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本科毕业论文
题
目
稻曲病菌对戊
唑醇的室内抗性筛选
In
vitro
adaptatio n
to
tebuconazole
in
U
stilaginoidea
virence
strains
姓
专
名
业
黄进
动植物检疫
罗朝喜
学
号
060801024
指导教师
职
< p>称教授
中国·武汉
二○一○年六月
分类号
密级
华中农业大学本科毕业论文
< br>稻曲病菌对戊唑醇的室内抗性筛选
In
vitro
adaptation
to
tebuconazole
in
Ustilaginoidea
virence
strains
学生姓名:黄进
学生学号:
060801024
学生专业:动植物检疫
指导教师:罗朝喜
教 p>
授
华中农业大学植物科学技术学院
二○一○年六月<
/p>
目录
摘要
.................. .................................................. .................................................. ....................II
Abstract.........
..................................................
..................................................
......................III
关键字
.... .................................................. .................................................. .............................III
1
前言
........................................ .................................................. .............................................1
1.1
稻曲病菌
...................... .................................................. ............................................1
< p>1.2
戊唑醇
........................ .................................................. ..............................................3
1.3
病原菌室内抗性筛选
................ .................................................. ..............................5
2
材料与方法
…………………………………………………………….…………………..5
2.1
试验材料
...................... .................................................. ............................................5
< p>2.2
实验内容
....................... .................................................. ...........................................5
2.3
实验结果与分析
..................... .................................................. ..................................5
2.4<
/p>
讨论
................................... .................................................. .......................................8
参考文献
...................................... .................................................. ...........................................9
致谢
.................................... .................................................. .................................................. ...9
附录
.......................... .................................................. .................................................. ...........10
摘
要
稻曲病的发病
面积逐年增加,为害日益加重,已成为水稻主要三大病害之一。
戊唑醇通过抑制真菌中麦
角甾醇的生物合成对稻曲病有很好的防治效果。本文主要是
用戊唑醇对稻曲病菌的两种生
理小种进行了室内抑菌活性测定。将两种生理小种在不
断提高浓度梯度的戊唑醇
PDA
培养皿中培养,直到其抗性无法得到增强。然后在
PDA<
/p>
培养皿中继续转接
5
代,测量原始菌株、转接
16< /p>
代的对照菌株、驯化菌株以及
再度转接
5
代 的菌株的
EC50
,看其抗性是否得到保持。
关键词
p>
戊唑醇;水稻稻曲病;抗性
AS
the
area
of
rice
incidenced
b y
Ustilaginoidea
oryzae
(Patou.)
Bref
increased
year
b
y
year
,
and
the
dam age
is
increasing
,
it
has
become
one
of
the p>
three
major
diseases
of
nazole
effects
on
inhibit ing
biosynthesis
of
ergosterol p>
that
has
great
control
< p>effect
on
Ustilaginoidea
o ryzae
(Patou.)
Bref.
WE
ma inly
have
indoor
Antifungal
< p>activitieson
two
races
of
Ustilaginoidea
oryzae
(Pa tou.)
Bref
with
races
were
rasied
concentration
gradient
in
PDA
plate
wit h
tebuconazole
in
rasing
c oncentration
gradient
,
unti
l
their
resistance
can
not
be
continue
to
div ert
for
5
generations
in p>
PDA
plate
,
measure
the
EC50
of
original
st rain
、
control
strain
and< /p>
domesticated
strains
treated
after16
generations
、
the
strain
re-switched
for
5< /p>
generations
to
see
whether
the
resistance
have
b een
maintained
Abstract
tebuconazole
;
Ustilaginoidea
or yzae
(Patou.)
Bref
;
resis tance
Key
words
1
前言
杀菌剂对植物病原菌的抑菌活性测定是研究杀菌剂的基础。通过室内活性测定可
p>
以明确杀菌剂的作用效果及抑菌谱。戊唑醇由于杀菌活性高等特点
,
目前已经在市场上
大量使用。但是抗药性问题的出现影响着杀菌剂的发展。室内对
病原真菌进行抗性筛
选
,
可以模拟出田间病原菌对杀菌剂 的抗药性发展动态
,
对杀菌剂进行抗药性风险评估
,
为
田间科学合理的用药提供理论指导。
1.1
稻曲病菌
稻曲病又称伪黑穗病、绿黑穗病、谷花病、青粉病
,
< p>是一种由病原真菌引起的后期
谷粒病害
,
通常在晚稻 上发生
,
多发生在水稻收成好的年份
,
使农民误以 为是丰收的象征
,
俗称
“
丰产果
”,
在全国各稻区均有发生。
20
世纪
80
年代之前
,
该病零星发生
,
属次要 病
害
;90
年代以来
,
由 于密粒直立型超级稻和优质水稻品种的大面积推广
,
单季稻熟制的扩
大
,
施肥水平偏高和不合理
,
尤其是单 季稻孕穗期多雨适温的频率较高
,
稻曲病的发病面积
逐年
增加
,
为害日益加重
,
已成为水稻主要三大病害之 一。稻曲病的发生
,
会造成水稻大面
积空秠率增高
,
既不利于晚稻高产
,
又严重影响稻米的质量
< p>,且稻曲病病菌还会产生毒素
,
对人畜有不良影响。
该病只发生于穗部
,
为害部分谷粒。受害谷粒发病初期外观与健康
谷粒误明显区别
,
在水稻齐穗
3~5D
内 可显症
,
病菌早期侵害子房
,
花柱及柱头
,
后期侵入幼
嫩颖里的外表皮
,
蔓 延到配孔中
,
然后大量繁殖并形成子座。发病时
,
病菌首先在谷粒内部
生成小菌核
,
形成菌丝块并逐渐膨大
,
内外颖裂开
,
露出淡黄色块状物
,
即孢子座
,
后包于内
外颖两侧
,
比健康谷粒大
3~4
倍
,
形成近球形病粒
,
呈黑绿色
,
初外包一层薄膜表面 光滑
,
后
显粗糙龟裂
,
散 发生墨绿色粉末
,
即病菌的厚垣孢子
,
使水稻结实 率和干粒重下降
,
俗称
“
灰
包
”
。一般每穂有病粒
1~5
粒
,
严重的可达
20~30
粒。有的两侧生黑色扁平菌核
< p>,风吹雨
打易脱落。(吴格娥,2000;杨洵,2007;章方海
,2006)
病原
Ustilaginoideavirens(Coo ke)Tak
.
称稻绿核菌
,
属半知菌亚门真菌。 分生孢子座
6-12×4-6(μm),
表面墨绿色
,< /p>
内层橙黄色
,
中心白色。分生孢子梗直径
2-2.5 (μm)
。分生孢子
单胞厚壁
,
表面有瘤 突
,
近球形
,
大小
4-5(μm)
。菌核从分生孢子座生出
,
长椭圆形
,
< p>长2-
20mm,
在土表萌发产生子座
,
橙黄色
,
头部近球形
,
大小< /p>
1-3mm,
有长柄
,
头部外围生子囊壳
< p>,
子囊壳瓶形
,
子囊无色
,
圆筒形
,
大小
180-22μm,
子囊孢子 无色
,
单胞
,
线形
,
大小
120-
180×0.5-1(μm)
。厚垣孢子 墨绿色
,
球形
,
表面有瘤状突起
,
大小
3-5×4-6(μm)
。有性态为
ClavicepsvirensSakurai
称稻麦角
,
属子 囊菌亚门真菌。(王云川
,2006
)
1.2.1
传播途径和发病条件
(1)
大量病原菌存在
病菌主要以菌核在土壤中越冬
,
也可以厚垣孢子在被害谷物内或健康谷粒颍壳 上越
冬。翌年
7~8
月份
,
当菌核和厚坦孢子遇到适宜条件时
,
即可萌发产生子囊孢子和分生
孢子
,
随气流和水流传播
,
落到水稻植 株上
,
在水稻破口时倾入花器和幼颖
,
由厚垣孢子 再
生小孢子及子囊孢子进行初侵染。连作地块时间长
,
有 效菌原积累多
,
发病率高。
(2)
品种抗 性差
杂交稻重于常规稻
,
粳稻重于糯稻
,
大穗型
,
破口抽穗期长的品种发病重。
(
3)
气候原因
气温
24-32
℃病菌发育 良好
,26-28
℃最适
,
低于
1 2
℃或高于
36
℃不能生长。抽穗扬
花期
遇雨及高温
,
特别是在阴雨天发病重。
(4)
抽穗早的品种发病较轻。
(5)
施肥
随施氮量的增加
,
稻曲病发病程度加重
,
尤其是后期重施穗肥有利于发病。另施肥不
当或施肥太迟
, p>
容易造成贪青
,
剑叶偏长
,
形成穗部小 气候相对湿度较高
,
受阳光直射较少
,
一
直延迟抽穗。钾肥有壮杆作用
,
可使叶直
,
叶厚< /p>
,
穗部受光良好
,
减少病害滋生条件。
(6)
长期深水漫灌
,
不晒田。
(7)
破口前后为及时用药预防。
(8)
重视不够 p>
,
防治信息不能及时传达。(张业金
,2006,
王琴
,2005
)
1.2.2
防治方法
1.2
(1)
合理安排种植期
,
避开发病高峰时节。适时早播早植
,
加强管理
,
错开穗期雨季以减轻
病害。健生栽培
,
提高逆抗水 平。
(2)
选用抗(耐)病品种。
(3)
避免病田留种
,
深耕翻埋菌核。发病时摘除并销毁病粒。
(4)
科学管水。
(5)
改进施肥技术基肥要足
,
追肥要早
,
慎用穗肥
,
增强稻株抗病能力。
(6)
合理密植每公顷栽
22 5000
穴左右为宜。过于密植
,
易导致田间荫蔽
,
湿度大
,
利于发
病。
< br>(7)
确定重点防治对象田感病品种种植区
,
山区及偏施< /p>
,
迟施氮肥的田块
,
均应列入重点防
治对象田。
(8)
抓住防治适期施药抓住水稻分蘖末期
,
破口前
3d-7d,
始穗期三个关键时期施药(可
有效兼治纹枯病等病害)。
(9)
药剂防治。
(10)
清除病源
,
减少初次侵染来源。
(11)
加强测报
,
及时用药防治。(段宗云 p>
,2007
)
戊唑醇
戊唑醇是一种羟
乙基三唑衍生物
,
属三唑类内吸杀菌剂。毒性分类属低毒杀菌剂。
该化合物由德国拜耳公司于
1986
年最先开发成功
,< /p>
英文通用名
,
化学名称为
1-
(
4-
氯苯基)
-4,4-
二甲基
-3
(
1H-1,2,4-
三唑
-1-
基甲基)戊
-3-
醇
与其它所有三唑类杀菌剂一样
,
戊唑醇抑制真菌中麦角甾醇的生物合成
,
可用作 种子处
理剂和叶面喷雾剂
,
不仅活性高
,
而且持效期长
,
对防治许多作物包括单子叶植物和双子
< p>叶植物病害安全有效。甾醇类化合物是生物维持生命及生长发育不可缺少的物质。在
真菌和细菌中
,
主要是合成麦角甾醇
,
它 是构成细胞膜的重要成分
,
对细胞膜的渗透性起
重要作用
。麦角甾醇的生物合成已成为新型杀菌剂的重要靶标之一
,
其抑制剂由于活性 p>
高、不易产生抗药性等特点
,
在生产上受到普遍重视。
1.2.1
作用特点
从作用方式看
戊唑醇对稻曲病病菌表现为抑菌作用
,
对植物则表现为治疗 作用。
从作用机理看
,
主要是对病原真菌的麦角甾醇生物 合成起抑制作用。一般认为三唑类麦
角甾醇抑制剂的主要机理是抑制麦角甾醇中间体的氧
化脱甲基反应
,
特别是对
2,4-
亚甲
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