-
第十九章
肠杆菌科及检验
本章考点：
1.
概述
（
1
）概念
（
2
）命名与分类原则
（
3
）共同
特点
（
4
）自然与人体内的分布
（
5
）微生物学检查方法
（
6
）临床
意义
2
.
埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属
（
1
）生物学性状
（
2
）微生物学检查法
（
3
）临床意义
一、概述和通性
（一）概念
肠杆菌科是由多个菌属组成，其<
/p>
生物学性状相似
，均为
革兰阴性杆菌
。大多数肠道杆菌属于
正常菌群
，
作为条件致病菌而引起疾病。其中包括常引起腹泻和肠道感染的细菌（埃希菌属、志贺菌属、沙门
菌属、
耶尔森菌属）和常导致院内感染的细菌（枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、
多源菌属、沙雷菌属、
变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属），以及一些在一定条件下
偶可引起临床感染的细菌。
（二）分类
根据《伯杰系统细菌学手册》（
19
84
年）将肠杆菌科的细菌分为
20
个
属即埃希菌属、志贺菌属、沙门
菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属
、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、
变形杆菌属、摩根菌屑、耶尔森菌属等
。
（三）生物学特性
1.
形态与染色
革兰阴性杆菌，其菌体大小为（<
/p>
1.0
～
6.0
）
μ
m×（
0.3
～
1.0
）
μ
m
。多数有周鞭毛，除外志贺菌属、
克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和
EIEC
无鞭毛。均不形成芽
胞，少数菌属细菌可形成荚膜。
2.
培养：
需氧或兼性厌氧
，
营养要求不高
，在普通琼脂培养基和麦康凯培养
基上均能生长并形成中等
大小的
S
型菌
落
，
液体培养基中呈混浊生长
。
3.
生化反应：
发酵葡萄糖产酸、产气，
乳糖发酵试验
:
肠道非致病菌（＋）
，肠道致病菌（－）
（除
外变形杆菌）。
肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性
，
氧化
酶阴性
，
硝酸盐还原试验阳
性
。
4.
抗原构造：
包括
菌体（
O
）抗原
，
鞭
毛（
H
）抗原
和
表面抗原
（如
Vi
抗原、
K
抗原）
3
种。
5.
变异：
包括菌落
S
～
R
变异
，
鞭毛
H
～
O
变异
和耐药性或生化反应性质的改变。
6
。抵抗力：
不强。加热
60℃，
30
分钟即被杀
死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受
力，
能耐
胆盐
。
（四）致病性
肠杆菌科细菌种类多，可引起多种疾病：
1.
致病
性肠道杆菌：以
肠内感染
为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠
道感染、食物中毒、旅游者腹
泻及肠热症等。
2.<
/p>
条件致病菌：为
医院感染主要病原菌
，出
现移位感染。
（五）微生物学检验
1.
分离培养：
将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离；血、尿或脓汁等
其他标本原则上不使用选择培养基。分离纯菌后，根据菌落特点，结合革兰染色及氧化酶反应结果作进一
步鉴定。
2.
鉴定
（
1
）初步
鉴定：原则是：①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化
-
发
酵试验及氧化酶试验与弧菌
科和非发酵菌加以鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙
氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科
的细菌分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐
利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反
应进行属种鉴别。
表
5-19-1
肠杆菌科的初步分类
菌属名
苯丙氨酸
葡萄糖酸盐
变形杆菌属
＋
－
普罗威登斯菌属
＋
－
摩根菌属
＋
－
克雷伯菌属
－
＋
肠杆菌属
－
*
＋
*
沙雷菌属
－
＋
哈夫尼亚菌属
－
＋
埃希菌属
－
－
志贺菌属
－
－
沙门菌属
－
－
枸橼酸杆菌属
－
－
爱德华菌属
－
－
耶尔森菌属
－
－
*
有例外
将选择培养基或鉴别培养基上的可
疑菌落分别接种克氏双糖铁琼脂（
KIA
）和尿素
-
靛基质
-
动力（
MIU
）
复合培养基管中，并根据其六项反应结
果，将细菌初步定属。
（
2
）最后
鉴定：肠杆菌科各属细菌的最后鉴定是根据生化反应的结果定属、种，或再用诊断血清做凝
集反应才能作出最后判断。
二、埃希菌属
（一）概念
埃希菌属包括
5
个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临
床最常见的是大肠埃希菌。
大肠埃希菌俗称大肠杆菌，大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群
。
（二）生物学特性
（性状）
1.
形态
与染色：
为革兰阴性短杆菌，（
1.0
～
3.0
）
μ
m×（
0.4
～
0.7
）
μ
m
。多数有周鞭毛，能运
动。
有菌毛、荚膜及微荚膜。
2.
培养特性：
兼性厌氧菌，营养要求不高，在
普通营养肉汤
中呈浑浊生长
。
普通营养琼脂
上呈灰白色
的光滑型菌
落。
血琼脂平板
上，少数菌株产生溶血环。在
< br>伊红美蓝琼脂
上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色
并有金属
光泽。
麦康凯和
SS
琼脂
中的胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。
3.
生化
反应：
吲哚、甲基红、
V-P
、枸橼酸
盐试验（
IMViC
试验）为
++--
（
肠杆菌属多为
--++
）。克氏
双糖铁琼脂
（
KI
A
）
上斜面和底层均产酸产气，
H
2
S
阴性。
动力、
吲哚、
尿素
（
MIU
）
培养基的生化反应为
++-<
/p>
。
4.
抗原结构：
大肠埃希菌的抗原由菌体抗原
（
O
）、表面抗原（
K
）和鞭毛抗原（
H
）三种构成。现已知
有
171
种
O
抗原，
100
种
K
抗原和
56
种
H
抗原。一个菌株的抗原类型由特殊的
0
、
K
和
H
抗原的代码表
示，
其血清型别的方式是按
0
：
K
：
H
排列，例如<
/p>
0111
：
K58
（
B4
）：
H2
。
（二）致病性
主要是
侵袭力、内毒素、肠毒素
等致病因素引起各种炎症（如胆囊炎、泌尿系感染、肺炎、新生儿脑
膜炎、伤口感染、菌血症及腹泻等）。内毒素还可引起发热、休克、
DIC
等。
1.
肠道外感染：
主要由正常菌群条件致病，以泌尿系
统感染常见，高位严重尿道感染与特殊血清型大
肠埃希菌有关。如菌血症、胆囊炎、腹腔
内脓肿。
2.
肠道感染：
致病性大肠埃希菌有下列五个病原群。
（
1
）肠产毒型大肠埃希菌（
ETEC
）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水样泻）。
（
2
）肠致
病型大肠埃希菌（
EPEC
）：主要引起婴儿腹泻。
（
3
）肠侵袭型大肠埃希菌（
EIEC
< br>）：可侵入结肠黏膜上皮，引起志贺样腹泻（能产生粘液脓血便）。
（
4
）
肠出血型大肠埃希菌
（
< br>EHEC
）
：
又称产志贺样毒素
（
VT
）
大肠
埃希菌
（
SLTEC
或
UTEC
）
，
其中
O157
：
H7
可引起出
血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（
HUS
）。临床特征为严重的
腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴
发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。
（
5
）肠粘附（集聚）型大肠埃希菌（
EAggEC<
/p>
）：也是新近报道的一种能引起腹泻的大肠埃希菌。
3.
CD
C
将大肠埃希氏菌
O157
：
H7
列为常规检测项目
EHEC
的血清型
>50
种，最具代表性的是
O
157
：
H7
。在北美许多地区，
O157
：
H7
占
肠道分离病原菌的第
二或第三位，是从血便中分离到的最常见的病原菌，分离率占血便的
40%
，
6
、
7
、
8
三个月
O157
：
H7
感染
的发生率最高。且
0157
是<
/p>
4
岁以下儿童急性肾功衰的主要病原菌，所以
CDC
提出应将大肠埃希氏菌
0157
：
H7
列为常规检测项目。
（三）微生物学检验
1.
标本采集：
肠道感染可采集粪便；肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆
汁、脑脊液、痰、分泌液等。
2.
检验方法及鉴定
（
1
）涂片与镜检：脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性杆菌，可初步报告染色、形态、性状供临
床用
药参考。
（
2
）分离
培养：粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，取可疑菌落进行
形态观察及生化反应。
（
3
）鉴定
1
）初步鉴定：根据菌落特征，涂片染色的菌形及染色反应，取纯培养物作生化反应。凡符合<
/p>
KIA
：
A
／<
/p>
A
或
K
／
A
、产气或不产气、
H
2
S-
；
MIU
：
动力
+
或
-
、吲哚
+
、脲酶
< br>-
；氧化酶
-
，
IMViC:
++--
，可鉴定为大肠
埃希菌。
2
）致病性大肠埃希菌
:
EPEC
的鉴定：
EIEC
的鉴定：应与志贺菌相鉴别，两者的主要鉴别试验可用醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产
< br>酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性，而志贺菌均为阴性。
ETEC
毒素的检测：采用改良
Elek
法测定
LT
并采用乳鼠胃内灌注法检测
ST
。
EHEC
的血清学鉴定：
EAEC
的鉴定：检测细菌对
HEP-2
细胞或
Hela
细胞的粘附性。
肠道外感染，
经涂片染色，
分离培养后，
生化鉴定到种；
由于
大肠埃希菌是超广谱
β
-
内
酰胺酶
（
ESBLs
）
的主要产酶株
，该酶由质粒介导。
对
< br>ESBLs
产酶株所致感染需要采用碳青酶烯类或内酰胺类抗生素／酶抑
制剂或头霉菌素类进行治疗。
肠道内感染还需做血清分型、毒素测定或毒
力试验。食物、饮料、水等卫生
细菌学检查，主要进行大肠菌群指数检测。
三、志贺菌属
志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。
根据生化反应与血清学试验该属细菌分
为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。
CDC
分类系统（
1989
）将生化性状相近的
A
、
B
、
C
群归为一群，统
称为
A
、
B
、
C
血清群，将鸟氨酸脱羧酶和
β
-
半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。我国以
< br>福氏和宋内
志贺菌
引起的菌痢
-
最为常见。
（一）生物学特性
1.
形态
与染色：
革兰阴性短小杆菌，（
2
～<
/p>
3
）
μ
m×（<
/p>
0.5
～
0.7
）
μ
m
，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有
菌毛。
2.
培养特性：
需氧或兼性厌氧，液体
培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和
SS
培养基上形成中等
大
小、半透明的光滑型菌落，
宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌
落
。
<
/p>
3.
生化反应：
志贺菌属的细菌
KIA
：
K
／
A
、产气
-
／
+
、
H
2
S-
，
MIU
：
动力
-
、吲哚
+
／
-
、尿酶
-
，氧化酶
-
，
不产生赖
氨酸脱羧酶，氧化酶试验阴性。
4.
抗原结构：
志贺菌属只有
O
抗原而无鞭毛抗原，个别菌型及新分离菌株有
K
抗原。
（二）致病性
致病物质：
侵袭力
：
菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞，诱导细胞内吞。
内毒素
：破坏肠粘膜；肠壁通透性；
肠壁植物神经——腹痛，腹泻，里急后重，粘液脓血便。
外毒素（志贺毒素，
ST
）
：肠毒素活性；细胞毒活性；神经毒活性
所致疾病：细菌性痢疾，简称菌痢。
1.
急性菌痢。
2.
中毒性菌痢。
3.
慢性菌痢。
传染源为病人和带菌者，经粪口传播。
（三）微生物学检验
1.
标本采集
尽可能在发病早期及治疗前采集新
鲜粪便，选择
脓血便或粘液便
，必要时可用肛拭子采集。
2.
检验方法及鉴定
（
1
）分离培养：取粪便（粘液或脓血部分）或肛拭标本接种
GN
肉汤增菌及再进行分离培养。一般同
时
接种强弱选择性不同的两个平板
。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺
菌选择培养基（
SS
）；弱选择培养
基
可用麦康凯或中国蓝培养基。培养
18
～
24h
后选取可疑菌落进行下列鉴定。
（
2
）鉴定
1
）初步
鉴定：挑选可疑菌落
3
～
4
个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝
集试验阳
性的菌落至少接种
2
～
3
支
KIA
和
MIU
，
经
35
℃培养
18
～
24h
，<
/p>
凡符合
KIA
：
K
／
A
、
产气
-
／
+
、
H
2
S-
，
MIU
：动力
-
、吲
哚
+
／
-
、尿
酶
-
，
并结合试探性玻片凝集试验阳性
结果可鉴定为志贺菌属。
2
）最后鉴定
3.
与类
志贺邻单胞菌和伤寒沙门菌的鉴别：
可用
动力和氧化酶试验
加以鉴别，
志贺菌均为阴性，而类
志贺邻单
胞菌为阳性。
伤寒沙门菌
硫化氢和动力阳性
，能与沙门菌属因子血清（
0
多价
A-F
群或
Vi
）凝集
而不与志贺菌属因子血清凝集。
（四）防治原则
人工主动免疫用于预防目前尚不理
想，治疗细菌性痢疾一般首选
氟喹诺酮类抗生素
。
四、沙门菌属
（一）生物学特性
1.
形态
与染色：
本属菌为（
0.7
～
1.5
）
μ
m×（
2.0
～
5.0
）
μ
m
，无芽胞，无荚膜的革兰阴性直杆
菌。
除鸡沙门菌外都有周身鞭毛，能运动，多数有菌毛。
2.
培养
特性：
营养要求不高，在普通琼脂培养上即能生长，在液体培养基中呈均匀混浊。在
SS
琼脂和
麦康凯琼脂培养基上
35℃～37℃
24h
可形成直径约
2
～
4mm
的透明或半透
明菌落，对胆盐耐受。产
H
2
S
者在
SS
琼脂上形成黑色中心
。
3.
生化反应：
除亚利桑那菌外均
不能发酵乳糖，
大多数
IMViC
试验
为
-+-+
，
KIA
< br>：
K
／
A
、
产气
+
／
-
、
H
2
S+
／
-
，
MIU
：动力
+
、吲哚
-
、脲酶
+
。
4.
抗原结构：
主要由
0
抗原和
H
抗原组成，部分菌株有类似大肠杆菌
K
抗原的表面抗原，与
细菌的毒
力有关，故称
Vi
抗原
。
（
1
）
0
抗原：即菌体抗原。沙门菌属的菌体抗
原有
58
种，以阿拉伯数字依次标记：根据沙门菌有共同
的
O
抗原这一特点，
分类学者将有共同抗原的细菌归为一组，
这就使沙门菌分成
42
个群
（或组）
。
即
A
、
B
、
C……Z
和
O16
～
O67
群。每群都有群特异性抗原，如
< br>A
群
O2
、
B
群
04
、
D
群
O9
等。
（
2
）
H
抗原：即鞭毛抗原。
H
抗原是定型的依据
。
沙门菌
H
抗原有两相，
第一相为特异性抗原，
用
a
、
b
、
c……表示；
第二相为共同抗原，
用
1
、
2
、
3……
表示。
（
3
）表面
抗原：已证实沙门菌属有
Vi
、
M
和
5
抗原三种。
V
i
抗原加热
60℃30min
或经石炭
酸处理被破
坏，其存在时可阻止
0
抗原
与相应抗体发生凝集。
5.
变异性
（
1
）
S
～
R
变异，菌落光滑型经人工培养传代后逐渐变成粗糙型。此时菌体表面的特异多糖抗原丧失，
在生理盐水中可出现自凝。
（
2
）
H
～
O
变异，指有
鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。
（
3
）相位变异，具有双相
H
抗原（第Ｉ相为特异相，第Ⅱ相为非特异相）的沙门菌变成只有其中某一
相
H
抗原的单相菌，称相位变异。
（
4
）
V
～
W
变异，失去全部
Vi
抗原
的变异。
（二）致病性
致病因素有
侵袭力、内毒素和肠毒素
3
种。临床上可引起胃肠炎、肠热症、菌血症或败血症等。其中
肠热症属法定传染病。
1.
肠热
症：
即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状。为法定传染病之
一。
常见。
3.
慢性肠炎：
沙门菌可引起老人和儿
童的慢性肠炎。
4.
败血症：
多由猪霍乱沙门菌引起。
5.
< br>沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。
有鼠伤寒沙门菌引起儿童的医院感染报道。
（三）微生物学检查
2.
食物
中毒：
引起食物中毒的沙门菌以鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门
菌为
1.
标本采集：
根据不同疾病采取不同的标本进行分离与培养。
肠热
症的第一、二周采血液，第二、三
周采粪便与尿液
。
整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高
。食物中毒采集食物与粪便。
2.
检查方法及鉴定
（
1
）分离培养
1
）粪便：一般将粪便或肛拭直接接种于
SS
和麦康凯平板上，用两种培养基的目的是为提高标本的阳
性检出率。
2
）血液和骨髓：抽取患者血液
5ml
或骨髓
0.5ml
，立即接种于含
0.5%
胆盐肉汤或葡萄糖肉汤
5ml
试管
中进行增菌，
48h
将培养物移种
到血平板和肠道鉴别培养基上，
若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。
对增菌培养物连续培养
7
天，仍无细菌生长时，则
报告阴性。
3
）尿液：取尿液
2
～
3ml
经硫磺酸盐肉汤增菌后，再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行
分离培
养，亦可将尿液离心沉淀物分离培养。
4
）局部感染的脓液。
（
2
）鉴定：沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同，须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。
1
）初步鉴定：如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验，阴性时，挑取可疑菌落分别移种于
KIA
和
MIU
上。
并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。
凡符合
K
IA
：
K
／
A
、产气
+
／
-
、
H
2
S+<
/p>
／
-
、
MIU<
/p>
：动力
+
、吲哚
-
、脲酶
+
，氧化酶
< br>-
，触酶
+
，硝酸盐还原
+
，
以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性，
鉴定为沙门菌属。
2
）最后鉴定：沙门菌血清学鉴定主
要借助于沙门菌
O
抗原多价血清与
O<
/p>
、
H
、
Vi
抗原的单价因子血清。
甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门
菌分别属于
A
、
B
、
D
血清群。
（
3
）血清学诊断：
肥达试验：
用已知的
伤寒沙门菌
0
、
H<
/p>
抗原，甲乙丙副伤寒沙门菌
H
抗原稀释后
与
被检血清作定量凝集试验，以检测患者血清中抗体的含量，来判断机体是否受沙门菌感
染而导致肠热症并
判别沙门菌的种类。
（四）防治原则
加强饮食卫生，防止污染食品及水源经口感染，携带者的积极
治疗，皮下注射死菌苗或口服减毒活菌
苗是预防沙门菌属细菌传染的几个主要措施。临床
治疗是根据体外药敏试验结果选用合适抗生素，保持水
及电解质的平衡，对并发症积极处
理，如肠出血、肠穿孔、胆囊炎、心肌炎等。对于伤寒沙门菌感染，可
选择的抗生素有<
/p>
氯霉素、氟喹诺酮类、氨苄西林、复方新诺明、三代头孢
等。
五、变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属
变形杆菌属包括四个种，即普通变
形杆菌、奇异变形杆菌、产粘变形杆菌和潘氏变性杆菌。普罗威登
斯菌属有四个种：即产
碱普罗威登斯菌、斯氏普罗威登斯菌、雷极普罗威登斯菌和
ianii
< br>。摩根菌
属只有一个种，即摩根摩根菌。
这三个属的细菌为肠道寄居的正常
菌群，在一定条件下能引起各种感染，也是医源性感染的重要条件
致病菌。
（一）生物学特性
1.
形态与染色：
< br>为革兰阴性杆菌。两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状，有周身鞭毛，运动活
泼；
摩根菌属的部分菌株在
30℃以上培养条件下不形成鞭毛
，无芽孢，无荚膜。
2.
培养：
需氧或兼性厌氧，对营养无特殊要求，生长温度
10℃～43℃。
在营养琼脂和血琼脂平板上普
通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长
现象
，即迅速形成波纹状薄膜而布满整个平板培
养基表面。普罗
威登斯菌和摩根菌无迁徙生长现象。在含有胆盐的培养基表面菌落呈扁平、圆形、半透明。
在含有铁或铅离子的培养基中产硫化氢菌株的菌落中心呈黑色。
SS
< br>培养基上有与沙门菌、志贺菌相似的菌
落特征。在液体培养基中迅速生长，早期培
养物呈混浊，可有部分沉淀。
<
/p>
3.
生化反应：
三属菌共同特点是氧化酶
阴性，苯丙氨酸脱氨酶阳性的革兰阴性杆菌。
三属菌的区别：见下表。
迁徙生长
硫化氢产生
液化明胶
酯酶
鸟氨酸脱羧酶
枸橼酸盐利用
变形杆菌属
+
+
+
+
-
-
普罗威登斯菌属
-
-
-
-
-
+
摩根菌属
-
-
-
-
+
-
变形杆菌属的种鉴别：普通变形
杆菌靛基质和麦芽糖均阳性，鸟氨酸脱羧酶阴性；奇异变形杆菌
靛基质和麦芽糖均阴性，
鸟氨酸脱羧酶阳性；产粘变形杆菌靛基质和鸟氨酸脱羧酶均阴性，麦芽糖阳性。
普罗威登斯菌属的种鉴别：产碱普
罗威登斯菌尿素和蕈糖均阴性，侧金盏花醇阳性；斯氏普罗威登斯
菌尿素可阴性可阳性，
蕈糖阳性，侧金盏花醇阴性；雷氏普罗威登斯菌尿素和侧金盏花醇均阳性，蕈糖阴
性。<
/p>
（二）致病性
1.
变形杆菌属：
< br>普通变形杆菌和奇异变形杆菌引起尿道、创伤、烧伤的感染，
引起的尿路感染仅次
于
大肠埃希菌
。普通变形杆菌还可引
起多种感染及食物中毒；奇异变形杆菌还可引起婴幼儿肠炎。
本菌属细菌具
O
抗原及
H
抗原，
普通变形杆菌
OX
19
、
OX<
/p>
2
、
OX
k
的菌体抗原
与某些立克次体有共同抗原，
这
就是
外
-
斐（
Well-Felix
）反应
，是用以诊断某些
立克次体病
的依据。
2.
普罗威登斯菌属：
本属菌可引起烧伤、创伤与尿道感染。
3.
摩根菌属：
本属细菌为医源性感染的重要病原菌之一。可致泌尿道感染和伤口感染。
（三）微生物学检验
1.
标本采集：
根据病情采集尿液、脓汁、伤口分泌物及婴儿粪便等。
2.
检验方法及鉴定
（
1
）直接涂片：尿液、脑脊液、胸腹水等离心沉淀后，取沉淀物涂片；脓液和分泌液可直接涂片
，行
革兰染色后，观察形态及染色性。
（
2
）分离培养：将各类标本分别接种于血琼脂平板和麦康凯或伊红美蓝（
EMB
）琼脂平板；或
SS
琼脂
和麦康凯或
EMB
琼脂平板上，孵育
35℃～37℃18～
24h
后挑选菌落。为
了抑制变形杆菌属菌的迁徙生长，
可于血琼脂中加入石碳酸或苯乙醇，
< br>使其最终浓度为
1g
／
L
和
0.25%
，
这并
不影响其他细菌的分离。变形杆
菌属在血琼脂上呈迁徙生长，在肠道菌选择培养基上形成
不发酵乳糖菌落，在
SS
琼脂上常为有黑色中心的
菌落。
（
3
）鉴定：接种前述生化培养基，并作氧化酶试验
，进行此三个属和属、种鉴定。
六、耶尔森菌属
耶尔森菌属包括
11
个种，其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌肯定与人类致病
有关。
（一）鼠疫耶尔森菌
鼠疫耶尔森菌俗称鼠疫杆菌，是烈性传染病鼠疫的病原菌
。鼠疫是自然疫源性传染病，通过
直接接触
染疫动物或节肢动物叮咬而感染
。临床常见腺鼠疫、败血型鼠疫和肺鼠疫。
1.
生物学特征
（
1
）形态与染色：鼠疫耶尔森菌为革兰阴性杆菌，形态短而粗，两端钝圆，
两极浓染
，大小为（
1.0
～
2.0
）
μ
m×（
0.5
～
0.7
）
μ
m
。
有
荚膜，无鞭毛
，无芽孢。陈旧培养物或
3%
氯化钠琼脂培养基上呈明显多形
性。
（
2
）培养：需氧和兼性厌氧，在普通培养基上即可生长。
最适生长温度
是
28℃～30℃。培养基最适
pH
为
6.9
～
7.1
。
培养
16
～
18h
，用显微镜观察可见一层形状不一，浅灰色小菌落，这是鼠疫耶尔森菌培养
初期的菌落特征，这对本菌的鉴定有一定意义。在培养
24
～
48h
后可形成直径
0.1
～
0.2mm
，圆形。中心突<
/p>
出，
透明的浅灰色小菌落
。
72h
后菌落直径可达
4mm
。
在液体培养基中生长良好，开始浑浊生长，
24h
后为
沉淀生长，
48h
后形成菌膜，稍加震动菌膜呈钟乳石状下垂
。
（
3
）生化反应：
不活跃，
在双糖铁培养基上可
分解葡萄糖，少数菌株可分解乳糖，不产生硫化氢，
MIU
培养
基无动力，不产生靛基质，尿素酶试验阴性。
2.
微生物学检验
（
1
）标本采集：主要采集血液、痰和淋巴结穿刺液。
（
2
）检验方法及鉴定：
鼠疫耶尔森菌为甲类病原菌，传染性极强，
故应严格遵守检验操作规程，要求
实验室有隔离设施，防鼠、防蚤和
严密的个人防护措施；用过的实验器材及物品随时消毒处理。
1
）直接涂片检查：一般制片两张，
分别用于革兰染色和美蓝染色，可见革兰阴性球杆菌，形似芝麻，
两端浓染。
2
）分离培养：鼠疫耶尔森菌学检验中分离培养步骤十分重要，分离培养时未污染标本可直接接种血平
板，污染标本则需接种选择性培养基，如龙胆紫亚硫酸钠琼脂。经
2
8℃～30℃培养
24
～
48h
后，挑选菌落
-
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