-
.
酶标仪
B
CA
法测定蛋白浓度
-
一、药品
500
次酶标仪,碧云天)
,含以下成分:
BCA
蛋白浓
度测定试剂盒(
P0
012
,
1. 100ml
,碧云天)
,室温保存试剂
A
(
< br>P0012
-
1
,
a)
BCA
,碧云天)
,室
温保存
P0012
-
2
试剂
B
< br>(,
3mlb)
BCA
p>
度保存
P0012
-
3
,
1ml
,
碧云天)
,
-
20c)
蛋白标准
(
5mg/ml
BSA
)
(
二、仪器和试剂
最佳)
,水浴锅
酶标仪(测定波长为
540
-
59
5nm
之间,
562nm1.
孔单<
/p>
条可拆酶标板(平底)
2.
96
1
个
(准备
BCA
工作液用)
3.
15 ml
离心管
个(准备蛋白标准品
工作液用)
1.5 ml
离心管
14.
道移液器(排枪)和枪头
5.
单道移液器和枪头,
8PBS
6.
三、
操作步骤
℃。
1.
水
浴锅调至
37
℃冰箱中取出,
)的配制
:将蛋白标准品(
5mg/ml
)从
-
202.
蛋
白标准品工作液(
1
mg/ml
倍,即配μ
l PBS
,即
稀释
5
完全溶解并混匀。取
60
μ
l
蛋白标准品
(
5mg/ml
)
,加入
240
成蛋白标准品工作液(
1 mg/ml
)
。
BCA
。
2
×
1.1
(标准品
和样本均需测复
孔)
BCA
计算工作液
总量
= 0.2 ml
×(样本数
+8
)×
3.
BCA
需充分混匀。
50:1
)
,
体积的
BCA
p>
试剂
B
配制
(即试
剂工作量按
50
体积的
BCAA
加上
1
24
工作液室温小时内稳定。
(n)
样本数
1~5
PBS
蛋
白标准品
终浓度蛋
白标准品
工作液单
条酶
(mg/ml)
)
(
?
标板
l)
(
1
mg/mll)
?
(0
100A 0S0
0.05
B 95
S1 5
0.1 C S2
10
90
mlA
()
6
)<
/p>
B
(
ml
(ml)
总量
0.12
6.12
7
8
9
0.18
9.18
10
0.2
10.2
11
0.22
12
0.24
13
0.26
13.26
14
0.28
15
0.3
0.14
0.16
7.14
8.16
6~7
8~10
11~12
13~14
15~16
17~19
20~21
22~23
24~26
11.22
12.24
14.28
15.3
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