-
GEN III
MicroPlate
TM
使用说明书
售后服务专线:
400-888-6211
电话:
传真:
Biolog GEN
III MicroPlate
使用说明书
1 / 11
主要用途
GenIII
微孔板使用固定在微孔板上的
94
个不同的生化试验来对广泛的革兰氏阳性和阴性细
菌提供表型概况并进行鉴定<
/p>
1,2
。
Biolog
< br>鉴定系统(
Microlog-M
,
MicroStation
,
Omnilog
?
)中的
软件通过读取
Ge
nIII
微孔板上所表现出的表型图谱来对细菌进行鉴定。
概述
?
BiologGenIII
微孔板可以对微生物进行
94
种表型测试,其
中包括:
71
种碳源利用测试
(图
p>
1
,
1-9
列)以
及
23
种化学敏感性测试(图
1
,
10-12
列)。微生物在测试板上所显<
/p>
示出的“表型指纹”被用来在种的水平上鉴定该微生物。
?
所有必
要的营养物质以及生化试剂都被预先填充、干化在
96
个孔中。
四唑类氧化还原
染料通过色度的变化来指示微生物对碳源的利用程度以及对化学物质的敏
感程度。
?
试验的操作过程非常简单,
如图
2
所示。
在平板
上按照常规方法划线分离需要鉴定的微
生物,然后将分离的到的纯种用棉签挑到接种液(
IF
)
3
中,
配成指定细胞浓度的菌悬
液。将菌悬液按每孔
100?
l
的量加到
GenIII
板后孵育,以便微生物代谢后产生表型指纹
图谱。所有的孔在刚开始的时候都是无色的
。当孵育一段时间之后,那些能被细胞利
用碳源的孔中的呼吸作用增强了。增强的呼吸作
用导致四唑氧化还原染料被还原,变
成紫色。而阴性孔则保持无色,就像没有碳源的阴性
对照孔(
A1
)一样。同样,还有
一个
阳性对照孔(
A10
)作为列
10-1
2
化学敏感性测试的参考。孵育后,通过显紫色孔
所产生的表型
指纹同
Biolog
数据库中的数据进行比较。如果找到匹配的
,所分离出来
的微生物在种的水平上得到鉴定。
Biolog GEN III
MicroPlate
使用说明书
2 / 11
A1
Negative
Control
阴性对照
B1
D-Raffinose
蜜三
糖
,
棉子糖
A2
Dextrin
糊精
B2
α
-D-Lactose
α
-D-
乳糖
A3
D-Maltose
D-
麦芽糖
B3
D-Melibiose
蜜二糖
A4
D-Trehalose
D-
海藻糖
B4
β
-Methyl-D-
Glu
coside
β
-
甲酰
-D-
葡糖
苷
C4
D-Galactose
D-
半乳糖
D4
myo-Inositol
肌醇
E4
L-Arginine
L-
精氨酸
F4
D-Gluconic
Acid
D-
葡糖酸
G4
L-Lactic Acid
L-
乳酸
H4
β
-Hydroxy-D,L<
/p>
ButyricAcid
β
-
羟基
-D,L
丁酸
A5
D-Cellobiose
D-
纤维二糖
B5
D-Salicin
D-
水杨苷
A6
Gentiobiose
龙胆二糖
B6
N-Acetyl-D-Glu
cosamine
N-
乙酰
-D-
葡糖
p>
胺
C6
D-Fucose
D-
果糖
D6
D-Glucose-
6-PO4
D-
葡糖
-6-
磷酸
E6
L-Glutamic
Acid
L-
谷氨酸
F6
Glucuronamid
e
葡糖醛酰胺
G6
α
-Keto-Glutaric
Acid
α
-
酮
-
戊二酸
H6
Acetoacetic
Acid
乙酰乙酸
A7
Sucrose
蔗糖
B7
N-Acetyl-
β
-DM
anno
samine
N-
乙酰
-
β
-D-
甘
露糖胺
C7
L-Fucose
L-
果糖
D7
D-Fructose-6-P
O4
D-
果糖
-6-
磷酸
< br>
E7
L-Histidine
L-
组胺
F7
Mucic Acid
粘酸;粘液酸
A8
D-Turanose
D-
松二糖
B8
N-Acetyl-D-
Gal
actosamine
N-
乙
酰
-D-
半乳
糖胺
C8
L-Rhamnose
L-
鼠李糖
D8
D-Aspartic Acid
D-
天冬氨酸
E8
L-Pyroglutamic
Acid
L-
焦谷氨酸
F8
Quinic Acid
奎宁酸
A9
Stachyose
水苏糖
B9
N-AcetylNeuram
inic Acid
N-
乙酰神经氨酸
C9
Inosine
肌苷
D9
D-Serine
D-
丝氨酸
E9
L-Serine
L-
丝氨酸
F9
D-Saccharic
Acid
糖质酸
G9
Bromo-Succinic
Acid
溴
-
丁二酸
H9
Formic Acid
甲酸
A10
Positive Control
阳性对照
B10
1% NaCl
A11
pH 6
B11
4% NaCl
A12
pH 5
B12
8% NaCl
C1
α
-D-Glucose
α
-D-
葡糖
D1
D-Sorbitol
D-
山梨醇
E1
Gelatin
明胶
F1
Pectin
果胶
C2
D-Mannose
D-
甘露糖
D2
D-Mannitol
D-
甘露醇
E2
Glycyl-L-Prolin
e
氨基乙酰
-L-
脯
氨酸
F2
D-Galacturonic
Acid
D-
半乳糖醛酸
G2
Methyl
Pyruvate
丙酮酸甲酯
H2
γ
-Amino-
Butryri
cAcid
γ
-
p>
氨基
-
丁酸
C3
D-Fructose
D-
果糖
D3
D-Arabitol
D-
阿拉伯醇
E3
L-Alanine
L-
丙氨酸
F3
L-Galactonic
Acid Lactone
L-
半乳
糖醛酸内
酯
G3
D-Lactic Acid
Methyl Ester
D-
乳酸甲酯
H3
α
-Hydroxy-
Butyric Acid
α
-
p>
羟基
-
丁酸
C5
3-Methyl
Glucose
3-
甲酰葡糖
D5
Glycerol
甘油
E5
L-Aspartic Acid
L-
天冬氨酸
F5
D-Glucuronic
Acid
D-
葡糖醛酸
G5
Citric Acid
柠檬酸
C10
1% Sodium
Lactate
乳酸钠
D10
Troleandomycin
醋竹桃霉素
E10
Lincomycin
林肯霉素
,<
/p>
洁霉素
F10
Vancomycin
万古霉素
C11
Fusidic Acid
梭链孢酸
D11
Rifamycin SV
利福霉素
SV
E11
Guanidine HCl
盐酸胍
F11
Tetrazolium
Violet
四唑紫
G11
Lithium
Chloride
氯化锂
H11
Sodium
Butyrate
丁酸钠
C12
D-Serine
D-
丝氨酸
D12
Minocycline
二甲胺四环素
E12
Niaproof 4
硫酸四癸钠
F12
Tetrazolium
Blue
四唑蓝
G12
Potassium
Tellurite
亚碲酸钾
H12
Sodium Bromate
溴酸钠
G1
p-Hydroxy-
Phenylacetic
Acid
p-
羟基
< br>-
苯乙酸
H1
Tween 40
吐温
40
G7
D-Malic Acid
D-
苹果酸
H7
Propionic Acid
丙酸
G8
L-Malic Acid
L-
苹果酸
H8
Acetic Acid
乙酸
G10
Nalidixic Acid
萘啶酮酸
H5
α
-Keto-Butyric
Acid
α
-
酮
-
丁酸
H10
Aztreonam
氨曲南
图
1
:微孔板测试布局
Biolog GEN III
MicroPlate
使用说明书
3 / 11
2
:检测步骤
Biolog GEN III
MicroPlate
使用说明书
4 / 11
图
试剂及耗材
?
MicroPlates
微孔板
:
Catalog No.1030- Biolog GEN III
MicroPlates (10/box).
?
Agar Culture
Media
琼脂培养基
: Catalog
No.71102-BUG Agar with 5% sheep blood
(
BUG+B
); Catalog
-M1012-
Chocolate Agar
;
Catalog No.70101- Biolog
Dehydrated
Growth Agar, 500 gm
(
BUGAgar
).
?
Inoculating
Fluid
接种液
:
Catalog
No.72401-
IF-A,
Catalog
No.72402-
IF-B,
Catalog No.
72403
- IF-C
.
?
Inoculatorz?
无菌一次性接种棉签
: Catalog No.3321-
Sterile disposable inoculator
swabs
(20x50); Catalog No.3323(100x1).
?
Streakerz
TM
木质无菌一次性接种棒
: Catalog
No.3025- Sterile disposable wooden agar
plate streakers (10x100);
CatalogNo.3026 (50x20).
?
Transfer
Pipets
无菌一次性移液管
: Catalog
No.3019- Sterile disposable 9 inch transfer
pipets.
?
Reservoirs
无菌一次性
V
< br>型加样槽
: Catalog No.3102- Sterile
disposable reservoirs.
?
Multichannel
Pipettes
多道移液器
:
Catalog No.3711- 8 channel electronic
pipettor.
?
Pipet
Tips
无菌移液器吸头
:
Catalog No. 3201- Sterile racked pipet
tips for Ovation
multichannel pipettor;
CatalogNo. 3001- Matrix multichannel pipettor
tips.
?
Turbidimeter
浊度计
:
Catalog No.3531- 110 volt model, Catalog No.3532
-220 volt
model, CatalogNo.3585 - 240
volt model.
?
Turbidity
Standards
标准比浊管
: Catalog
No.3441 - 85% T; Catalog No.3440 - 65% T.
选择恰当的规程(接种液及细胞浓度)
所有的规程都可按相同的方法操作,
只需跟居不同情况选择不同的接种液及细胞接种浓度。
?
规程
A<
/p>
用于大多数的菌株。
?
规程
B
适用于少部分强还原性的菌株和产芽孢的菌株(主要是气单孢菌
Aeromonas
,弧菌
Vibrio
,革兰氏阳性芽孢杆菌中的一些菌株)。这些菌株在使用接种液
A
时可能使
A-1
孔产
生假阳性。如
果发生这种情况,仅需使用规程
B
重新实验。
< br>
?
规程
C1
用于缓慢生长的菌,通常是在
BUG+B
生长
24
小时形成的菌落非常小(直径小于
1mm
)的细菌(图
2.d
)。这些主要是微好氧、嗜
CO
2
的革兰氏阳性球菌及微小杆菌(详见
表
1
)。
?
规程
C2
用于苛刻生长、
嗜
CO
2
、
对氧气很敏感的
细菌,
在
BUG+B
上生长非常缓慢或
根本不
Biolog GEN III
MicroPlate
使用说明书
5 / 11