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StepOnePlus
型
PCR
仪
操作规程
1.
StepOnePlus
上机可由两种方式来进行:
由
StepOne Software Quick
Start
进行上机或由
StepOnePlus
机器面板直接触控
上机。
2.
由
StepOne Software Quick
Start
进行上机:
开启
StepOne Software v2.0
进入主画面后点选
Quick
Start
窗口进行快速上
机设定。
进入
Experiment
Properties
后输入:
Experiment Nam
e
及档案储存位置;
选择
Experi
ment Type
选择使用荧光系统;选择
Ramp Spe
ed
选择实验样品种类;
点选
Run
Method
确定
PCR
反应条件是否需要修改后,按下
START
RUN
。
如欲使用
StepOnePlus
机器上
VeriFlex Block
的功能,请由左方
Setup
功能列
上点
Plate
Stepup
窗口,在“
Assign
Targets
and
Sampl
es
”窗口下,勾选
Enable
VeriFlex Block
选项,此时
Block
即被分成六个区块。
接着点选
Run
Method
,
在
run progr
am
上点一下欲调整的温度步骤,
选择
“
Set
different temperatures
for one or more zones
”并设定每个区块的温度,请注意两
p>
相邻区块温度差异不可以超过
5
度,第一和
第六区块最多可差异
25
度。
按下
Start Run
Now
进行
data
收集,
反应结束后,
则会回到
“
Main
Menu
”
画面,触控
Collect
Result
将
data
存出。
2.
由
StepOnePlus
机器面板直接触控上机:
开启电源后,进入主画面,由触控式屏幕来进行
StepOnePlus
的设定。
按下
TaqMan cDNA
(
Standard
)进入
PCR
Thermal Cycle Program
,可利用下面
工
具列再重新编辑反应条件,如果条件相同则直接按下
Save
。
如欲使用
StepOnePlus
机型上
VeriFlex
Block
的功能,请点选
Options
下的
VeriFlex step
并设定每个
区块温度,请注意两相邻区块温度差异不可以超过
5
度以上,第
一和第六区块最多可差异
25
度。
触控需要
?
改之处则会跳出触控式键盘,重新给予实验名称、选择档案储存
的
Folder
、并
?
改实际反应样品
体积,按下
Save
&
Exit
;然后在
Browse
Last
Accessed Experiments
p>
下选择刚设定好的实验,
按下
Start
Run
。
此时跳出警告
标示,提醒之前
的档案是否存出,如果已经将前一个档案存出的话,则可直
接触控
Overwrite
进行
Data
收
集;
如未储存的话则触控
Collect
将
Data
存出。
确定反应体积及实验名称无误后,
触
控
Start Run
Now
,
则会进入
PCR Progr
am
实时显示画面。
反应结束后,
则会
回到
“
Main Menu
”
画面,
触控
Collect
Results
将
data
存出后,再回到
StepOne Software
进行实验盘建立及分析。
清洁与维护保养:
1.
外壳要用柔软的布配合温和的
清洁液清洗,不要用酒精或其他洗涤用品;
加热孔可以用酒精棉球擦洗,但在清洗前应注
意加热板的温度需降至室温。
2.
注意保持热盖和
Block
的清洁,特
别注意不能将带有荧光染料的试剂溅洒
在热盖或者
Block<
/p>
里,否则需用蘸有
70%
酒精(纯酒精稀
释在蒸馏水里)的
干净棉球擦洗,直到不影响实验结果。
注意事项:
1.
为避免触电事故,仪器的输入电源线必须可靠接地。
2.
操作人员不得擅自打开仪器,
元件的更换或机内调节须由持证的专业人员进
行。
3.
在连接交流电源前,需保证电
源电压与仪器要求电压一致
220V
(允许偏差±
10%
)
,并确保电源插座的额定负载不小于仪器要
求。
StepOne
定量
PCR
仪简易设置指南
启动
电脑,打开定量
PCR
仪电源开关:
双击桌面“
StepOne Software
”图标,出现
Login
登录界面,点击“
OK
”
,打
开软件。
p>
起始界面如
图所示,点击红色椭圆的三角图标,展开软件功能按钮。
点击左侧“
Set
Up
”功能选项中的“
Advanced
Setup
”高级设置向导。
在打开的设置界面,左侧为导航树,选择不同的功能选项,右
侧显现为不同的
设置功能。
默认条件下,显示为“
Experiment
Properties
”实验属性。
右侧界面,带有红色
*
号位置需要输入或者通过鼠标进行选择。不带
*
号位
置为
选填,可以保持空白。在途中位置输入实验名称,该名称根据需要进行填写。
选择仪器类型、实验类型、荧光标记方法以及反应速度。
左侧导航树,
选择
“
Plate Setup
”
设置选项。
右侧
“
Define Targets
”
选项下
< br>“
Target
Name
”<
/p>
处设置检测基因的名称,
如
FluA
p>
,
Reporter
下拉菜单选择
“
FAM
”
,
Quencher
下拉菜单选择“
None
p>
”
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