反复-拦河坝
目
录
中文摘要
.
..................................................
......
2
ABSTRACT
.
..............................................
..........
2
1.
引言
.
.......................................
...................
3
2.
材料与方法
< br>.
...................................
................
3
2.1
实验材料
................................................ ..
3
2.2
培养基的配制及其灭菌
......................................
4
2.3
主要仪器
................................................ ..
4
2.4
染色液的制备
..............................................
4
2.5
菌落总数的测定
............................................
4
2.6
革兰氏染色
< br>............................................... .
5
3
结果
..
..................................................
.......
5
3.1
平板计数的结果
............................................
5
3.2
水样中细菌总数的计算
......................................
6
3.3
革兰氏染色结果
............................................
6
4.
讨论
.
.......................................
...................
7
参考文献
.
..................................................
......
7
致谢
.
..
..................................................
........
8
连云港师范高等专科学校毕业论文
中文摘要
摘要:
本实验采用平板菌落计数法对连云港师范高等专科学校女生宿舍
2A320
的管道自来
水,圣王桶装水及校内教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎
瓶装水分别进行了菌落总数
的测定,并对其中的细菌进行培养,经过革兰氏染色和镜检,
初步观察了细菌的形态和革
兰氏阴阳性鉴定。实验结果表明校内管道自来水的菌落总数为
66cfu/ml
,符合国标
GB <
/p>
5749-85
,
超市销售的康师傅、<
/p>
统一、
今麦郎瓶装水中菌落总数分别为
0
.5cfu/ml
、
1cfu/ml
、
1cfu/ml,
均符合国家标准
GB
l0789-89
,而桶装水的水质不是很理想,测定的菌落总数为
520cfu/ml
,远超过了国标
GB
19298-2003
中的规定。通过本次实验,期待更多的在校师
生,能够关注饮用水质量,关爱健康,增强安全用水意识。
关键词
:
饮用水;平板菌落计数法;菌落总数的测定
;革兰氏染色
ABSTRACT
Abstract:
Total
number of colonies of using plate ,Lianyungang
Teachers College
dormitory
2A320
water
pipeline,
Sage
Bottled
Water,
And
school
education
in
supermarkets sell Master Kong, unity,
bottled water Jinmailang were terminated in
this
study
by
colony
count
method
,and
which
the
bacteria
were
cultured,
after
Gram
staining
and
microscopy,
we
observed
the
shape
of
bacteria
Preliminarily
and Gram
Identification of yin and yang
The results show that the total number
of
campus
pipeline
water
for
the
colony
were
66cfu/ml,
meet
the
national
standard
GB
5749-85,
Master Kong
supermarket sales, unity, bottled water Jinmailang
total
number
of
colonies
were
0.5cfu/ml,
1cfu/ml,
1cfu/ml,meet
the
national
standard
GB
l0789-89,however
the
water
quality
of
bottled
water
is not
very
satisfactory,
the
determination
of
the
total
number
of
colonies
were
515cfu/ml,
which
far
exceeding the national
standard GB 19298-2003 in the
regulations.
Through this
experiment,
looking
for
more
teachers
and
students,
to
focus
the
quality
of
drinking water, health
care, increased awareness of safe water.
Keywords:
drinking water,
lat colonies notation, The etermination of total
colonies,Gram's staining
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页
连云港师范高等专科学校毕业论文
饮用水中菌落总数的测定
1.
引言
各
种天然水中常含有一定数量的微生物。水中微生物的主要来源有:水中的水生性微
生物(
如光合藻类)
、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排
泄物等。水中的病原微生物主要来源于人和动物的传染性排泄物。
<
/p>
水是生命之源,和阳光、空气一样,是生命不可或缺、最基本、最必需的自然资源。
水参与了生物体内所有的生理生化过程,同时又是体内进行系生化反应的良好场所。故水
的微生物检验在保证饮水安全和控制传染病上有着重要的意义,同时也是评价水质状况的
重要指标。国家饮用水标准
GB
5749-85
规定,菌落总数不得超过
100 cfu/g(
ml)
,所用
的方法是稀释平板计数法。
平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取
一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌
落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接
种量即可换算出样品中的含菌数。
根
据我校的实验条件,本实验拟选用国标规定的平板菌落计数法,对我校女生宿舍
2A32
0
的管道自来水,圣王桶装水及校内教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水进
p>
行了菌落总数的测定,为全校师生的饮水安全提供理论和实践依据。
2.
材料与方法
2.1
实验材料
随着生活水平的提高,人们对水的质量有了高要求,生产商择世所需,引进了先进的
净水设备,来满足不同层次的人群需求。小区居民喝自来水,办公室人员喝桶装水,学生
则喝瓶装水的居多,针对以上情况,本实验选取的水样是连云港师范高等专科学校女生宿
舍
2A320
的管道自来水、圣王桶装水和校内教育超市出售的
康师傅、统一、今麦郎三种常
见瓶装水。详情见表
1
。
表
1
样品编号及存放时间
样品名称
管道自来水
圣王桶装水
康师傅
统
一
今麦郎
样品编号
ZS
ST
KS
TS
JS
实验日期
2010.11.15
2010.11.15
2010.11.15
2010.11.15
2010.11.15
存放时间
(<
/p>
天)
/
3
25
23
26
量取体积(
ml
)
15
15
15
15
15
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连云港师范高等专科学校毕业论文
2.2
培养基的配制及其灭菌
由于水中的细菌种类繁多,它们对营养和其它生长条件的要求差别很大,不可能找到
一种培养基在一种条件下,使水中所有的细菌均能生长繁殖。因此本实验采用普通牛肉膏< p>
蛋白胨琼脂培养基培养出的细菌总数仅是一种近似值。本培养基的主要成分有:牛肉膏,< p>
蛋白胨,氯化钠,琼脂,自来水
[1]
。
根据配置培养基的体积,事先加水溶解已经量取好的相应质量的牛肉膏
、蛋白胨、氯
化钠,然后加入到未沸的
600-700ml
p>
的自来水中,边加热边用玻璃棒搅拌,待水沸腾后加
入琼脂,再加水
至
1000ml
,不断地搅拌直到液体呈半透明状将其取下,分
装。分装好的培
养基运用高压蒸汽灭菌,
121
℃,
15min
即可
[2]<
/p>
。
2.3
主要仪器
手提式高压灭菌锅
(型号:
YX280A
< br>)
、
超净工作台
(型号:
SW-CJ-1B
)
、
恒温培养箱
(型
号:
PYX-120
)
、显微镜(型号:
OLYMPUS
CH20
)
。
2.4
染色液的制备
革兰氏染色实验需要的染色液有
:
草酸钙结晶紫、碘液
、
95%
的乙醇、番红
[3]
。
草酸钙结晶紫的制备
:
先将
2.0g
结晶紫溶于
20ml95%
的酒精,
0.8g
的草酸铵溶于
80ml
蒸馏水中,然后将两液混合,
静置
48
小时使用。
碘液的制备
:
先将
1.0g<
/p>
碘与
2.0g
碘化钾混合,加水少许,略
加摇动,待碘完全溶解
后再加蒸馏水定容至
300ml
。
95%
的乙醇的制
备
:
将
95ml
的乙醇溶入
100ml
的水中。
<
/p>
番红的制备
:
将
0.25g
沙黄溶解于
10ml95%
的乙醇中,
待完全溶解再加蒸馏水至
100ml
。
2.5
菌落总数的测定
采用国标中规定的平板菌落计数法,详细步骤见下。
2.5.1
水样的采取
自来水,先将自来水龙头用火焰烧灼
3min
灭菌,
再开放水龙头使水流
5min
后,以灭
菌三角烧瓶接取水样,待用。
桶装水,取未打开的桶装水,打
开盖子倒入灭菌的锥形瓶中,待用。
瓶装水,在超净工作台上
打开盖子将水倒入灭过菌的锥形瓶中,待用。
2.5.2
水样稀释及培养
2.5.2.1
水样稀释
取
3
个灭菌空试管,分别加入
9ml
灭菌水。取
lml
水样
注入第一管
9ml
灭菌水内、摇匀,再自第一管取
1ml
至下一管灭菌水内,如此稀释到第三管,稀释度
分别为
10
-1
、
< br>10
-2
与
10
-3
。管道自来水、圣王桶装水和三种瓶装水分别按照以上叙述进行稀
释。通过预实验,本实验所采用的管道自来水的水样稀释度为
10
0
,圣王桶装水的水样稀
第
< br> 4
页
共
8
页