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大鼠心理应激状态与咬肌活动的关系
【摘要】
目的建立大鼠心理应激动物
模型，
探讨心理应激下咬肌肌肉活动性的变化。
方法选取
48
只雄性
Wistar
大鼠，
随机分为实验组
(36
只<
/p>
)
和对照组
(12
只
)
。
对实验组大鼠进
行心理应激刺激，建立应激动物模型并评价，于
3
、
6
、
12(
恢
复组
)
周时各处死
12
只，对照
组与恢复组一同处死。分别检测大鼠咬肌中肌酸激酶
< br>(CK)
、乳酸脱氢酶
(LDH)
和
反应蛋
白
(CRP)
的含量。
结果经评价大鼠应激模型构建有效。
刺激前
后各组咬肌中酶的含量有变化，
其中
3
周组、
6
周组和恢复组
CK
、
LDH
含量均明显高于对照组，恢复组
CK
、
LDH
含量又<
/p>
明显高于
3
周组和
6
周组
(P<0.05)
，其余组与
组之间无明显差异
(P>0.05);CRP
含量恢复组
明显高于
3
周组、
6
周组和对照组
(P<0.01)
，而其
余各组间无明显差异
(P>0.05)
。结论大鼠
心理应激状态下咬肌肌肉活动性有变化。
大鼠应激状态恢复后，
咬肌中酶含量持续升高，
可
能出现了炎症反应。
【关键词】
心理应激
;
大鼠
;
咬肌
;
肌酸激酶
1
资料与方法
1.1
实
验动物及分组
48
只
Wistar
雄性大鼠，体重
(170±
10)g
，清洁级，
10
周龄，由新
< br>疆医科大学实验动物中心提供。
精神行为无异常，
行为学
评分相近。
随机分为实验组
36
只，<
/p>
对照组
12
只。实验组接受刺激
6
周，而后去除刺激，让其恢复
6
周。实验组按处死时间段
不同，分为实验
3
周组、
6
周组和恢复组
(12
周
)
，对照组和恢复组一同处死
。
1.2
建模方法和步骤
1.2.1
刺激方法对实验组大鼠给予足底电击、制动、气候箱、食物诱惑等刺激。
(1)
足部
电击：间隔刺激，通电持续
5
s
，间隔
30
s
，电压
40
V
，刺激时间
20~40 min
。<
/p>
(2)
制动：
大鼠放入铁桶内
,
刺激时间
40~60 min
< br>。
(3)
气候箱：
(
温度
6
℃、
36
℃交替，每
3
小时变换一
次
;
灯光明暗交替，每
1
小时变换一次
;
风机持续转动噪音约
100 dB)
刺激时间
12 h
< br>。
(4)
食物
诱惑：
(
食物装进敞口矿泉水瓶中，置于鼠笼上，可视可嗅，不易吃
)
刺激时间
16 h
。每天
选
用
2~3
种刺激方式。对照组不接受
任何处理，其它饲养条件同实验组。
1.2.2
模型评价指标
(1)
大鼠体重：
分别于实验前和实验各时间段称
量大鼠体重。
(2)
摄食
摄水量：测量
计算各组每只大鼠单位时间段内的平均摄食摄水量。
(3)
旷场
实验评分：
(
水平
活动得分
)
大鼠跨越
1
格记为
1
分，如动物沿斜线行走，以每
10
厘米为
1
分。
(
垂直活动得
分
)
以
动物双足离开地面为标志，无论动物站立多长时间直至放下双足为
1
分。记录每只大
鼠
5
min
内的活动情况。
1.3
咬肌中酶的测定按预定时间处
死大鼠后即刻解剖取咬肌，
以分析天平各称量
0.2 g
，
进行肌肉匀浆，以自动生化分析仪检测每份标本中肌酸激酶
(CK)
、乳酸脱氢酶
(LDH)
、
反应蛋白
(CRP)
含量
。
<
/p>
1.4
统计学处理应用
SPSS17.0
统计软件对数据进行处理。大鼠行为评价指标采用
t
检
验
;
酶含量总体比较采
用方差分析，组间两两比较采用
SNK
法，检验水准
α=0.05
。
2
结果
2.1
大
鼠精神状态观察对照组：大鼠精神状态良好，摄食摄水活跃，毛色光亮，大小便
正常且规
律。
实验组：刺激初期大鼠出现尖叫、全身肌肉收缩、乱跑乱
钻、大小便增多
,
上下牙齿打架等现象。刺激实施
3
周后，大鼠体型偏瘦小，摄食摄水减少
,
大小便增多，电
击出现对峙现象，旷场实验评分时躁动不安，鼻唇抖动频
繁。刺激实施
6
周后，与
3
周时
状态类似但有所加重，
在停止电刺激后，
用手拍打鼠笼或给予噪音，
亦出现大鼠对峙打架现
< br>象，精神极度紧张。刺激去除恢复
6
周后，大鼠的紧张状
态消失，行为表现与对照组无明
显差异。
2.2
大
鼠体重和旷场实验评分情况实验前两组大鼠的体重和旷场实验评分
(
水平活动和
垂直活动
)
均无统计学
差异
(P>0.05);
实验
3
周时间点，实验组大鼠体重明显低于对照组，旷
场实验评分均明显高于
对照组
(P<0.01)
。
实验
6
周时间点，
实验组大鼠体重明显低于对照组
，
旷场实验评分均明显高于对照组
(P<0.01)
。
且实验
6
周时间点时的
大鼠旷场实验评分均明显
高于实验
3
周
时间点
(P<0.01)
。
刺激去除恢
复
6
周后，
实验组大鼠体重和旷场实验
评分均无
差异
(P>0.05),
具体
情况见表
1
。
2.3
大
鼠摄食摄水量情况实验前
3
周内，
实验
组大鼠每日每只平均摄食量明显低于对照
组
(P<0.01)<
/p>
，
摄水量明显低于对照组
(P<0.05
)
。
实验
4~6
周内，
实验组大鼠每日每只平均摄
食摄水量均明显低于对照组
(P<0.01)
。实验
7~12
周内，实验组大鼠每日每只平均摄水量与
对照组无明显差异
(P>0.05),
具体情况见表
2
。
表
1
实验大鼠各时间点
体重和旷场实验评分情
况
(±
s)
检测指标实验组实验前
3
周时
6
周时
12
周时对照组实验
前
3
周时
6
周
时
12
周时体
重
(g)
表
2
实验大鼠各时间段摄食摄
水量情况
2.4
大鼠咬肌中酶含量情况
CK
、
LDH
的含量在对照组和各实验组中逐渐增高，在
4
组
中总体比较有统计学差异
(P<0.01)
。
其中实验
3
周组、
实验
6
周组
、
恢复组均明显高于对照
组
(P<0.
05);
恢复组明显高于实验
3
周组和
6
周组
(P<0.01);
其余组与组之间均无统计学差异
(P>0.05)
。
CRP
含量在
4
组中总体比较有统计学差异
(P<0.01)
。恢复组明显
高于实验
3
周
组、实验
6
周组、对照组
(P<0.01);
< br>其余组与组之间均无统计学差异
(P>0.05)
。
CK
、
LDH
和<
/p>
CRP
在各组中的含量见表
3
。表
3
实验组与对照组咬肌
CK
、
LDH
和
CRP
含量变化注：与
对照组相比，
*P<0.05
，
**P<0.01;
与恢复组相比，
#P<0.01
3
讨论
3.1
动物心理应激模型构建与评价
心理学动物模型的建立为研究应激与人类各种疾病之
间的联系提供了重要的客观依据。<
/p>
因为现实生活环境中应激源不仅仅只有一种，
采用多种应
激源能更好的模拟人在日常生活中遇到的应激事件，
并能避免实验动物对
单一应激源产生的
适应现象
[4]
。本
研究在制作心理应激动物模型时参考了文献
[5-6]
的方法，
综合选用间隔足
底电击、
铁瓶制动、
气
候箱和食物诱惑
4
种主要刺激方法，
以
期建立可靠的动物应激模型。
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