xxxx

届本科生毕业论文

红笛鲷高迁移率族蛋白

B-1(high

mobility

group

bo x-B1,HMGB1)

基因的克隆与序列分析

（论文题目，

3

号，黑体）

（专业，学号，姓名，宋体小四号，中间以逗号分隔）

（教师姓名，宋体小四号）

1

介绍（第一层标题）

高迁移率族蛋白

B-1(HMGB1)

是一个守恒

ch romatin-associated

非组蛋白的蛋白质

,< /p>

这是最初与小牛胸腺

( al., 1973; Paonessa et al., 1987; al.,

1992).HMGB 1

蛋白包含两个邮政编码框

(

称为

A

族和

B

族

)

和一个酸性

c

端地 区高度丰富

的氨基戊二酸和天冬氨酸的氨基酸

(Hardman

et

al

.,1995)

。此外

,HMGB1

显示广泛分布

于大多数真核细胞的细胞核

,

也证明是释放激活巨噬 细胞

,

成熟树突状细胞

(dc),

自然杀

伤

(NK)

细胞和其他细胞对刺激

(Agresti

A

and

Bianchi

ME,

2003;

Lotze

and

Tracey

2005;

Dong et al.,2013;).

核

HMGB1

可能稳定核小体结构

,

协助

D NA

错配修复与

DNA

和核小

体

,

通过互动以及相互作用调节基因转录的转录 因子

(Bustin, 1999; Stros,2010;

Altieri.F.,

2008).

和细胞外

HMGB1

作为激发子的促炎细胞因子分泌

(Andersson

et

al.,

2000; Fiuza et al., 2003),

免疫细胞的成熟、分化和迁移

(Palumbo et al.,2004;

Rouhiainen et al., 2004; Messmer et al., 2004; Park et al., 2003; Yang et al.,

2001).

到目前为止

,HMGB1 orthologues

(Cui

et

al,

2008;

Fiuza

et

al,

2003;

Goodwin

et

al,

1973;

Pang

et

al,

2012;

Zhao

et al, 2011; Wang et al, 2013).

在硬骨鱼的

,HMGB1

表达可以诱导细菌

(Zhao et al,

2011),

病毒或病毒病原体相关分子模式

(

滑道

)

刺激

(Yang et al, 2013)

。和硬骨鱼类

的

HMGB1

也起到一定的作用在单核细胞

/

巨噬细胞激活

(Zhao et al, 2011),

细胞因子的

生产

(Zhao et al, 2011; Xie et al, 2014)

和免疫途径调制

(Yang et al, 2013; Xie

et al, 2014)

。分别

,

硬骨鱼

HMGB1

无须对大脑发 育的要求

(Zhao et al., 2011b)

脊髓

损伤后再生也记录

(Fang et al, 2013)

。

－

1

－

广东海洋大学

xxxx

届本科生毕业论文

驼头鲷鱼

(Lutjanus

san guineus)

在中国南部沿海地区的海洋鱼类中是最重要之一。

然而

,

由弧菌引起的疾病

sp

鲷鱼养殖行业造成了巨大的经济损失。和

L

的免疫反应。

sanguineus

对抗细菌感染在很大程度上 仍是个未知数。

在这项研究中

,

从

L

HMGB1

基因。

sanguineus(Ls-HMGB1)

分离和特征。组织的分布和表达分析研 究与海水养殖

/Poly

I:C.

目 前的结果有助于更好地理解在细菌感染

neus

的免疫反应

（建议同学在书写标题时采用工具栏上 的“格式刷”

，这样定义标题不容易造成标

题的紊乱）