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早孕因子的生物学机制及其作用
[
10-04-21 14:23:00 ]
编辑:
studa20
作者:修晓
娜
,史远刚,关伟军,马月辉
【关键词】
早孕因子
早孕因子(
early pregnancy factor,
EPF
)是存在于妊娠早期母体血清
中的一种免疫抑制因子,被
认为是热休克蛋白家族成员伴侣蛋白
10
(
Cpn10
)
的同系物,在细胞外发挥效应,具有免疫抑制
和生长因子的作用,嗣后发现它
还对损伤修复过程及一些恶性肿瘤的生长起到支持作用。
可用玫瑰花环抑制试
验(
RIT
)做生
物学鉴定。但由于其检测方法
RIT
的复杂性及检测效率低等问
题,
EPF
的应用受到了极大限制。近
年随着单克隆抗体(
McAb
)技术的不断进
< br>展,
EPF
的检验不仅可作为人类及家畜超早期妊娠诊断
的指标,而且对预测流
产和早期胚胎死亡,迅速鉴定胚胎移植效果以及尽早评价公畜的繁
殖能力都有
重要意义。并且
EPF
对于
预测早期胚胎发育情况,帮助了解妊娠母体对胚胎的
识别、免疫耐受和受精检测等机制提
供了可能。我们希望能够制备出
EPF
特异
性
McAb
,用于超早孕诊断,以及流产和某些恶性肿瘤的
早期诊断及预后判断。
1
早孕因子的来源
长期以来,人们对
EPF
的来源及结构做了多方面的研究,认为有一种卵因
子在受精后开始诱导产生
EPF
。
Lash
等[
1
]在不同体外条件如
:
p>
胚胎培养基
(
ECM
)、血小板激活因子(
PAF
)及皮质颗粒释放培养基(
p>
CGRM
)下刺激动情
期小鼠的卵巢及输卵
管以观察是否有
EPF
的产生,并用
R
IT
检测,结果发现三
种情况均可检测到
EPF
活性,该作用可完全被
BN52021
(一种
PAF
拮抗剂)阻
断,
认为
PAF
即系这种由受精卵释放的促使
EPF
合成起始的卵因子。他们还发
现,卵巢对上述三种刺激
均有反应,而输卵管则无,表明了卵巢是产生
EPF
的
最初场所。
EPF
的产生具有两个阶段也是人们
所共同支持的观点,第一阶段为
着床前期,为了确定第二阶段是在着床时还是在囊胚期,
Lash
等[
2
]利用红
鹿受精卵在输卵管内转运时间较长这一特性,通过监测其血清内
EPF
活性变
化,证实
EP
F
的合成与囊胚形成密切相关。
Ito
等[
3
]对胎牛、小牛、动情期
牛及妊
娠期牛血清与体外受精的牛卵细胞进行共培养,用
RIT
检测<
/p>
EPF
活性,
结果显示
< br>EPF
活性来源于受精卵细胞。
Aranha
等[
4
]以
35S-
p>
蛋氨酸标记从孕
母体内获取的淋巴细胞并培养使其增生,发现在妊娠
期间淋巴细胞内蛋白合成
增加,经检测发现其中一种具有
EPF
活性的分子。实验组
35S-
蛋氨酸在
淋巴细
胞中含量明显高于对照组,且在妊娠前两个阶段呈逐渐增高的趋势,在妊娠晚
p>
期降到接近对照组的水平。表明
EPF
有可
能来源于孕妇外周血的淋巴细胞。有
学者利用类固醇激素诱导培养动情期小鼠卵巢及输卵
管检测是否有
EPF
合成,
以探知卵巢
激素对
EPF
合成的重要意义。发现在
17
β
-
雌二醇、孕激素及睾酮
存在条件下对动情期小鼠卵巢及输卵管进行培养,无
EPF
合成,而在
ECM
及
PA
F
条件下培养经
17
β
-
雌二醇、孕激素二者预处理的相同组织则可检测到
E
PF
活性,证实
EPF
的合成起始主要
依赖于一个合适的激素环境[
5
]。
2
早孕因子分泌机制和作用机制
2.1
分泌机制关于
EPF
的分泌机制已报道了几种假设,其中以
p>
Lash
等
及
Or
ozco
等的研究最为权威。
Lash
等[
6
]在不同体外条件如胚胎培养基
(
ECM
)、血小板激活因子(
PAF
)及皮质颗粒释放培养基(
CGRM
)
下刺激动情
期小鼠的卵巢及输卵管时,结果发现三种情况均可检测到
EPF
活性,该作用可
完全被
BN
52021
(一种
PAF
拮抗剂)
阻断,认为
PAF
即是这种由受精卵释放的
促使
< br>EPF
合成起始的“卵因子”。他们还发现,卵巢对上述三种刺激均有反
应,而输卵管则无,表明了卵巢是产生
EPF
的
最初场所。
Orozco
等[
7
]给成
年雌鼠注射合成的
PAF
,
1 h
内动物血清表现出
EPF
活性,推测源于胚胎的
PAF
可
能就是触发着床前产生血清
EPF
的动因。而在
ECM
及
PAF
条件下培养经
17
β
-
雌二
醇、孕激素二者预处理的相同组织,可检测到
EPF
活性,证实
EPF
的
合成起始主要依赖于一个合适
的激素环境。妊娠时产生的
EPF
的来源不同,早
期
EPF
(母体
EPF
p>
)系在植入(
pre-
implantation
)
及围植
入(
peri-
implantation
)时产生,而晚期(胎儿性
EPF
)则自围植入期开始一直
持续至
妊娠中期,但对附植前血清
EPF
的体内来源说法不一,而普遍认为
EPF
的产生
与卵巢、输卵管、受精卵、胎盘、垂体等有关。
2.2
作用机制在
EPF
作用机制的研究中,科学家们也做出了许多成
绩。
EPF
通过至少两种淋巴因子
EP
F-S1
和
EPF-S2
的调节发挥作
用,前者是受主要
组织相容性复合物(
MHC
< br>)限制的,后者不受
MHC
的限制,并且已经分离纯化出
EPF-S1
的类似物,具有生物活性,
EPF-S1
可诱导产生
EPF-S2
。现在普遍认为
EPF
是热休克蛋白家族成员伴侣蛋白
10
(
Cpn10
)
的同系物,但
Somodevilla
Torres
等[
8
]证实
Cpn1
0
和
EPF
在作用机制上有区别。在<
/p>
Lewis
鼠的皮肤移
植实验中,在移植
部位注射
rEPF
后,能延长皮肤的存活时间,表明
EPF
具有免
疫抑制的调节作用,抑制了机体的免
疫排斥作用[
9
]。
Zhang
等用
rEPF
处理
患
有脑脊髓炎(
exper imental autoimmune encephal
omyelitis
,
EAE
)的小<
/p>
鼠,进行分析检测,发现
EPF
抑制了细
胞调节的免疫反应,并可减少中枢神经
系统的淋巴细胞和巨噬细胞,提出
EPF
可呈剂量依赖性地抑制混合淋巴细胞反
应(
p>
MLR
)的识别相,
EPF
也可诱导非黏附性的
Thy12+
、
Lyt-
、
Lyt2+
调节细
胞(即抑制细胞),
EPF
的免疫效应不受
MHC
所限制
,小鼠在胚胎植入前给予
抗
EPF
抗体
,可减少植入数,提示
EPF
在生殖过程的这一阶段具有重要意
义。
EPF
有调节
CD4+T
细胞依赖的免疫反应作用[
10
,
11
],抗
CD4+
能抑制
绵羊红
细胞和其在
T
细胞上受体的相互
作用,
EPF
是通过抗
CD4+
来发挥其抑制作用
的。在小鼠实验中表明它具有抑制迟发型过敏反应,
并发现它会对一些淋巴细
胞有约束作用,推测它通过约束
CD4
+T
细胞来发挥作用。经分离
T
细胞和
单核
细胞,并用
EPF
标记,发现
p>
EPF
会约束
CD4+
、
CD8+
、
CD14+
和
CD56+NK
细胞,
但是
EPF
作用的细胞表面分子仍没有研究清楚。
3
早孕因子的生物学作用
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