IHC的四种基本类型

-

抗体

反应为理论基础，用标记的特异性抗体（ 抗原），对组织内的相应抗原（抗体）进行定位、

定性和半定量检测，

< br>经组织化学显色反应，

利用光镜、

荧光显微镜或电子显微 镜进行实验结

果观察的一项技术。

若该技术主要用于研究和观察 细胞内的某些成分，

又可称为

ICC

，

即免

疫细胞化学（

Immunocyt ochemistry

）。

研究对象 ，所有能作为抗原或者半抗原的物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷

脂、多糖以 及病原体等，都可以成为它的研究对象。

其优势在于特异性高 ，

敏感性高，

方法步骤统一，

形态、< /p>

功能和代谢密切结合等方面。

因此，

IH C/ICC

已成为临床病理不可或缺的辅助手段，

尤其是根据该 技术检测结果的表达水平所发

展起来的相关“个体化治疗”方案，使免疫组化的质量及质 控管理愈来愈受到高度重视。

IHC/ICC

主要有四种基本类型

1

原理

传统直接法，

将已知的特异性抗体与标记物结合，

制备成标记抗体，

再用标记抗体直接与标

本内的相应 抗原结合，光镜下观察抗原存在部位呈现特异性标记。

新型直 接法，采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）为骨架，将特异性抗体和

HRP

结

合在骨架上，形成

HRP-

葡聚糖

-

特异性抗体的巨大复合物，其内的特异性抗体 直接与标本

内的相应抗原结合，

经酶促反应，

< br>即可在光镜下观察特异性阳性结果，

也叫多聚螯合物酶法

——

EPOS

法（

Enhanced Polymer One-step Stainning

）。

传统直接法

新型直接法

优点

传统直接法

，

特异性强，非特异性反应较少，技术操作简便。

新型直接法，敏感性极强，背景无染色，

大大缩短了试验时间，是目前 最简便的免疫组织化

学方法，用于冰冻切片作用尤为突出。

缺点

传统直接法必须标记每一种特异 性抗体，

且只能检测一种抗原，

敏感性较差，

< br>同时反应的信

号也较小，特别是对于组织或细胞内微量的抗原检测。

新型直接法商品化的

EPOS

品种不多，试剂价格较昂贵。

2

传统直接法

新型直接法

原理

传统间接法是用未标记的一抗与 标本内的相应的抗原物质结合，用标记的二抗与一抗结合，

通过荧光显微镜观察，或经过 酶促反应后利用光镜观察有色的阳性反应产物。

新型间接法是 将标本内的抗原与一抗结合后，

标记有多聚化合物酶复合物的二抗与一抗

结合，经酶促反应进行显色定位，也叫

EnVision

法。

注：

EnVision

复合物是由二抗分子的一个

Fab

段与

HRP/ALP

通过聚合技术结合在线状的葡聚糖上

< br>而形成。

优点

传统间接法一个一抗可以结合多个二抗抗体分子，