-
1.
微生物检验
一、微生物实验室概况
食品微生物实验室主要负责各类微生物项目的检测，主要检测
项目有菌落总数、大肠菌
群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌（
如沙门氏菌、志贺氏菌、溶
血性链球菌、金黄色葡萄球菌等）。
微生物实验室由准备室、洗涤室、灭菌室、无菌室、恒温培养室和普通实验室六部分组成
。
这些房间的共同特点是地板和墙壁的质地光滑坚硬，
仪器和设
备的陈设简洁，
便于打扫卫生。
二、微生物实验室功能分区
（一）准备室
准备室
用于配制培养基和样品处理等。室内设有试剂柜、存放器具或材料的专柜、实验
台、电炉
、冰箱和上下水道、电源等。
（二）洗涤室
洗涤室
用于洗刷器皿等。
由于使用过的器皿已被微生物污染，
有时还会
存在病原微生物。
因此，
在条件允许的情况下，
最好设置洗涤室。
室内应备有加热器、
蒸锅，
洗刷器皿用的盆、
桶等，还应有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。<
/p>
（三）灭菌室
灭菌室
主要用于培养基的灭菌和各种器具的灭菌，室内应备有高压蒸汽灭菌器、烘箱等
灭菌设备
及设施。
（四）无菌室
无菌室一般为
4 - 5
平方米、高
2.5
米的独立小房间
(
与外间隔离
)
，专辟于微生物实
验室内。
无菌室
也称接种室，
是系统接种、纯化菌种等无菌操作的专用实验室。
在微生物工作中，菌
种的接种移植是一项主要操作，
这项操作的
特点就是要保证菌种纯种，
防止杂菌的污染。
在
一般环境的空气中，由于存在许多尘埃和杂菌，很易造成污染，对接种工作干扰很大。
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1.
无菌室的设置
无菌室
应根据既经济又科学的原则来设置。其基本要求有以下几点：
（
1
）无菌室应有内、外两间，内间是无菌室，外间是缓冲室。
房间容积不宜过大，以便于
空气灭菌。
最小内间面积
2
×
2.5
＝
5m2
，外间面积
1
×<
/p>
2
＝
2m2
，高
以
2.5m
以下为宜，都应有
天花板。
（
2
）内间
应当设拉门，以减少空气的波动，门应设在离工作台最远的位置上；外间的门最
好也用拉
门，要设在距内间最远的位置上。
（
3
）在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上，应开一个小窗，
作接种过程中必要的内外传
递物品的通道，以减少人员进出内间的次数，降低污染程度。
小窗宽
60cm
、高
40cm
、厚
30
cm
，内外都
挂对拉的窗扇。
（
4
）无菌室容积小而严密，使用一段时间后，室内温度很高，故应设置通气窗。通气窗应
< br>设在内室进门处的顶棚上（即离工作台最远的位置），最好为双层结构，外层为百叶窗，内
层可用抽板式窗扇。
通气窗可在内室使用后、
灭菌前开
启，以流通空气。有条件可安装恒温
恒湿机。
2.
无菌室内设备和用具
（
1
）无菌
室内的工作台，不论是什么材质、用途的，都要求表面光滑和台面水平。
（
2
）在内室和外室各安装一个紫外灯（多为
30W
）。内室的紫外线灯应安装在经常工作的
座位正上方，离地面
2m
，外室的紫外线灯可安装在外室中央
。
（
3
）外
室应有专用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和
5%<
/p>
石炭酸溶液等。
（
4
）内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的刀、剪、镊子、
< br>70%
的酒精棉球、工业酒
精、载玻璃片、特种蜡笔、记
录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
3.
无菌室的灭菌消毒
（
1
）薰蒸
：这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进
行薰蒸灭
菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
（
2
）喷雾：在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、
地面上的微尘飞场，并有杀菌作用。可用
5%
< br>石炭酸喷雾。
（
3
）紫外线照射：在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外
线灯照射
30
～
60min
。
4.
无菌室工作规程
（
1
）无菌
室灭菌。每次使用前开启紫外线灯照射
30min
以上，或在使
用前
30min
，对内外
室用
5%
石炭酸喷雾。
（
2
）
用肥皂洗手后，
< br>把所需器材搬入外室；在外室换上已灭菌的工作服、工作帽和工作鞋，
戴好口罩，
然后用
2%
煤酚皂液将手浸洗
2
分钟。
（
3
）将各种需用物品搬进内室清点、就位，用
5%
石炭酸在工作台面上方和操作员站位空间
喷雾，返回外室，
5
～
10min
后再进内室工作。
（
4
）接种操作前，用
70%
酒精棉球擦手；进行无菌
操作时，动作要轻缓，尽量减少空气波
动和地面扬尘。
（
5
）工作中应注意安全。如遇棉塞着火，用
手紧握或用湿布包裹熄灭，切勿用嘴吹，以免
扩大燃烧；如遇有菌培养物洒落或打碎有菌
容器时，应用浸润
5%
石炭酸的抹布包裹后，并
用浸润
5%
石炭酸的抹布擦拭台面或地面，用酒精棉球
擦手后再继续操作。
（
6
）工作结束，立即将台面收拾干净，将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌
室后，对无菌室用
5%
石炭酸喷雾，或开紫外线灯照
射
30min
。
（五）恒温培养室
1.
培养室的设置
（
1
）培养室应有内、外两间，内室是培养室，外室是缓冲室。房间容积不宜大，以利于空
气灭菌，内室面积在
3.2
×
4.4
＝
14m2
左右，外室
面积在
3.2
×
1.8
＝
6m2
左右，高以
2.5m
左右为宜，都应有天花板。
（
2
）分隔内室与外室的墙壁上部应设带空气过滤装置的通风口。
（
3
）为满足微生
物对温度的需要，需安装恒温恒湿机。
（
4
）内外室都应在室中央安装紫外线灯，以供灭菌用。
2.
培养室内设备及用具
（
1
）内室通常配备培养架和摇瓶机（摇床）。常用的摇瓶机有旋转式、往复式两种。
（
2
）外室应有专用的
工作服、鞋、帽、口罩、手持喷雾器和
5%
石炭酸溶液、
70%
酒精棉球
等。
3.
培养室的灭菌、消毒
同无菌室的灭菌、消毒措施。
小规模的培养可不启用恒温培养室，而在恒温培养箱中进行。
（六）普通实验室
进行微
生物的观察、计数和生理生化测定工作的场所。室内的陈设因工作侧重点不同而
有很大的
差异。一般均配备实验台、显微镜、柜子及凳子。实验台要求平整、光滑，实验柜
要足以
容纳日常使用的用具及药品等。
（七）更衣室