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人体口腔中变形链球菌诱发龋齿的讨论
摘要：
近年口腔问题也成为人们越发关注的方面，
龋病是危害人类口腔
健康最普遍的疾
病，
已把龋病列为癌
症和心血管疾病之后的第三大重点防治疾病
。国内龋病的发生率呈
上升趋势，而发病的年龄在逐渐降低，发病类型多为窝沟龋
。研究表明，变形链球菌群
（
mutans streptococci
< br>，
MS
）
是人和动物主要致龋菌
，
但从人类口腔内主要检测出的
MS
主
要
是变形链球菌（
streptococcus
mutans
，简称变链菌）
。该文的目的，在于综
述口腔中变链
菌的分离和鉴定方法。从标本的取样、收集、分离、鉴定的步骤入手进行试
验，并对实验结
果展开讨论分析，进一步分析现状和提出自己的看法。
< br>
关键词：
龋齿、变形链球菌、分离、鉴定、综述
[2]
[1]
[1
]
1
、简介
据报道人体的口腔内含有
700
多种细菌
，人类口腔中始终存在唾液
,
牙齿萌出或清洁
后不久
,
唾液中的大量蛋白类物质可以选择性吸附于牙
釉质表面
，唾液是一种天然的“万
能培养基”，含有各种无机物
，可影响离子强度、渗透压等，提供微生物生长的环境或刺激
其生长。口腔内有需氧，兼
性厌氧和专性厌氧（严格、温和、微厌氧、嗜二氧化碳菌，不同
的人群不同的病变类型存
在的细菌也不同
。
细菌易停留在口腔内不易清洁的区域附着并生
长，
不同的细菌对口腔内各表面的粘附能力不同，
故生长的区域也会不同。
通常口腔内的微
生物处于平
衡状态，
细菌之间相互制约、
相互依存，
这种关系的平衡使得人体口腔维持正常
的生理状态，列如，变形链球菌（
）能产生乳酸而韦荣氏菌（
veillonella
）及真杆菌
又能能利用乳酸作为部分能量来源；
口腔微生物之间还存在着拮抗作用，
能大量分离出放线
共生嗜血杆菌的龈下菌斑中，
很少甚至于不能分离出菌斑固有的菌丛
----
血链球菌和乳房链
球菌，相反，能够分离出血链球
菌和乳房链球菌的部位，几乎不能分离出
H.a
菌。总之，在<
/p>
一个群体中，这些细菌独立存在，但相互之间密切相关。
口腔内的细菌平衡状态被破坏就会引发一些疾病，例如龋齿，也就是我们常说的虫牙，
早期无自觉症状，逐步加深，会有冷热水敏感饮食疼痛等，龋坏达牙神经时，会有自发性疼
痛产生。龋齿的发病率很高，致病的四联因素：细菌、食物、宿主、时间
，通俗的说就是
口腔内的清洁不彻底，
后牙槽较难清洁容易造
成残留食物残渣的堆积，
长此以往在细菌的作
用下就会形成小黑
点也就是虫牙。
本文根据该菌的生态学、
生理生化的特点及一系列实验，
分析了与变链菌耐酸、
附着
部
位、致病性等。初步探讨了变链菌引发龋齿的原因及引起人们对龋病预防的重视
。
[5]
[7]<
/p>
[7]
[4]
[3]
2
、研究现状
研究表明，变形链球菌群（
mutans
streptococci
，
MS
）是人和动物主要致龋菌，但从人
类口腔内主要检测出的
MS<
/p>
主要是变形链球菌（
streptococcus
mutans
，简称变链菌）
。致
< br>病能力在于能利用蔗糖合成细胞外多糖，
粘附于牙齿表面，
参与菌斑的形成，
同时产酸使牙
齿表面脱矿而引起龋病
[2]
。当此菌超过一定数量即有致龋的可能，所以，临床上常以其为
指
[6]
示菌预防检查龋的活动性
[2
]
。变形链球菌的分离可从龋病患者的口腔中获取，根据变形链球
菌的形态特点进行外观上的判断，
再根据其生理生化性质等特点进行生化鉴定，
分析实验结
果就可以对变链菌进行判断。
2.1
变形链球菌的获取
口腔细菌对口腔内不同部位具有选择性粘附的能力，
研究表示唾液中常见革
兰氏阴性球
菌，
由于唾液的特殊性在统计学上有显著差异，
牙齿上已革兰氏阳性菌为主，
舌背部革兰氏
阴性、
阳性球菌均有单位出现杆菌。
革兰氏阳性菌牙表面分布居
多，
其次为舌背部和唾液中，
革兰氏阴性菌反之
[7]
。变链菌对牙面羟磷灰石有很高的亲和力，
因此
牙面是变链菌在口腔内
的主要定居部位，
牙菌斑上通常是杆菌的
定居部位。
因此在细菌的获得上选择患者患有龋齿
的牙面部位小
心涂抹。
2.2
细菌标本的培养
将不同浓度的菌液分别接种于
MSBA
培养平板上。
在
MSBA
培养基中，含抗菌肽它能
特
异地抑制细胞壁合成的脱磷酸化过程，
影响磷脂载体的转运及向细胞壁支架输送粘肽，<
/p>
还
可与敏感菌的细胞膜结合，损伤细胞膜，导致离子外流
。因此对葡萄球菌，化脓性链球菌
等革兰氏阳性菌有较强的杀菌作用，加
上高浓℃的蔗糖抑制了口腔链球菌群的大多数的生
长，如唾液链球菌，血链球菌等
。将接种好的平板放入厌氧培养箱培养
48-72
小时后，对
菌落从大小、形状、厚度、边缘、颜色、表面、透明度、粘度这几个形态
方面观察培养基上
细菌生长情况。
仔
细观察初代培养平板上的菌落，
挑选变形链球菌典型菌落：
深蓝
色嵌顿，
粗糙，
质硬，
边缘不齐，
突起状。
取少量涂片进行革兰氏染色，
在油
镜下镜检为紫色，
长链或短链小球状。
将此类典型细菌分离出来
接种于
MSA
培养基上，在设置相同的厌氧培养箱中进行次代纯
培
养，此时获得的纯种变链菌再次镜检并进行生化鉴定。
2.3
变形链球菌的鉴定及结论
2.3.1
糖发酵实验
变形链球菌族能发酵葡萄糖、
乳糖、
菊糖等糖类，<
/p>
使其产生有机酸，
指示剂呈酸性反应，
发
酵管发生颜色变化。
在糖发酵实验中，
若细菌能分解糖产酸，<
/p>
则培养基中的指示剂呈酸性
反应（溴甲酚紫呈黄色），实验结果为
阳性，反之指示剂颜色未发生变化则表示为阴性。
2.3.2
甘露醇、山梨醇发酵实验
变形链球菌族能发酵甘露醇和山梨醇产酸，
使培养基颜色发生改
变，
而其它口腔链球菌
则不能。
该实验
利用口腔中只有变形链球菌能发酵甘露醇和山梨醇使其产酸这一特性，
使微
量发酵管中培养基的颜色发生改变（紫色变为黄色），实验结果为阳性，
反之
指示剂颜色未
发生变化则表示为阴性。
2.3.3
耐酸性实验
口腔变形链球菌能在酸性极低的环境下继续发酵底物并产酸，
通过改变发酵管
的酸性梯
[8]
[2]
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